GBT 14643.4-2009 工业循环冷却水中菌藻的测定方法 第4部分土壤真菌的测定 平皿计数法.pdf

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CS71.040.40
G76
中华人民共和国国家标准
GB/T14643.42009
代替GB/T14643.4—1993
工业循环冷却水中菌藻的测定方法
第4部分:土壤真菌的测定平皿计数法
Examination of bacteria and algae in industrial circulating cooling water-
Part 4: Examination of soil fangi-Standard of plate count
2009-05-18发布
2010-02-01实施
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局
中国国家标准化管理委员会
发布
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中华人民共和国
国家标准
工业循环冷却水中菌藻的测定方法
第4部分:土壤真菌的测定平皿计数法
GB/T14643.42009
中国标准出版社出版发行
北京复兴门外三里河北街16号
邮政编码:100045
网址www.spc.net.cn
电话:6852394668517548
中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷
各地新华书店经销
开本880×12301/16印张0.5字数9千字
2009年7月第一版2009年7月第一次印刷
书号:155066·1-38015定价14.00元
如有印装差错由本社发行中心调换

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GB/T14643.4—2009
前言
GB/T14643《工业循环冷却水中菌藻的测定方法》分为以下几个部分:
第1部分:黏液形成菌的测定平皿计数法
第2部分:土壤菌群的测定平皿计数法
第3部分:黏泥真菌的测定平皿计数法
第4部分:土壤真菌的测定平皿计数法
第5部分:硫酸盐还原菌的测定MPN法
第6部分:铁细菌的测定MPN法
本部分为GB/T14643的第4部分。
本部分代替GB/T14643.41993《工业循环冷却水中土壤真菌的测定平皿计数法》。
本部分与GB/T14643.4—1993相比,在技术内容上并无变化只是对文本结构和文字进行了
修改
本部分由中国石油和化学工业协会提出
本部分由全国化学标准化技术委员会水处理剂分会(SAC/TC63/SC5)归口。
本部分负责起草单位:中海油天津化工研究设计院天津正达科技有限责任公司。
本部分主要起草人:白莹、张全、邵宏谦。
本部分于1993年首次发布。
I
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GB/T14643.4-2009
工业循环冷却水中菌藻的测定方法
第4部分:土壤真菌的测定平皿计数法
1范围
GB/T14643的本部分规定了工业循环冷却水中上壤真菌的测定方法。
本部分适用于工业循环冷却水中土壤真菌的测定也适用于原水、生活用水及其他水中土壤真菌的
测定。
2规范性引用文件
下列文件中的条款通过GB/T14643的本部分的引用而成为本部分的条款。凡是注日期的引用文
件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容或修订版均不适用于本部分,然而,鼓励根据本部分达成
协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本
部分。
GB/T603化学试剂试验方法中所用制剂及制品的制备(GB/T6032002,ISO353-1:1982,
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法(GB/t66822008,iso3696:1987,moD)
3方法提要
本部分采用土壤真菌培养基,用平皿计数技术,在(29士)℃培养72h,测定工业循环冷却水中土
壤真菌的总数。
4试剂和材料
本部分所用试剂,除非另有规定,应使用分析纯试剂和符合GB/T6682中三级水的规定。
试验中所需制剂及制品,在没有注明其他要求时,均按GB/T603之规定制备。
4.1马铃薯:市售新鲜(无芽),去皮后切成约20m×20mm×20mm小块
4.2葡萄糖
4.3琼脂:生物试剂。
4.4氯化钠
4.5乳酸。
4.6乙醇溶液:75%(体积分数)。
4.7硫代硫酸钠。
4.8牛皮纸
4.9医用脱脂棉
4.10医用脱脂纱布。
5仪器、设备
5.1无菌箱(室)或超净工作台
5.2蒸汽压力灭菌器。
5.3生化培养箱。
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GB/T14643.42009
5.4鼓风电热干燥箱:温度可控制在60℃~280℃
5.5铝锅:200mm
5.6搪瓷量杯:1000mL
5.7磨口三角瓶:1000mL
5.8培养皿:90mm
5.9磨口试剂瓶:1000mL
5.10刻度吸管:1mL
5.11刻度吸管:5mL
5.12三角瓶:500mL
6试验前的准备
6.1培养基的制备
称取约200g的马铃薯于铝锅中,加水约1000m在电炉上加热溶解后,趁热用四层医用脱脂纱
布过滤到搪瓷量杯中,收集到约900mL滤液,滤液搅匀待用。于上述滤液中加入20.0g琼脂和20.0g
葡萄糖,并放在电炉上加热,不断地搅拌,待琼脂完全溶化后趁热用四层医用脱脂纱布过滤于搪瓷量杯
中,用热水补充至1000mL,并用乳酸调节pH至4.0±0.1,并分装在500mL三角瓶中,每瓶分装量不
超过其总量的2/3,塞上棉塞,再用牛皮纸把瓶口包好,用蒸汽压力灭菌器于(121±1)℃灭菌15min。
6.2无菌稀释水的制备
6.2.1生理盐水的配制:称取8.5g氯化钠溶解在1000mL水中,混匀。
6.2.2将生理盐水分装在100mL磨口三角瓶中,每瓶45mL,每个三角瓶塞子和瓶口间插人一小纸
片塞紧瓶塞,每个瓶子的瓶口均用牛皮纸包扎以防污染,用蒸汽压力灭菌器于(121土1)℃灭菌
15 min.
6.3刻度吸管的灭菌
6.3.1将洗净并烘干后的吸管粗端塞上医用脱脂棉,棉花量要适宜,长度大约10mm~15mm,棉花不
宜露在口外,多余的棉花可以用火焰烧掉。
6.3.2每支刻度吸管用一条约40mm~50mm宽的牛皮纸条,以45°左右角度螺旋形卷起来,吸管的
尖端在头部,粗端用多余的纸条折叠打结,不使散开,标上量度,若千支捆成一束,置电热干燥箱中于
(160±2)℃灭菌2h
6.4培养皿的灭菌
将洗净并烘干后的培养皿10个左右叠在一起,用皮纸卷成一筒,置电热干燥箱中于(160±2)℃
灭菌2h
6.5采样瓶的灭菌
将洗净并烘干后的1000mL磨口试剂瓶瓶口和瓶颈用牛皮纸裹好,扎紧,置电热干燥箱中于
(160±2)℃灭菌2h