响应面法优化嗜酸乳杆菌乳清培养基.pdf

中国酿造
2010年第10期
硏究报告
总第223期77
响应面法优化嗜酸乳杆菌乳清培养基
王玉荣,刘大为,陈勉华,王昌禄
(天津科技大学食品工程与生物技术学院食品苢养与安全教育部重点实验室,天津300457)
摘要:筛选嗜酸乳杆荫( Lactobacillus acidophilus La-1)低成本培养基并用响应面法进行优化。从玉米粉培养基、酵母浸出液培养
基、乳清粉培养棊、麦芽汁培养基中筛选嗜酸乳杄菌棊础培养基。利用 Plackett-burman i设计确定重要因子,最陡爬坡试验确定因素水
平,最后用响应面法优化最佳培养基配方。优化得到乳清培养基为乳清粉12.99%wv)、葡萄糖2.75%(w/V)、NHAH2PO,0.52%(wv)。
采用优化的培养基,以4%接种量接种La-l蘭种子液,37℃培养22h,菌体密度为1.93x10° cfu/mle
关键词:嗜酸乳杄菌;响应面分析法;培养基优化;乳清
中图分类号:093-335
文献标识码:A
文章编号:0254-5071(2010)10-0077-04
Optimizaion of e w mem of a balus ac o lus by reponse surface methodology
WANG Yurong, LIU Dawei, CHEN Mianhua, WANG Changlu
(MOE Key Laboratory of Food Nutrition and Safety, College of Food Engineering and Biotechnology,
Tianjin University of Science Technology, Tianjin 300457, China)
Abstract: A low-cost basal medium for cultivating Lacobac ls acidophilus La- was selected from com powder medium, yeast extract medium and
whey medium, and was optimized by re onse surface methodol y. The important factors were selected by Placket-burman design. The facters and
levels were confirmed by steepest ascent test. The optimal medium was obtained by response surface analysis. The optimal whey medium was
composed of 12.99% whey power (w/), 2. 75%glucose(w/) and 052 NHH PO(w/).The cell density reached 1.93X10CFU/m after L.
acidophilus La-1 was incubated on the optimum fermentation medium with 4% inoculum at 37 form 22 h
Key words: Lactobacillus acidophilus response surface methodology; medium optimization; whey
嗜酸乳杄菌具有较强的耐酸和耐胆汁能力及调整肠MgSO-0.2gL,柠檬酸铵2gL, Tween-801mL,pH值为6
道群、缓解乳糖不耐症、抗肿瘤、增强免疫力、降低胆固6.6,121℃灭菌20min
醇等生理功能?。因此,嗜酸乳杆菌受到众多研究者的广
玉米粉培养基:称取玉米粉10g,先用少量水调成糊
泛关注。高密度培养是乳酸菌开发应用的关键,设计优化状,再逐渐加水至500mL,摇匀后置于80℃水浴保持1.5h后
合适的增菌培养基是实现高密度培养的基础。乳清是工过滤,潓液补加水至500mL,分装三角瓶,121℃灭菌20min。
业生产干略的副产品,含有乳糖、乳清蛋白、维生素、矿物
酵母浸出液培养基:酵母抽提物5gL,葡萄糖15
质等多种营养成分?,并且价格低廉,适合乳酸菌工业化121℃灭蓝20min。
大规模培养。本试验以乳清粉为基础培养基,在添加葡萄
乳清培养基:乳清粉100gL,葡萄糖I5g/L,KH2POa
糖、NHH2PO、KH2PO4MgSO47HAO、NaAc的基础上利2gL,121℃灭菌20min
用响应面法优化了嗜酸乳杆蘭( Lactobacillus acidophilus
麦芽汁培养基:10Be'麦芽汁,115℃灭20min
La-1)增蘭培养基,为嗜酸乳杆菌工业化应用提供支持。
菌落计数培养基:在MRS液体培养基中加入2.5%琼
1材料与方法
脂粉,121℃灭20min。
1.1茵种
1.3试验方法
嗜酸乳杆La-1( Lactobacillus acidophilus La-1)(以下1.3.I乳酸菌活菌计数法
简称La-1菌)由天津科技大学食品生物技术研究室保藏。
采用MRS平板菌落计数法计数(GB/T4789.35-2008
1.2主要试剂及培养基
食品卫生微生物学检验食品中乳酸菌检验)。
脱盐乳清粉D9O:新西兰;其他试剂皆为国产生化试剂。1.3,2菌种活化
蘭种保存培养基:脱脂乳粉加蒸馏水制成浓度为12%
将嗜酸乳杆菌La-1接种于经过115℃、20min灭菌的脱
的脱脂乳液,pH自然,115℃灭菌20min
脂乳奶管中,37℃进行活化。待奶管凝固以后,再次进行转
MRS液体培养基:葡萄糖20gL,蛋白胨10gL,酵母膏接,直至凝乳时间<8h
5gL,牛肉膏10gL,KH2PO2gL,NaAc5gyL,MnS0O,02gL,133种子液的制备
收稿日期:2010-07-19
基金项目:国家十一五科技支撑计划项目”(2006BADO4A06,2006BAD27B09):乳品生物技术与工程教育部重点实验室(内蒙古农业大学)
207开放基金项目
作者简介:王玉荣(1976),男,山东烟台人,助理研究员,研究方向为食品生物技术。
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