大孔树脂辅助从葛根中提取葛根素的工艺研究.pdf

2017年3月
食品研究与开发
第38卷第5期
72
Food Research And Development
分离提取
DOI:10.3969/jsn.1005-6521.2017.05.016
大孔树脂辅助从莴根中提取莴根素的工艺研究
朱德艳
(荆楚理工学院生物工程学院,湖北荆门448000
摘要:以葛根为原料,采取大孔树脂辅助提取萵根素。利用单因素试验和正交试验优化工艺条件。试验结果表明:选
择大孔树脂D101型号,葛根与大孔树脂质量比为1:5,采用浓度为70%的乙醇洗脱,洗脱速度设置为3mI/min时,葛
根素的提取率可达1.308%。
关键词:葛根素;大孔树脂;提取;正交设计
Study on the Technology of Extracting Puerarin from Pueraria radix by Macroreticular Resin
ZHU De-yan
( College of Bioengineering, Jingchu University of Technology, Jingmen 448000, Huei, China
Abstract The extract of the Pueraria radix were used as the raw material to purify puerarin with macroreticular
resin, based on single factor and orthogonal experiments, extraction purification condition was optimized. The
results showed that the optimum condition are macroreticular resin D101, Radix Pueraria to macroreticular resin
1: 5, ethanol concentration 70 %, elution speed 3 m/min. Under the optimized conditions, the extraction
yield of puerarin is up to 1.308%
Key words puerarin; macroreticular resin; extraction; orthogonal test
葛根作为保健食品、功能食品己成当今世界主要作为新型的天然功效因子,在食品工业、医药工业、口
发展方向,葛根素类食品已成为世界认可的保健营养用化工工业等方面具有重要的作用。
品。以葛根为原料分离出来的淀粉和黄酮物质,可制
大孔吸附树脂足一种具有多孔立体结构人工合
成防治高血压、高血脂、冠心病、糖尿病等功能的清热成的聚合物吸附剂,是在离子交换剂和其它吸附剂应
解毒食品
用基础上发展起来的一类新型树脂,主要依靠它和吸
葛根素是葛根中的主要活性成分之一,属于黄附的分子(吸附质)之间的范德华引力,进行物理吸附
类化合物,化学名为8-3-D)-葡菊吡喃糖-4-,7ー二羟基而达釗分离纯化目的。用大孔树脂辅助从葛根中提
?黄酮,分子式为C2H20,相对分子质量为416.38。高取葛根素可以充分利用大孔吸附树脂物理吸附这
含量为白色针状结晶粉末,低含量为棕色粉末。在水特点,既不改变葛根素的理化性质和结构,也可以高
和有机溶剂中溶解度都不大,加热可溶丁于水、甲焞、乙效地达倒纯化分离葛根素的目的
醇,但不溶于乙醇乙酯、氯仿、苯。葛根素在临床及保
本研究采用大孔树脂辅助从葛根中提取葛根素,
健方面具有很高的利用价值,具有降低血压,减慢心研究了5种不同型号的大孔树脂、葛根与大孔树脂的
率,降低心肌耗氧量,提高学习记忆能力。在临床上对质量比以及洗脱液乙醇的浓度、洗脱速度对葛根素得
面运动神经元有保护作用,并且可促进正常人和肿瘤率的影响、在进行单因素试验的基础上,设计正交试
病人的淋巴细胞转化,对干扰素系统有明显的刺激和验,对提取工艺进行优化,探寻大孔树脂辅助超声波
诱生作用。因此中国于:1993年批准葛根素注射液法从葛根中提取葛根素的最佳工艺条件。
作为新药用于临床治疗心脑血管疾病。因此,葛根素
基金项目:判楚理工学院湖北省新农村发展研究院项目(2201404)
1材料与方法
作者简介:朱德施(1977ー),女(汉),副教授,硕十,研究方向:生物
1.1材料
制药技术。
莴根:来白湖北省仙之灵有限公司.白然晾干,粉
万方数据
分离提取
朱德艳:大孔树脂辅助从葛根中提取葛根素的工艺研究
73
碎;葛根素标准品:购于中国药品生物制品检定所;并置于密闭玻璃瓶中,低温避光保存备用。
HCI、氢氧化钠:分析纯,天津市福晨化学试剂厂
称取干燥的葛根粉末5.0g于锥形瓶中,加人20mL
D101、AB-8、DM130、IPD100、MHPD600大孔树脂:分析70%的乙醇,在频率16kHz下超声提取40min,静置
纯,郑州勤实科技有限公司;乙醇:分析纯
10min后过滤,收集上清液,加入预处理好的大孔树脂
1.2主要设备
浸泡12h后装柱,用乙醇作为洗脱剂,考察大孔树脂
电子天平:上海上天精密仪器有限公司;DH-600的型号、葛根与树脂质量比、洗脱剂浓度与洗脱速度
型电热恒温培养箱:北京科伟永兴仪器有限公同
对葛根素提取率的影响
SHZ-DⅢ循坏水式多用真空泵:上海予华仪器设备有1.3.5单因素试验
限公司;电热恒温鼓风十燥箱:上海精密实验设备有
大孔树脂型号的确定:称取大孔树脂D101、AB-8
限公司;KQ-100KDB型高功率数控超声波清洗器:昆DMI30、HPD1O0、HPD600各25g,采用浓度为70%的
山市超声仪器有限公司;TU-1901双光束紫外可见光乙,3 ml/min进行洗脱,收集合并洗脱液,250mm处
分光光度计:北京普析通用仪器有限责任公司;层析测定吸光度,根据标准曲线计算葛根素的提取率。
柱:上海亚荣生化仪器厂
葛根与树脂质量比的确定:选择葛根和大孔树脂
1.3方法
(D101)质量比分別为1:2、1:3、1:4、1:5、1:6,用浓度为
1.3.1莴根素标准曲线的绘制
70%的乙醇作为洗脱剂,洗脱流速3mL/min,收集合
准确称取葛根素标准品4.04mg,加70%乙醇溶并洗脱液,用双光束紫外可见分光光度计在250m
解并稀释至50mL,播匀。精密吸取0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、处测定畋光度,根据标准曲线计算葛根素的提取率
1.2、1.4、1.6mL分別置于10mL容量瓶中,各加70%
乙醇浓度的确定:称取预处理好的D101大孔树
乙鱒2mL,再加蒸馏水定容至10mL,摇匀。以2mL.脂25g加入上清液,浸泡12h后装柱,选择浓度为
70%的乙醇加蒸馏水至10mL作空白对照,在250m40%、50%、60%、70%、80%的乙醇作为洗脱液,洗脱
波长处测定吸收度,得标准曲线0?。
流速3 mimin,收集合并洗脱液,用双光束紫外可见
以葛根素质量浓度(mg/mL)为横坐标(X)、吸光度分光光度计在250mm处测定吸光度,根据标准曲线计
为纵坐标(Y),绘制标准曲线。得到回归方程为y=算葛根素的提取率。
1.089X-0.0208,R2=0.9957。
洗脱速度的确定:称取预处理好的