响应面法优化嗜酸乳杆菌增殖培养基.pdf

2011No.9
.134- Serial No 234
China Brewing
Research Repo
响应面法优化嗜酸乳杄菌增殖培养基
张娅,冷一非1,李建华,姚娟2,李沛2,梁运样,李知洪,俞学锋2,李啸2体
(1.三峡大学化学与生命科学学院,湖北宜昌413003;2.安琪蹲母股份有限公司,湖北宣昌443003
3.华中农业大学生命科学与技术学院,湖北武汉430068)
摘要:为了获得低成本,易配制且增菌效果优良的嗜酸乳杆薗工业化培养基,研究采用 Plackett- Burman试验设计筛选出了酸乳
杆菌生长的显著影响因子,通过响应面设计试验,得到了嵴酸乳杆蔤的优化增殖培养基配比。结显示:酵母浸粉,葡萄糖,硫酸锰为
乳酸菌生长的显著影响因子,优化的增殖培养基配比为:酵毋浸粉8.682%,葡萄糖3.842%,硫酸锰0.02%,硫酸镁0.058%,柠檬酸三
铵0.2%,Twea-800.1%,裤酸氢二钟0.1%,乳清粉0.5%;采用优化培养基后,细胞密度可达到16.49x10efu/mL:较经典MRS培养基,
活菡数提高了20.61倍,其成本较MRS培养基降低了约30%
关键词:响应面分析;嗜酸乳杄薗;高密度发酵;工业化培养基
中阳分类号:TS252.1
文献标识码:A
文章编号:0254-5071(2011)09-0134-04
Optimization of a roli eaton mm of acacus acidophilus using response surface mthodology
ZHANG Ya!, LENG Yifei, LI Jianhua YAO Juan, LI Pei, LIANG Yunxiang, LI Zhihong, YU Xuefeng, LI Xiao
(1. College of Chemistry and Life Science China Three Gorges University, Yichan 4430, China, 2. Angeyeast Co, Ltd
Chan 443003, China 3. C le e of Science and T o Azhong A u nies Whan43 68,a
Abstraethnordertoobtainanindustiaizedculturemedilum,whihcoultbelowcstandeasytoprepareandbhaveexcelentenrichmentefectfor
Iacobaci i he si n a n the h oflacbac s acop s w emmed by Pacett-burmandesig and
prolifeation mm for a s w mz a des M) e T l show t h si ficanfaors w
yeast ex rac huc and Mn and he ma li er m was s low y xt. 82%glcs 3.1 Mn .01n
MgSO0.0589%,ammomniumcitratc0.2%,Tweea-800.1%,KlPO0.1%,wheypowder0.5%.Usingthisoptimalmcdtim,celamountscouldreach
16. 49x10cfuml in fmm at th an e d amn of olony mmn u was a b ms an a f MR m The-
timized owth medium re ced cost by 30%than that of MRS medium
Kerywords:responsesurfacemethodology;Lacrabacihsaeidopbiughighdemnsityterumentation;industraiedculrmediumn
收稿日期;2011-05-19
作者简介:张娅(1988-),女,硬土研究生,研究方向为发酵工程;李啸,副教授,通讯作者
表3回归统计的方差分析
个是液体发酵:2种方法都是评价淀粉在淀粉酶催化下
Table 3, ANOVA of regression analysis
的水解能力,但固体平板上是通过残留底物淀粉与碘液显
项目自由度平方和均
F显著性F色而显示水解圈大小,液体发酵中淀粉酶活力则是通过水
?归分析
4.17490441749040.2974690589376解产物还原糖的生成速率来体现:水解圏大小以直径量
残差
31435.076914.03474
度,还原糖的量则以吸光值计算。总之,2法原理不同,微
总计
32439.2518
生物培养环境不同,检测方法的灵敏度也有差异,造成其
表2、表3表明,淀粉水解圈法和水杨酸(DNS)法的结果的测定结果有较大差距,水解関直径大小与掘瓶发酵分析
的相关系数R-0097491,方差F-0297469,p=0589376~005,获得的酶活力结果没有明显的相关性。研究结果为菌种
说明2种分析结果之间不存在线性相关性。
筛选、遗传改良、复壮保藏、酶制剂的质量鉴定选用合适
3讨论
的淀粉酶检测手段,并评价不同的检测方法结果之间的相
采用自行分离的己知具淀粉酶活性的香菇( Lentinula关性提供了研究依据,
edodes)、平菇( Pleurotus ostreatus、酒曲根霉( Rhizopus sp-参考文献
为实验菌种,并从存在淀粉基质的土壤中成功分离出淀粉]张树政制剂工业Dn北京、科学出版社,199564
酶产生菌,共33个菌种或薗株,先用固体平板上的淀粉水解2]王愨超,陈今朝,韩宗先,淀粉酶的研究与应用[口重庆工商大学学报
圈与接种薗落面积之比判断其淀粉醇活性,再用3,5-二硝基
自然科学版,2010,27(4:368-371
水杨酸法测定液体发酵产生的淀粉酶活力,结果表明2种『月社冰冰,郝帅,李运,第.高温淀粉酵柝因突变体在大肠杆南、毕
方法都能判断供试徵生物产淀粉晦的活性,但2种方法评
赤酵母中的表达.微生物学报,2006,46(5):827-830
4]张强,刘成君,蒋芳,等耐高温淀粉产生菌的分离鉴定及发酵
价的淀粉酶的活性强弱结果不存在线性相关性,2法在33个
条件与酶性质研究门食品与发酵工业,2005,31(2):3437
菌种或菌株中评出的前10名差异较大?2法使用的培养基『5!朱海霞,石英,张庆第,等.3,5-二硝基水杨酸(DNS比色法测定马
配方和培养温度、初始p圧值相同,但一个是固体平板,另
铃还原糖含趾的研究η.中因马怜薯,2005,19(5):76-78
万方数据