SNT 0751-1999 出口食品中嗜水气单胞菌检验方法.pdf

中华人民共和国出人境检验检疫行业标准
SN/T0751--1999
出口食品中嗜水气单胞菌检验方法
Method for determination of Aeromonas
hydrophila in food for export
1999-05-05发布
1999-08-01实施
中华人民共和国国家出人境检验检疫局发布
SN/T0751-1999
前
本标准是根据GB/T1.1-1993《标准化工作导则第1单元:标准的起草与表述规则第1部分
标准编写的基本规定》及SN/T0001-1995《出口商品中农药、兽药残留量及生物毒素检验方法标准编
写的基本规定》的要求进行编写的。其中检验方法是参考了国內外有关资料及《伯杰细菌鉴定手册》(第
卷)(1984年第八版)弧菡科内容,在进行实验的基础上编写而成。本标准同时制定了抽样和制样方
法
本标准的附录A、附录B、附录C都是标准的附录。
本标准由中华人民共和国国家出入境检验检疫局提出并归口。
本标准由中国进出口商品检验技术研究所、中华人民共和国烟台商品检验局负责起草
本标准主要起草人:孟洪德、董克难、王静。
中华人民共和国出人境检验检疫行业标准
出口食品中嗜水气单胞菌检验方法
SN/T0751-1999
Method for determination of Aeromonas
hydrophila in food for export
1范
本标准规定了出口食品中嗜水气单胞菌的检验方法
本标准适用于出口水产品、罐头食品和小食品中的嗜水气单胞菌的检验。
2抽样和制样
2.1检验批
以不超过2500件为一检验批。
同一检验批的商品应具有相同的特征,如包装、标记、产地、规格和等级等。
2.2抽样数量(见表1)
表1
批量,件
最低抽样数,件
101~250
251~500
501~~1000
1001~2500
2.3抽样方法
按表1规定的抽样件数随机抽取,逐件开启。从每件中取一袋作为原始样品。原始样品总量不少于
2kg,放入清洁容器内,加封后,标明标记,及时送交实验室。
如每件中无小包装,或有小包装但每袋质量超过2kg者,则可用灭菌锋利刀在抽出的包件中,每件
割取不少于100g。混合后置于清洁容器内,作为混合原始样。混合原始样的总量不少于2kg。加封后,
标明标记,及时送交实验室。
2,.4试样制备
从所取原始样品中取出有代表性样品约1kg,充分绞碎,混匀,均分成两份。分别装入清洁容器内
作为试样,加封后,标明标记。
2.5试样保存
将试样于-18C以下冷冻保存。
注:在抽样及制样的操作过程中,必须防止样品受到污染。
3测定方法
3.1设备和材料
中华人民共和国国家出人境检验检疫局1999-05-05批准
1999-08-01实施
SN/T0751-1999
3.1.1天平:称量2kg。
3.1.2均质器或乳钵。
3.1.3温箱:36C士1℃C。
3.1.4显微镜。
3.1.5灭菌广口瓶:00mL。
31.6灭菌三角烧瓶:500mL,250mL。
3.1.7灭菌吸管:10mL,1mL。
3.1.8灭菌平皿:90mm,15mm。
3.1.9灭菌小试管:5mm,5cm。
3.1.10灭菌毛细管。
3.1.11橡皮乳头
3.1.12载玻片。
3.1.13酒精灯。
3.1.14灭菌金属匙或玻璃棒。
3.1.15接种棒、镍铬丝。
3.1.16试管架
3.2培养基和试剂
3.2.1碱性蛋白胨水。
3.2.2氨苄青霉素麦康琼脂。
3.-2.3三糖铁琼脂。
3.2.4甘露醇、肌醇、七叶苷、水杨素、柠檬酸盐、阿拉伯糖发酵试验培养基。
3.2.5氧化酶试剂。
3.2.6粘丝试验试剂。
3.2.7革兰氏染色液
3.2.8嗜盐性试验试剂。
3.3检验步骤
3.3.1增菌
液体食品:用无菌吸管取25mL样品加入到装有225mL1%氯化钠APW(碱性蛋白胨水)500mL
广口瓶中。迅速振摇,充分混匀。
固体食品(水产品、禽类制品):以无菌操作取25g样品入装有225mL1%氯化钠APW中,以
8000r/min均质1~2min。在36℃士1℃的温度中增菌培养,约在6~8h有轻度混浊时,终止培养。
3-3-2分离培养
在1%氯化钠APW中,用一个3mm接种环混匀并在氨苄青霉素麦康凯琼脂中划线,于36℃土1C
培养平板18~24h。嗜水气单胞菌在琼脂上可出现乳白色的菌落。
3.3.3推定试验
将可疑菌落接种到以下培养基中:三糖铁琼脂上,0%、3%和6%氯化钠蛋白胨水中,肌醇和甘露醇
肉汤中,于36℃士1℃培养18~24h。作革兰氏染色,观察是否纯菌和典型的菌体形态。
细胞色素氧化酶试验:挑取菌落涂在无菌滤纸上,滴加氧化酶试剂。阳性者则在接触点出现暗红色
物质
粘丝试验:在无菌载玻片上滴加一滴粘丝试验试剂,用接种环从平板上挑取一个典型菌落在试剂中
研磨。能拉出长丝者为阳性,否则为阴性。
疑似气单胞菌者(符合所述的特征)应当作进一步试验
3
证实试验