SN 0168-1992 出口食品平板菌落计数.pdf

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中华人民共和国进出口商品检验行业标准
SN0168-92
出口食品平板菌落计数
Plate count ffor bacterial colonies in food
for export
1992-12-28发布
1993-05-01实施
中华人民共和国国家进出口商品检验局发布
中华人民共和国进出口商品检验行业标准
出口食品平板菌落计数
SN0168-92
Plate count for bacterial colonies in food for export
代替ZBX09001-86
1主題内容与适用范
本标准规定了出口食品平板落计数的方法。
本标准适用于各种出口食品及其原料,有专门规定检验方法的除外。
2设备和材
2.1工作台:超净工作台或放于清洁、光线充足的实验室里的水平工作台。琼脂平板在工作台上暴露
15min,每平板不得超过15个菌落。
2.2恒温培养箱:36士1℃。
2.3恒温水浴箱:45土1℃。
2.4均质器。
2.5振荡器。
2.6吸管:1、10和25mL,具0.1mL刻度。
2.7平皿:直径为90mm。
2.8.稀释瓶:广口瓶或三角烧瓶,容量为200mL和500mL。
2.9玻璃珠;直径为5mmn左右。
2.10天平:感量0.1g
3培养基和试剂
3.1平板计数琼脂。
3.275%乙醇。
3.3稀释剂:磷酸盐缓冲稀释液。
4操作程序
4.1样品制备
4.1.1以无菌操作取有代表性的样品盛于灭菌容器内。如有包装,则用75%乙醇在包装开口处擦拭后
取样。
4.1.2制备样品匀液
4.1.2.1固体或半固体食品:;以无菌操作取25g样品,放入装有225mL稀释剂的灭菌均质杯内,于
8-000r/min均质1~2min,制成1:10的样品匀液。如样品均质时间超过2min,应在均质杯外加冰水
冷却。
4.1-2.2干燥或千粉食品:以无菌操作取25g样品,放入装有225mL稀释剂和适量玻璃珠的500mL
稀释瓶中。迅速振摇,将样品混匀,制成1:10的样品匀液。振摇时,幅度为30cm,7s内振摇25次,也
可用机械振荡器振荡15s代替手摇。
中华人民共和国国家进出口商品检验局1992-12-28批准
1993-05-01实施
SN0168-92
4.1.2.3液体食品:用灭菌吸管吸取25mL样品,放入装有225mL稀释剂的500mL稀释瓶中,按
4.1.2.2条中所述方法迅速振摇,制成1:10的样品匀液。吸取样品时,吸管插入液面下不要超过
2.5cm。吸管内液体要在2~4s内完全排入稀释剂中。不要在稀释剂中吹洗吸管。
4.2稀释样品匀液
4.2.1用10mL灭茵吸管准确吸取1:10的样品匀液10mL,放入装有90mL稀释剂的200mL稀释
瓶中。按4.1.2-2条中所述的方法,迅速振摇。制成1:100的样品液。从容器中吸取样品匀液和以后
的稀释操作中,吸管尖不要碰着瓶口。吸入的液体应先高于所要求的刻度,然后提起吸管使其尖端离开
液面并貼在容器内壁将液体调至所要求的刻度。
4.2.2分别用10mL灭菌吸管按4.2.1条所述方法将样品匀液制成10倍递增稀释的样品液,如
10~3、104、10-5……。
4.3平板接种
4.3.1对于每一个样品,选用合适的三个连续稀释度的样品液进行平板计数。
4.3.2分别用灭菌吸管吸取1mL样品液放入作了适宣标志的平皿内。每个稀释度的样品液用两个平
Ⅲ。如果某一样品液在取出供试部分前的放置时间超过3min,应按4.1.2.2条所述方法再振摇该样品
液
4.3.3分别加12~15mL平板计数琼脂(已放45+1℃的水浴中恒温)到各平皿内。立即将平皿内的
样品液和琼脂培养基充分混合。混合方法是将平Ⅲ倾斜和旋转。要防止把混合物溅到平皿壁和謐上。同
时将平板计数琼脂倾入加有1mL稀释剂的另一灭菌平皿作空白对照。将样品液加入平皿后应立即倾
注琼脂培养基,每个样品从开始稀释到倾注最后一个平皿所用的时间不得超过20min
4.4培养
待琼脂凝固后将平皿翻转,立即放进36士1℃的恒温培养箱内培养48士2b。培养箱应保持一定的
湿度,经'48h培养的琼脂培养基的失重不得超过15%。
4.5菌落计数和记录
4.5.1培养后,立即计数每个平板上的菌落数。25~250个菌落为合适范围。如果不能立即计数,应将
平板存放于0~4℃,但不得超过24h。
4-5.2?如只有一个稀释度的两个平板上的菌落在合适范围内,先计算两个平板的平均值,再将平均值
乘以相应稀释倍数,作为每克(毫升)样品中平板菌落数(下表,样品1)。
4.5.3如有两个稀释度在合适范围内,先计算每个稀释度两个平板的平均值,再计算两个稀释度的平
均值,然后计算每克(毫升)样品中平板菌落数(下表,样品2)。
4-5.4当最低稀释度的两个平板上都少于25个落时,计数这一稀释度两个平板上的实际菌落数,计
算两个平板上的平均菌落数,将平均菌落数乘以稀释倍数,得到估计的平板菌落数。给这个数注上星号.
(*),表明该数系从菌落数在25~250这一范围之外的平板估计所得(下表,样品3)
4.5.5当所有平板上的菌落都超过250时,则应将最高稀释度的两个平板的平均菌落效乘以稀释倍
数,得到估计的平板薗落数。给这个数注上星号(*)(意义同4.5.4)(下表,样品4)。
4.5.-6如果所有稀释度的平板都没有菌落,则以小于1乘以最低磻释倍数报告平板菌落数。给这个数
注上星号(*)(意义同4.5.4条)(下表,样品5)
4.5-7同一稀释度的两个平板中,一个有25~250个菌落,另一个的菌落多于250个,两个平板都要计
数。计算方法同4.5.2条(下表,样品6)
4.58两个连续稀释度中的每个稀释度都有一个平板的菌落数在25~250个范围内,而另一个的菌落、
数高于250或低于25,四个平板都要计数。计算方法参照4.5.2条和4.5.3条(下表,样品7)。
5.9某稀释度的两个平板都有25~250个菌落,而另一稀释度的两个平板中只有一个平板的菌落数
在25~250范围内。四个平板都要计数,计算方法参照4.5.2条和4.5.3条(下表,样品8、9)。
4.5.10蔓延生长菌落