新型5-羧基-磺酸基罗丹明的微波合成及对蛋白质的标记作用.pdf

第40卷第8期
应用化工
Vol 40 No8
2011年8月
Applied Chemical Industry
Aug 2011
新型5-羧基-磺酸基罗丹明的微波合成及
对蛋白质的标记作用
秦蓓
(西安医学院药学院,陕西西安710021
摘要:利用微波加热技术,以2-磺基4-羧基苯甲醛和N,Ⅳ-二烷基3-氨基酚为原料,在空气气氛中,合成了3种结
构新颖的反应性荧光染料一5-羧基-磺基罗丹明类化合物。通过荧光光谱的测定,对5羧基-磺酸基罗丹明-链
亲和素复合物与 TAMRA和 Texas Red-链馫亲和素复合物的荧光强度进行对比分析。结果发现,5-羧基-磺基罗丹
明类化合物与链霉亲和素共价结合后,产生强荧光,比目前常用的荧光标记染料更适宜用于标记蛋白质。
关键词:微波催化;5-羧基罗丹明;荧光染料;蛋白质标记
中图分类号:TQ617.3;0621.3文献标识码:A文章编号:1671-3206(2011)08-1371-04
Microwave-assisted synthesis of 5-carboxy-sulforhodamines
for labeling proteins
QIN Bei
Department of Pharmacy, Medical University of Xi an, Xi an 710021, China)
Abstract: New reactive fluorescent dyes, 5-carboxy-sul orhodamines with different fluorescence colors
were prepared by microwave-accelerated condensations of 4-carboxy-2-sulforbenzaldehyde with N, N-dial-
ky lated-3-aminophenols followed by oxygen oxidation with moderate yields. The measurement of the f
uo-
rescence indicated that the new strep avidin conjugates of these reactive dyes exhibit much higher fluores
cence yields than the commercial fluorescent conjugates
Key words: microwave catalytic; 5-carboxy-sulforhodamines; fluorescent dyes; labeling proteins
对蛋白质领域的不断探索,推进了小分子光
近年来,微波辐射促进有机化学反应的研究已
探针的快速发展。荧光素类、罗丹明类及其衍生物成为有机化学领域中的一个热点7),与传统加热相
在生物领域中的研究占有极其重要的位置,一直是比,微波加热方式可使反应速率提高很多。用微波
化学及生物分析领域中研究的热点,在标记生物辐射合成荧光素类、罗丹明类荧光染料的研究已有
分子、DNA测序和在活细胞内定位蛋白质、检测蛋报道0。本工作是研究组在合成结构刚化、新型
白质中特殊的功能基团、测量细胞内的离子浓度等水溶性罗丹明类荧光染料研究工作的继续。以
领域有广泛应用2。由于罗丹明特殊的结构及相2-基4-羧基苯甲醛和取代的3-氨基苯酚的衍生物
应的荧光特性,使罗丹明类荧光染料成为分析化学为原料,在酸催化下,用微波辐射15min,经缩合反
和生物医药科学等生物技术领域中最常用的荧光染应一步高选择性的合成了标题化合物-5-羧基-磺基
料之一。为了改善罗丹明的荧光性能,国外许多化罗丹明类荧光染料。反应条件温和,产物收率较好,
学及生物学家通过引人不同功能的化学基团对罗丹利用紫外吸收和荧光光谱对所合成的3种新型5羧
明的结构进行修饰,设计合成了一系列新型的罗丹基璜基罗丹明类化合物的荧光性质进行了研究。
明类荧光染料。其典型的制备方法是:取代的1实验部分
3-氨基苯酚与邻苯二酸酐的衍生物缩合?。然而用1.1试剂与仪器
这种方法得到的主要是5(6)-羧基罗丹明的混合
2-磺基4-羧基苤甲醛、4-甲基N-乙基-3-氨基苯
物,且二者的相对含量接近1:1,不易分离,使产品酚、N-甲基-N-乙基-3-氨基苯酚7-羟基-1,1-二甲基
难以纯化。
N-甲基-1,2-二氢喹啉均为工业品;PBS缓冲溶液
收稿日期:2011-06-08修改稿日期:2011-06-22
甚金项目:陕西省重点实验室项目(2009J9069)
作者简介:秦蓓(1966-),女,四川成都人,西安医学院副教授,从事药物分析研究。电话:13772056839,E-mail
beiqin6688@126.com