GBT 18246-2000 饲料中氨基酸的测定.pdf

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GB/T18246-2000
言
本标准是根据FAO/WHO(联合国粮食及农业组织和世界卫生组织)植物蛋白评价组专家联席会
的推荐,在GB/T15399-1994《饲料中含硫氨基酸测定方法离子交换色谱法》、GB/T15400-1994
《饲料中色氨酸测定方法分光光度法》国家标准和NY/T56-1987(原GB7649-1987)《谷物籽粒氨
基酸測定的前处理方法》行业标准的基础上,充分吸纳国内外有关研究的最新成果和两次参加国际大型
氨基酸实验室间联合试验硏究的经验与结果制定的。
本标准的酸水解部分和国际公职分析化学家协会( AOAC International)的最新方法《饲料氨棊酸
测定方法》具有相同的构架,但补充了碱解色氨酸的离子交换色谱和高效液相色谱法,增加了酸提取添
加氨基酸的测定。
本标准对饲料氨基酸不同水解、测定方法的适应场合与局限性做了全面综合、归纳和阐述,改进了
有关国家标准的有如样品量、粒度和蒸发去酸温度等实验条件。但是,考虑我国具体情况,本标准未像
AOAC法那样采用内标法,而采用了外标法;在酸解法中,除以偏重亚硫酸钠做终止剂的氧化酸解法
外,其他水解法也未采用AOAC和欧共体标准通用的回流水解法,而采用了真空封管水解法。在碱解法
中,未用AOAC的氢氧化钠破解剂,而是沿用了NY/T57-1987(原GB7650-1987)《谷物籽粒色氨
酸测定法》中的碱解剂一一氢氧化锂,这也是与德国等国家的做法相一致的。
本标准达到了与AOAC等方法同样的准确度和精密度。
在具体应用中,一般可用常规直接水解法测定除色氨酸和含硫氨基酸(胱氨酸和蛋氨酸)以外的蛋
白水解氨基酸,用氧化酸解法测定含硫氨基酸,而用碱解法测定色氨酸。但使用者可根据自己的测定目
的,在本标准不同方法中组合、择用。
本标准的附录A是标准的附录
本标稚由农业部和全国饲料工业标准化技术委员会提出
本标准由全国饲料工业标准化技术委员会归口
本标摧负责起草单位:国家饲料产品质量监督检验中心(北京)。
本标准参加起草单位:中国农业科学院畜牧研究所、吉林省农业科学院大豆研究所和农业部谷物质
量检測中心
本标雅起草人:常碧影、张瑜、阎烹文、张明、梁维英、李静梅
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中华人民共和国国家标准
饲料中氨基酸的测定
GB/T18246--2000
Determination of amino acids in feeds
1范
本标准规定了饲料中氨基酸的测定方法。
本标准适用于配合饲料、浓缩饲料、添加剂预混合饲料、单一饲料和预泥料中氨基酸总量和添加游
离氨基酸的测定。
酸、碱水解法适于含动、植物蛋白的单一饲料、配合饲料、浓缩饲料和预混料中氨基酸总量的测定。
酸水解法不能测定色氨酸,其中常规水解法适于测定除含硫氨基酸(胱氨酸和蛋氨酸等)以外的蛋白水
解氨基酸;氧化水解法在以偏重亚硫酸钠为氧化终止剂时,适于测定除酪氨酸以外的蛋白水解氨基酸,
在以氢溴酸为终止剂时,适于测定除酪氨酸、苯丙氨酸和组氨酸以外的蛋白水解氨基酸。碱水解法只适
于色氨酸的测定。
酸提取法适于配合饲料、预混料和浓缩料中添加氨基酸,主要是赖氨酸、蛋氮酸含量的测定,也可
用于苏氨酸等其他添加(游腐)氨基酸含量的测定。
2引用标准
下列标准所包含的条文,通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时,所示版本均
为有效。所有标准都会被修订,使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。
GIB/T6432~-1994偁料中粗蛋白测定方法( eqv ISO5983:1979)
GB/T6433-1994料粗脂肪测定方法( eqv ISO5983:1979)
GiB/T15399~-1994恫中含硫氨基酸定方法离子交换色谱法
3方法原理
3.1酸水解法
常规(直接)水解法是使饲料蛋白在110C、c(HCl)=6mol/L.盐酸作用下,水解成单一-氨基酸,再
经离子交换色谱法分离并以茚三酮做柱后衍生测定。水解中,色氨酸全部破坏,不能测量。胱氨酸和蛋
氨酸部分氧化,不能测准。氧化水解法是将恫料蛋白中的含硫氨基酸(胱氨酸、半胱氨酸和蛋氨酸等)》用
过甲酸氧化,然后进行酸解,再经离子交换色谱分离、测定(详见GB/T15399)。水解中色氨酸破坏,不
能测定。酪氨酸在以偏重亚碗酸钠做氧化终止剂时,被氧化,不能测准。酪氨酸、苯丙氨酸和组氨酸则在
以氢溴酸作终止剂时被氧化,不能浏准。
3.2碱水解法
饲料蛋白在110C、破的作用下水解,水解出的色氨酸可用离子交换色谱或高效反相色谱(见附录
A)分离、测定
3.3酸提取法
饲料中添加的氨基酸以稀盐酸提取,再经离子交换色谱分离、测定。
国家质量技术监督局2000-10-24批准
2001-04-01实施