食用动物油脂中抗氧化剂BHA、BHT和TBHQ 测定方法的探讨.pdf

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食用动物油脂中抗氧化剂BHA、BHT和TBHQ测定方法的探讨
白广东(毫州市产品质量监督检验所236800)
摘要:建立了同时测定动物油脂中三种抗氧化剂叔丁基羟基简香(BHA)、2,6二叔丁基对甲酚(BHT)和叔丁基
对苯二酚(TBHQ)的气相色谱、液相色谱和气质联用的检测方法。样品经甲醇提取后,分别采用气相色谱法、液相色谱
法、气质联用法分析,3种组分分高完全,在0.01-0.20g/L浓度范国内线性关系良好,加标回收率为90%6-105%,测定结
果的相对标准偏差(n=6)(RSID)<4.0%,该三种方法简単快速准确,可用于动物油脂中抗氧化剂的同时测定
关键词:食用动物油脂液相色谱气相色谱气质联用抗氧化剂测定
220℃,保持5min.气化率温度200℃,检测器温度2.30℃,分流比
25:1,进样量:10uL.外标法定量
油脂作为人类膳食中的基础营养素之一,在通常的环境条
2)液相色谱条件
日立⊥LC2130/2455.配二极管阼列檢测器,色谱桂C18
件下会自动发生氧化反应而逐渐变质,人为的添加适量的叔丁
酚(TBHQ)等合成酚类抗氧化剂可抑制微生物生长繁殖,标法定、Sm,柱温:3℃:进样量:20nI检测波长:280m:外
基羟基茴香醚(BHMA)、2,6二叔丁基对甲酚(BI"T)和叔丁基对苯
油脂氧化,延长保质期,是一种抑制油脂变质的有效手段。但是
流动相A:甲醇,流动相B:0.1%乙酸水溶液梯度洗脱;洗脱
过量使用对人体有一定的毒性,食品添加剂国家标准CB2760
2011[1,关于抗氧化剂的使用范围和最大使用限量均做了严格
规定。现行国家标准检验方法采用气相色谱法、薄层色普法、比
色法、高效液相色谱法[21-81.但是样品前处理比较复杂,且主要
适用于植物油,动物油脂的抗氧化剂检测未见报道。
本文采用简便的样品前处理方法,用气柑色谱法、高效液相
色谱法、气质联用法同时测定3种常用抗氧化剂,测定迅速,
图1甲-水度沉时标律样品色图2甲1乙酸度元税时标准品色图国
果准确,满足分析要求
实验部分
1、仪器与试剂
气相色谱仪:CC-2010plus,FID检测器,AOC-20i自动进样
器,日本岛津公司;
液相色谱仪:LC2130/2455/2485配二极管阼列检测器,日本
目立公可;
气相色谱质谱联用仪: Agilent GC7890MSD5975,美国安捷
图3甲1%乙酸梯度洗配时标准样品色图
伦公司
电子大平:XP205型,感量0.010.1mg,端士梅特一托利多
冷冻离心机: Ecoc: ity18RI.型,澳大利亚 Dynamica公可;
超声清洗器:KQ3200型,昆山超声仪器有限公可;
涡旋混匀器: TKA MS3 basic,德国IKA公司;
电热恒温水浴锅:龙?市先科仪器公司
图4L5D毛细色雷柱海g毛管色料难样晶图
甲醇,乙醇,乙腈均为色谱纯;
羊油、猪油、牛油等样品:市售
BHA、BHr、TBHQ标准品:纯度分别为910,80,95
德国 Dr Ehrenste
混合标准贮备液:分別称取BHA、BHI、TBH!Q标准品各
100mg于100mL的容量瓶中,用甲醇溶解后并定容至刻度,配制
成浓度为1.0g.混合标准溶液,混匀,贮存于0-4℃冰箱中各用
国工由(CP图HT(GC
二、实验方法
1、色谱条件
(1)气相色谱条件
CC2010.FID檢测器 Gcsolution I.作站,tx-50毛细管柱
(30+0.25mm*0.25um);柱温:120C(Imin),以20℃./min升至
E81BIP工作(iE3
174
化王
2013年第7期
表1液相色谱梯度洗脱条件
室温度250℃,离子源温度230℃,四柲杆温度150℃,传输线温度
时间/min
体积分数/%
280℃,FI离子源,柱流量1.2ml/hin
BHA定量离子165,定性离子137、180
BHT定量离子205,定性离子220、145和177
流动相A:甲醇「流动相B:0.1%乙酸水
IBIQ定量离子123,定性离子151、166
0
20
、实验步骤
95
1、样品处理:
称取动物油脂5.00g,于50mL具塞离心管中,60℃水浴加热
20
10min,使其溶化,加入10mnlL甲醇,涡旋振荡1min,10omin(
80
10C)冷冻离心5min,将上层提取液转移到25ml刻度管中,再
表2加热温度试验
将样品60℃水浴加热10min,用10ml.甲醇重复提取试样一次,
合并提取液,定容至25ml混匀,过滤,提取10m.滤液在水浴
提取试剂
加热温度加热温度9oao40℃,氯欧近下,用5nL.甲醇定容,混匀,经045m滤膜过滤,作
化合物时的回收率
时的回收率
为试样测定液
甲崞
90.3
).4
2、标准曲线的绘制
BHT
104.5
102.5
分别准确称取BIL、BHT和TBHQ各100mg,用屮醇渀解
定容至100mL,分别配制成浓度为1.0gL标准贮备液,0-4℃避
光保存。
BHA
75.0
标准使用液的配制:分別吸取混合标准贮备液0.5、1.0、2.0
BHT
5.0、10.0、20.0mT.于100mI.容量瓶中,用甲定容至刻度,混匀
TBHO
97.4
配制抗氧化剂的标准系列溶液5、10、20、50、100、,200mg/.,分别
表3提取浴剂回收率试验%
经气相色谱仪和液相色谱仪检測后,记录保留吋和峰而积,
提取试剂 BHA RHT TBHQ半均回收率
各标准保留时间定性,峰间积外标法定量,绘制标准曲线。
甲醇
90.3
104.598.5
96.2
四、结果与讨论
乙醇
86.1
05.3100.6
97.3
95.8103.6197.4
98.9
气相色谱、液相色普和气质联用法比较
平均回收卒「89.7104.01988
利用气相色谱和液相色谱法均能快速准确分离分析三种抗
氧化剂。实际样品中的你质往往对检测分析产生干扰,杂峰较
表4CC回归方程和相关系数
多,容易产生假阳性,此时可以采用气质联用法进行定性定量分
回归方程(Y=Ax+b)相关系数
析。GC/MS选择离子模式定性定量,不仅可以提高定性定量的准
BHA Y=1530.374X-3521.89
0.9998
确度,其定量的灵敏度同样大幅度提高
GC
BHIY=1214.748X-2675.27
0.9998
2、加热温度的选择
TBHO Y=1082.74X-1391.06
0.998
物油脂多数是固体,若不经加热直接提取,提取溶剂和试样
不能允分混匀,檢测结果会偏低;我们分別采用60℃C和90℃,加
表5回收率实验
热渀解,提取,回收卒试验如下
化合物加标量m测得量my1回收学%平均回收卒?RSD%检