GBT 13112-1991 食品中环己基氨基磺酸钠的测定方法.pdf

中华人民共和国国家标准
GB/r13112-91
食品中环己基氨基磺酸钠的测定方法
Method for determination of sodium cyclamate in foods
1主题内容与适用范围
本标准规定了食品中环己基氨基磺酸钠的三种测定方法一气相色谱法、比色法、薄
层层析法
本标准气相色谱法及比色法适用于饮料、凉果等食品中环己基氨基磺酸钠的测定;薄
层层析法适用于饮料、果汁、果酱、糕点中环己基氨基磺酸钠的含量测定,样品中含有
0.1gkg环已基氨基磺酸钠即可检出,最低检出量为3~4g环己基氨基磺酸钠。
第一篇气相色谱法
2原理
在硫酸介质中环己基氨基磺酸钠与亚硝酸反应,生成环己醇亚硝酸酯(く〉-ONO)
利用气相色谱法进行定性和定量。
3试剂
本标准所用试剂,凡未指明规格者,均为分析纯(AR),水为蒸馏水。
3.1正已烷
3.2氯化钠
3.3层析硅胶(或海砂)。
3.450gL亚硝酸钠溶液。
3.5100gL硫酸溶液。
3.5环己基氨基磺酸钠标准溶液(含环己基氨基磺酸钠~98%):精确称取1.00g环己
基氨基磺酸钠,加水溶解并定容至100mL,此溶液每毫升含环己基氨基磺酸钠10mg。
4仪器
4.1气相色谱仪附氢火焰离子化检测器
4.2旋涡混合器。
4.3离心机
4.410μL微量注射器
4.5色谱条件
4.5.1色谱柱:长2m,内径3mm,U形不锈钢柱
4.5.2固定相: Chromosorb W AW DMCS80~100目,涂以10%SE-30。
4.5.3测定条件
柱温:80C;汽化温度:150℃;检测温度:150℃。
流速:氮气40mL/min;氢气3mL/min;空气300mL/min。
5样品处理
5.1液体样品:摇匀后直接称取。含二氧化碳的样品先加热除去,含酒精的样品加40gL
氢氧化钠溶液调至碱性,于沸水浴中加热除去,制成试样
5.2固体样品:凉果、蜜饯类样品将其剪碎制成试样。
6分析步骤
6.1试料制备
6.1.1液体试样:称取20.0g试样于100mL带塞比色管,置冰浴中。
6.1.2固体试样:称取2.0g已剪碎的试样于研钵中,加少许层析硅胶(或海砂)研磨至
呈干粉状,经漏斗倒入100mL容量瓶中,加水冲洗研钵,并将洗液一并转移压容量瓶中,
加水至刻度,不时摇动,1h后过滤,即得试料,准确吸取20mL于100mL带塞比色管,
置
冰浴中。
6.2测定
6.2.1标准曲线的制备,准确吸取1.00mL环己基氨基磺酸钠标准溶液于100mL带塞比色
管中,加水20mL,置冰浴中,加入5mL50gL亚硝酸钠溶液,5mL10gL硫酸溶液,摇匀,
在冰浴中放置30min,并经常摇动,然后准确加入10mL正己烷,5g氯化钠,摇匀后置旋
涡混合器上振动1min(或振摇80次),待静止分层后吸出己烷层于10mL带塞离心管中进
行离心分离,每毫升已烷提取液相当1mg环己基氨基磺酸钠,将标准提取液进样1~5pL
气相色谱仪中,根据响应值绘制标准曲线。
6.2.2样品管按6.2.1自“加入5mL50g兀亚硝酸钠溶液…”起依法操作,然后将试料
同样进样1~5L,测得响应值,从标准线图中查出相应含量
7计算
AX10X1000
10A
mx X1000
式中:Xー一样品中环己基氨基磺酸钠的含量,g4kg;
mー一样品质量,g;
V进样体积,uL;
10一正己烷加入量,mL
A一一测定用试料中环己基氨基硝酸钠的含量,μ
8精密度和允许误差
重复测定变异系数<7%。
两次平行测定相对允许误差绝对值≤10%,平行测定结果用算术平均值表示,保留二
位小数。
第二篇比色法
原理
在硫胺介质中环己基氨基磺酸钠与亚硝酸钠反应,生成环己醇亚硝酸酯,与磺胺重氮
化后再与盐酸萘乙二胺偶合生成红色染料,在550nm波长测其吸光度,与标准比较定量
10试剂
10.1三氯甲烷
10.2甲醇。
10.3透析剂:称取0.5g二氯化求和12.5g氯化钠于烧杯中,以0.01mo/L盐酸溶液定容
至100mL
10.410gL亚硝酸钠溶液。
10.5100g硫酸溶液
10.6100gL尿素溶液(临用时新配或冰箱保存)。
10.7100gL盐酸溶液。
10.810gL磺胺溶液:称取1g磺胺溶于10%盐酸溶液中,最后定容至100mL。
1091gL盐胺萘乙二胺溶液
10.10环己基氨基磺酸钠标准溶液:精确称取0.1000环己基氨基磺酸钠,加水溶解,最
后定容至100mL,此溶液每毫升含环己基氨基磺酸钠1mg。
临用时将环己基氨基磺酸钠标准溶液稀释10倍。此液每毫升含环己基氨基磺酸钠0.1mg。
11仪器
111分光光度计。
11.2旋涡混合器。
113离心机
11.4透析纸。
12试样处理
同第5章
13分析步骤
3.1提取
13.1.1液体试料:称取10.0g试料于透析纸中,加10mL透析剂,将透析纸口扎紧,放入
盛有100mL水的200mL广口瓶内,加盖,透析20~24h得透析液。
13.1.2固体试料:准确吸取10.0mL经“6.1.,2”处理后的试料提取液于透析纸中,以下
操作按“13.1.1”项下进行
13.2测定
13.2.1取2支50mL带塞比色管,分别加入10mL透析液和10mL标准液,于0~3℃冰
浴中,
加入1mL10gL亚硝酸钠溶液,1mL100gL硫酸溶液,摇匀后放入冰水中不时摇动,放置
1h,取出后加15mL三氯甲烷,置旋涡混合器上振动1min,静置后吸去上层液,再加15mL
水,振动1min,静止后吸去上层液,加10mL100gL尿素溶液,2mL100gL盐酸溶液,
再振动5min,静置后吸去上层液,加15mL水,振动1min,静置后吸去上层液,分别准
确
吸出5mL三氯甲烷于2支25mL比色管中。另取一支25mL比色管加入5mL三氯甲烷作
参比管。
于各管中加入15mL甲醇,1mL10gL磺胺,置冰水中15min,取出回复常温后加入
1gL盐酸萘乙二胺溶液,加甲醇至刻度,在15~30℃下放置20~30min,用1cm比色杯于
波长550nm处测定吸光度,测得吸光度A及As
13.2,2另取2支50mL带塞比色管,分别加入10mL水和10mL透析液,除不加10gL
亚硝
酸钠外,其他按“13.2.1”项下进行,测得吸光度Aso及Ao。
14计算
c A-A0
100+10
1000
X
?×
1000
1000
式中:Xー一样品中环己基氨基磺酸钠的含量,g/kg
m-样品质量
V一透析液用量,mL;