GBT 14643.2-2009 工业循环冷却水中菌藻的测定方法 第2部分土壤菌群的测定 平皿计数法.pdf

免费标准载网www (www. ).net)
ICS71.040.40
G76
中华人民共和国国家标准
GB/T14643.2—2009
代替GB/T146432-1993
工业循环冷却水中菌藻的测定方法
第2部分:土壤菌群的测定
平皿计数法
Examination of bacteria and algae in industrial circulating cooling water-
Part 2: Examination of soil micro-bioti
Standard of plate count
2009-05-18发布
2010-02-01实施
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局
中国国家标准化管理委员会
发布
免费标准 (www. ),.net)需注册,即可载
( (www. freebz. net).nt)
GB/T14643.2--2009
前言
GB/T14643《工业循环冷却水中菌藻的测定方法》分为以下几个部分:
第1部分:黏液形成菌的测定平皿计数法
第2部分:土壤菌群的测定平皿计数法
第3部分:黏泥真菌的测定平皿计数法
第4部分:土壤真菌的测定平皿计数法
第5部分:硫酸盐还原菌的测定MPN法
—第6部分:铁细菌的测定MPN法
本部分为GB/T14643的第2部分。
本部分代替GB/T14643.2-1993《工业循环冷却水中上壤菌群的测定平皿计数法》
本部分与GB/T14643.2-1993相比,在技术内容上并无变化,只是对文本结构和文字进行了
修改。
本部分由中国石油和化学工业协会提出。
本部分由全国化学标准化技术委员会水处理剂分会(SAC/TC63/SC5)归口
本部分负责起草单位:中海油天津化工研究设计院、天津正达科技有限责任公司。
本部分主要起草人:李琳、张全、白莹。
本部分于1993年首次发布。
免费标准下载wwfenet)需注册即可下载
免费标准载网www (www. freebz. net).net)
GB/T14643.2—2009
工业循环冷却水中菌藻的测定方法
第2部分:土壤菌群的测定
平皿计数法
1范围
GB/T1643的本部分规定了工业循环冷却水中土壤菌群的测定方法。
本部分适用于工业循环冷却水中土壤菌群的测定,也适用于原水生活用水及其他水中土壤菌群的
测定。
2规范性引用文件
下列文件中的条款通过GB/T14643的本部分的引用而成为本部分的条款。凡是注日期的引用文
件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本部分,然而,鼓励根据本部分达成
协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本
部分。
GB/T603化学试剂试验方法中所用制剂及制品的制备(GB/T603-2002,ISO6353-1:1982,
NEQ)
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法g/t6682-2008,io3696:1987,mod)
3方法提要
本部分采用混合培养基,利用平皿计数技术,在(29±1)℃培养72h,测定循环冷却水中土壤菌群
总数。
4试剂和材料
本部分所用试剂,除非另有规定,应使用分析纯试剂和符合GB/T6682中三级水的规定
试验中所需制剂及制品,在没有注明其他要求时,均按GB/T603之规定制备
4.1牛肉膏:生物试剂。
4.2蛋白胨:生物试剂。
4.3琼脂:生物试剂。
4.4氯化钠
4.5硝酸钠
4.6磷酸氢二钾。
4.7氯化钾
4.8硫酸镁
4.9硫酸亚铁。
4.10蔗糖。
4.11土壤(果园土、菜园土)
4.12氢氧化钠溶液:40g/L
4.13乙醇溶液:75%(体积分数)
免费标准 (www. freebz. net),.net)无需注册,即可下载
免费标准载网(www (www. freebz. net).net)
GB/T14643.22009
4.14硫代硫酸钠。
4.15牛皮纸。
4.16医用脱胎棉
4.17医用脱脂纱布。
5仪器、设备
5.1无菌箱(室)或超净工作台。
5.2蒸汽压力灭菌器。
5.3生化培养箱。
5.4鼓风电热干燥箱:温度可控制在60℃~280℃
5.5铝锅:200mm
5.6搪瓷量杯:1000mL
5.7磨口三角瓶:100mL
5.8培养:90mm
5.9磨口试剂瓶:1000mL。
5.10刻度吸管:1mL
5.11刻度吸管:5mL
5.12三角瓶:500mL
6试验前的准备
6.1土壤浸出液的制备
称取约100g土壤加入300g水中采用蒸汽压力灭菌器在(121±1)℃灭菌15min,静置24h后第
二次灭菌,再静置24h后进行第三次灭菌。瓶中的上层清液为土壤浸出液。
6.2培养基的制备
称取下列试剂:
牛肉膏:1.5g
蛋白胨:5.0g
氯化钠:2.5g
硝酸钠:2.5g
磷酸氢二钾:0.5g
氯化钾:0.2g
硫酸镁:0.25g
硫酸亚铁:0.005g
蔗糖:20.0g
土壤浸出液:5mL
琼脂:15.0g
将上述试剂加水约950mL在电炉上加热溶解后,趁热用四层医用脱脂纱布过滤于搪瓷量杯中,用
热水补充至1000mL,用氢氧化钠溶液调节pH至7.0±0.2,并分装在500mL三角瓶中,每瓶分装量
不超过其总容量的2/3。塞上棉塞,用牛皮纸把瓶口包好,用蒸汽压力灭菌器于(121±1)℃灭菌
15 min.
6.3无菌稀释水的制备
6.3.1生理盐水的配制:称取8.5g氯化钠,解在1000mL水中,混匀
2
(ww (www. ),.net)需注册即可下载
免费标准ト载网www (www.freebz. net)
GB/T14643.22009
6.3.2将生理盐水分装在100mL磨口三角瓶中,瓶45mL,每个三角瓶塞子和瓶口间插入一小纸
片,塞紧瓶塞,每个瓶子的瓶口均用牛皮纸包扎以防污染,用蒸汽压力灭菌器于(121±1)℃灭菌
15 min.
6.4刻度吸管的灭菌
6.4.1将洗净并烘干后的吸管粗端塞上医用脱脂棉,棉花量要适宜,长度大约10mm~15mm,棉花不
宜露在口外多余的棉花可以用火焰烧掉。
6.4.2每支刻度吸管用1条约40mm~50mm宽的牛皮纸条以45°左右角度螺旋形卷起来,吸管的
尖端在头部,粗端用多余的纸条折叠打结,不使散开,标上量度,若千支扎成一束,置电热干燥箱中,于
(160±2)℃灭菌2h
6.5培养皿的灭菌
将洗净并烘干后的培养皿10个左右叠在一起,用牛皮纸卷成一筒,置电热干燥箱中于(160±2)℃
灭菌2h
6.6采样瓶的灭菌
将洗净并烘干后的1000mL磨口试剂瓶瓶口和瓶颈用牛皮纸裹好,扎紧,置电热干燥箱于
(1602)℃灭菌2h
6.7硫代硫酸钠灭菌
将硫代硫酸钠放入无菌箱(室)内,并均匀地摊在离紫外线灯30cm处,灭菌