GB 13085-1991 饲料中亚硝酸盐的测定方法.pdf

中华人民共和国国家标准
饲料中亚硝酸盐的测定方法
GB13085-9
Method for determination of nitrite
in feeds
1主题内容与适用范
本标准规定了饲料中亚硝酸盐的测定方法。
本标准适用于伺料原料(鱼粉)、配合饲料(包括混合饲料)中亚硝酸盐的测定。
2原理
样品在微破性条件下除去賃白质,在酸性条件下试样中的亚硝酸盐与对氨基苯磺酸反应,生成重氮
化合物,再与N-1禁乙二胺盐酸盐偶合形成红色物质,进行比色测定。
3试剂和溶液
本标准所用试剂均为分析纯,水为蒸馏水或相应纯度的水。
3-1四硼酸钠饱和溶液:称取25g四硼酸鈉(Na2B-O,?10HAO,GB632),溶于500mL温水中,冷却后
备用
3-210.6%亚铁氯化钾溶液:称取53g亚铁氰化钾(K,Fe(CN)。3H2O,GB1273),溶于水,加水稀释至
500mL。
3-322%乙酸锌溶液:称取110g乙酸锌(Zn(CH3COO)2'2H2O,HG3-1098),溶于适量水和15mL冰
乙酸(GB676)中,加水稀释至500mL。
3.40.5%对氨基苯磺酸溶液:称取0.5g对氨基苯磺酸(NIH1ACaH,SO3H?H2O,HG3-992),溶于10%
盐酸中,边加边搅,再加10%盐酸稀释至100mL,贮于暗棕色试剂瓶中,密闭保存,一周内有效。
3.50.1%N-1-乙二胺盐酸盐溶液:称取の.1gN-1-荥乙二胺盐酸盐(C1oH, NHCH2NH22IHCl),用少
量水研磨溶解,加水稀释至100mL,贮于暗棕色试剤瓶中密闭保存,一周内有效。
3.65mol/L盐酸溶液:量取445mL盐酸(GB62),加水稀释至1000m。
3-7亚硝酸钠标准贮备液:称取经115土5℃烘至恒重的亚硝酸钠(GB633)0.3000g,用水溶解,移入
500mL容量瓶中,加水稀释至刻度,此溶液每毫升相当于400g亚硝酸根离子.
3-8亚硝酸钠标准工作液:吸取5.00mL亚硝酸钠标准贮备液(3.7),置于200mL容量瓶中,加水稀释
至刻度,此溶液每毫升相当于10g亚硝酸根离子
4仪器、设备
4.1分光光度计:有10mm比色池,可在538nm处测量吸光度。
4-2分析天平:感量0.0001g
4.3恒温水浴锅。
4.4实验室用样品粉碎机或研钵。
国家技术监督屈1991-07-16批准
1992-04-01实施
GB1308591
4.5容量瓶:50(棕色)、100、150、500mL
4.6烧杯:100,200、500mL
4.了量筒:100,200、1000mL。
4.8长须漏斗:直径75~90mm。
4.9吸量管;1、2、5m1-。
4.10移液管:5、10、15、20ml
5试样制备
采集具有代表性的饲料样品,至少2kg,四分法缩分至约250g,磨碎,过1mm孔筛,混匀,装入密闭
容器,防止试样变质,低温保存备用
6测定步骤
6.1试液制备
称取约5g试样,精确到0.001g,置于200mL烧杯(4.6)中,加约70mL温水(60士5℃)和5mlL四
硼酸钠饱和溶液(3.1),在水浴(4.3)上加热15min(85士5℃),取出,稍凉,依次加入2mL10.6%亚铁氯
化钾溶液(3.2)、2mL22%乙酸锌溶液(3.3),每一步须充分搅拌,将烧杯内溶液全部转移至150mL容
量瓶(4.5)中,用水洗涤烧杯数次,并入容量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,静置澄清,用滤纸过滤,滤液为
试液备用。
6.2标准曲线绘制
吸取0、0.25、0.50、1.00、2.00、3.00mL亚确酸钠标准工作液(3.8),分别置于50mL棕色容量瓶
(4-5)中,加水约30mL,依次加入2mL0.5%对氨基苯磺酸溶液(3.4)、2mL盐酸溶液(3.6),混匀,在闭
光处放置3~5min,加入2mL0.1%N-1-乙二胺盐酸盐溶液(3.5),加水稀释至刻度,混匀,在闭光处
放置15min,以mL亚硝酸钠标准工作液(3.8)为参比,用10mrn比色池,在被长538nmn处,用分光光
度计(4.1)测其他各溶液的吸光度,以吸光度为纵坐标,各溶液中所含亚硝酸根离子质量为横坐标,绘制
标准曲线或计算回归方程
6.3测定
准确吸取试液约30mL,置于50mL棕色容量瓶(4.5)中,从“依次加入2mL0.5%对氨基苯磺酸溶
液(3.4)、2mL盐酸溶液(3.6)”起,按6.2的方法显色和测量试液的吸光度
7測定结果
7.1计算公式
x=m1×,150
1.5
X225
式中:X一试样中亚硝酸盐(以亚硝酸钠计)含量,mg/kg;
一一试样测定时吸取试液的体积,mL;
m;-VmL试液中所含亚硝酸根离子质量,g(由标准曲线读得或由回归方程求出)
试样质量,g
1.5-一亚硝酸钠质量和亚硝酸根离子质量的比值。
7.2结果表示
毎个试样取2个平行样进行测定,以其算术平均值为结果
结果表示到0.1mg/kg。
7.3重复性