几种培养基附加物对几丁质产量的影响.pdf

2010No.2
40· Serial No.215
China Brewing
Research Report
几种培养基附加物对几丁质产量的影响
王伟平,张华山,韩凤云,杨移志
(湖北工业大学生物工程学院,满北武汉430068
摘耍:试验了不同浓度的果糖、L谷氨酰胺及N-乙酰氨基葡萄糖对黑曲霉AS18合成几丁质的影响。发现在培养基中含有39%、0.03%和
0.05%的果糖、N-乙酰氨基葡萄糖和谷氨酰胺时,对黑曲合成几丁质有促进作用,其中前体物质N-乙酰氨基葡萄糖促进作用最为
明显。在培养基中添加0.03%的N-乙酰氨基葡萄糖,几丁质产量为2.62gL,提高了42%
关鍵词:黑曲霉;几丁质;培养基
中日分类号:93-335
文献标识码:A
文章编号:0254-5071(2010)02-0040-02
Effects of several media complement on the yield of chitin
WANG Weiping, ZHANG Huashan, HAN Fengyun, YANG Yizhi
(Department of Biological Eng, Hubei University of Technology, Wuhan 430068, China)
Abstact: The effects of fructose, I glutamine and N-ac - luc mine on e sythesis of chitin produced by Asper ill ni er were investigated in
this paper. It was found that the yields of chitin was hanced y the at on of ucose, 0.03%n-actyl-lucosamine and 0.05%glutamine
resecively The N-ac luc am a a r e on e yield of hi in The amount of chitin was increased by 42%2. 2) by complement
of 0.03% N-acetyl-glucosamine into the medium
Key words: Aspergillus niger, chitin, medium
几丁质( chitin))又名甲壳素,是2-乙酰氨基-2-脱氧-D-1材料与方法
呲喃葡萄糖和2-氨基-2-脱氧-D吡喃葡萄糖通过β-(1→4)1.]茵种
糖苷键连接的二元线性共聚物,广泛存在于甲壳纲动物
黑曲霉AS18:湖北工业大学微生物菌种保藏中心
虾、蟹的甲壳,昆虫的甲壳和真菌(包括酵母、等)的细1.2培养基
胞壁、藻类及植物的细胞壁中叫。几丁质作为一种用途广
PDA斜面培养基:称取马铃薯200g,去皮、切块,煮沸
泛的天然高分子化合物,具有独特的理化性质,无毒无味、30min后用纱布过滤,加葡萄糖20g,溶化后补水至100L,
耐热耐腐蚀、可生物降解,并具有独特的生理活性。十几115℃灭菌20min后制成试管斜面备用。
年来,几丁质和几丁质的脱乙酰产物壳聚糖在医药工业、
发酵基础(YEPD)培养基:葡萄糖2%,蛋白胨2%,酵
食品工业、农业、纺织业、造纸业、化妆品、印染、膜材料、催母浸出汁19%,pH6.0,115℃灭蘭20min后备用。
化及分析化学、酶固定化等众多领域发挥越来越重要的作1.3培养方法
用。目前几丁质的生产仍然局限于以节肢动物虾蟹为原
在试管斜面上接种黑曲莓,30℃培养96h后,制成孢子
料的提取法上。为了减轻现有生产方法对环境造成日益悬浮液(7x10°个/mL~9x10个孢子/mL)。为了考察不同营
增长的污染,人们开始用微生物合成法生产几丁质,并进养组分浓度对几丁质合成的影响,在发酵基础培养基上分
行了系列研究,但因产率低还未实现工业化生产
别添加一定浓度的果糖、谷氨酰胺及N-乙酰氨基葡萄糖,
黑曲是发酵工业最常用的真菌,也是含有几丁质最配制成不同的培养液。在500mL的三角瓶中装入10mL不
多的真薗,通过培养黑曲莓菌来生产几丁质可能是用微同的培养液灭蔄待用,将蘭种悬浮液(1mI)接入已灭菌的
生物法生产几丁质最有前途的方法門。甲壳素在菌体内的培养液中,于30℃、200r/min摇床培养96h
生物合成与其他多糖样,都是个相当复杂的生物化学1.4几丁质的制备
过程,在这个生物合成过程中,由于甲壳素合成酶的作用
离心取菌体,水充分冲洗,冷冻干燥。将黑曲徭干菌
将UDP-N-乙酰N-乙酰氨基葡萄糖合成为几丁质,合成过体加入2%NaOH溶液(菌丝体与2%NaOH溶液的固液比为
程通过葡萄糖、6-磷酸果糖和6磷酸N-乙酰氨基葡萄糖的1g:30mL),在90℃反应2h脱蛋白质,将反应后的菌丝体离
代谢途径。本实验根据生物合成过程,研究了果糖、谷氨心,用蒸馏水、乙醇和丙兩洗涤固形物,将固形物于20℃风
酰胺及N-乙酰氨基葡萄糖对黑曲霉合成几丁质的影响,干,即得粗几丁质?,称重。
为工业应用和代谢调控理论研究提供参考。
2结果与分析
收稿日:200909-20
甚金项目:湖北省科技厅资助项目(No.2006ABA031)
作者简介:王伟平(1972-),女,湖北当阳人,副教授,研究方向为发酵工程。
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