真菌毒素同时检测方法研究进展.pdf

2011年6月
中国粮油学报
Vol 26. No 6
第26卷第6期
Journal of the Chinese Cereals and Oils Association
Jun.2011
真菌毒素同时检测方法研究进展
张字昊2杨琳马良'2
(西南大学食品科学学院,重庆400716)
(重庆市特色食品工程技术研究中心2,重庆40071)
摘要真茵毒素污染范围广,毒性强,多种真菌毒素常常同时存在于同一种原料作物或食品中,且具有
多种共存效应,对人类健康构成严重威胁。目前单一种类真菌毒素的检测技术相对成熟,但不同种类真菌毒
素的分别测定成本较高,试判损耗且污染严重。多种毒素的同时检测技术可有效解决上述问题,但目前尚处
于研究的起步阶段。今后将在提高多种毒素联合提取率、回收率、屏蔽基质效应及降低检出限等方向深入
研究。
关键词真菌毒素联合毒性同时检测
中图分类号:TS207.3文献标识码:A文章编号:1003-0174(2011)06-0123-06
真菌毒素是真菌产生的次级代谢产物,人们已真菌毒素同时检测时回收率受到影响,且各种毒素
经发现400多种真菌毒素。毒性强的真茵毒素主要的检出限较单独检测时升高,灵敏度下降,因此多种
包括黄曲霉毒素B1( Afiatoxin B1,AFB1)、赭曲霉毒真菌毒素的同时检测技术在国内外均处在研究的起
素A( Ochratoxin,OTA)、杂色曲霉毒素( Terigmato-步阶段,目前尚不成熟。根据当前研究,今后在提高
cystin)、展青露素( Patulin,PIL)、玉米赤霉烯酮多种类毒素同时提取率、回收率、屏蔽基质效应及降
( Zearalenone,ZEA)、串珠蠊刀菌素( Moniliformin,低检出限等方向深入研究,将有助于实现同时对多
MF)、属于单端孢霉烯族化合物( trichothecenes)的种真菌毒素进行快速、准确、灵敏的检测。
呕吐毒素、T-2毒素(T-2 toxin,T-2)、脱氧雪腐镰
刀菌烯醇( Deoxynivalenol,DON)、伏马菌素(omom-1真菌毒素的联合毒性及限量标准
sin,FB)等。多年来,一些粮食在生长和贮存中,经常
真菌毒素对人和动物的健康具有潜在的危害,
被多种不同的真菌毒素污染,OTA和AFB1,PL和橘能致畸、致癌、致突变。几种真菌毒素协同作用对动
霉素,T-2和其他单孢菌素,FB1和MF等经常同时物健康和生产性能的副作用往往比一种真菌毒素单
污染一些作物り。即使一些真茵毒素不会同时污独的副作用要大。真菌毒素毒性的互作效应主要有
染同一粮食作物中,但食品加工通常把多种原料加加和效应、亚加性效应、协同效应、增效效应和
エ成一种食品,造成真菌毒素的累积,人们消费这些效应。有些毒素的结构和性质都非常相似,当
食品时可能会同时摄人多种真菌毒素,而这些毒素量大时才表现为加性效应。孙桂菊等。研究FB,和
可能存在毒性加和效应,对键康的危险系数增大,AFB,对大鼠联合毒性表明,两种毒素存在联合毒性
因此有必要对多种真菌毒素进行同时检测,縮短分作用,互作类型属于相加作用或协同作用。王刚
析时间,提高食品安全性。但是由于各类毒素的理等对AFB1和OTA联合毒性进行研究,试验组每
化、生化性质不同,在同时检测过程中,提取、净化、
千克商品肉鸡饲料中同时含有AFB1和OTA各100
浓缩富集、检测波长等各种条件的兼顾,导致多种类
?g,ND疫苗免疫抗体H效价与对照组相比显著降
低(P<0.05)。证明AFB1和OTA对ND疫苗的免
划(2
专项资金(XDT庆市高等教育教学改疫抑制作用存在加性效应。 Beate Tammer等研究
革研究项目(09-3-183
混合真菌毒素对人体T细胞功能影响,混合真菌毒
收稿日期:2010-07-05
作者简介:张字吴,男,1978年出生,博士,食品质量控制与开发素对T细胞功能的影响比单种毒素影响更大,当真
利用
通讯作者:马良,女,1979年出生,副教授,博士,食品安全检测技
菌毒素同时存在时,很低的浓度就能对免疫功能产
术与食品质量控制
生强的抑制作用。Rlj等对AFT,OTA和T-2联
万方数据
中国粮油学报
2011年第6期
合毒素进行研究,动物试验表明:21d后试验动物从素,开辟了真菌毒素分析的新领域。 EIISA主要是基
体重,进食量,骨灰,免疫血清等指标观察任意2种于抗原或抗体能吸附至固相载体的表面并保持其免
毒素有加性效应,但是,从血清蛋白和胆固醇等指标疫活性,抗原或抗体与酶形成的酶结合物仍保持其
考察任2种毒素也存在颉颅效应,没有现象表明3种免疫活性和酶催化活性的基本原理。在测定时,把
毒素同时存在时比任2种菲素联合毒性更强。Ana受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗
Marija Domijan等?用动物试验对OTA和FB1联体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反
合毒性研究表明,2种毒素共存时对肾细胞毒性有增应,用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复
效效应。正因为真菌毒素毒性强且污染频率广,世合物与其他物质分开,最后结合在固相截体上的酶
界各国纷纷建立真菌毒素限量标准,表1是部分国量与标本中受检物质的量有一定的比例,加入酶反
家和地区对真菌毒素的限量标准。
应的底物后,底物被酶催化变为有色产物,产物的量
1部分国家和地区中真菌毒素限量标准
与标本中受检物质的量直接相关,根据颜色反应的
国家
原料
市素限ン8深浅进行定性或定量分析。
中国
花生、玉米及制品
Goryacheva等建立了一种串联式酶联免疫测
鲜乳
AFM
定法同时检测香辛料中的AFB1和OTA,检测结果用
小麦、玉米
DON
苹果、山楂制品
HPIC-MS/MS验证,AFB1和OTA的检出限分别为
配合料、玉米
OA
1005ug/kg和10pg/kg,可同时对AFB1和OTA定性分
配合饲料、玉米
AEA
析。R. Ghali等对突尼斯人2004~2005年间消费
欧盟
花生及制品
谷物类
的209份不同食物,用竞争性酶联免疫方法分析
果汁
棒曲霉素
AFT、OTA和ZEA的含量。结果表明,主要污染的毒
谷物原料(小麦、玉米除外)DON
1250
素为OTA,59.8%的样品中含有OTA,平均含量为
谷物原料(玉米除外)
ADA
玉米
4000
(3.5t5.3)Wg/kg;:50.5%的样品受AFT污染,其中
美国
粮食类食品
AFT总量
15AFB1的污染率为37%;有15%的样品受ZEA污染
小麦原料
DON
2000
其平均含量为(10.4±11.8)ug/kg,3.8%的样品
日本
谷物
ART
俄罗斯
小麦粉
DON
1000
受AFT和OTA同时污染,7.2%的受检样品被AFT,
小麦粉
ZEA
1000
OTA和ZEA同时污染。 Debjani Saha等用酶联免
粮食
疫法同时测定红辣椒中的AFB1和OTA