红外光谱内标法测定氯霉素片中氯霉素的含量.pdf

第42卷第11期
化工技术与开发
Vol42 No11
2013年11月
Technology Development of Chemical Industry
Nov,2013
实验室与分祈
红外光谱内标法测定氯霉素片中氯霉素的含量
彭梦侠,陈梓云
(嘉应学院化学系,广东梅州514015
摘要:用红外光谱内标法( Kafe(CN)?6H10为内标物)测定了氯霉素片中氯霉素的含量。实验表明,混合物红
外光谱中氯霉素的测量峰(16864m')和KIe(CNaJ?6H20的内标峰(2112cm-)的峰高比(y=hihs)与两者质量比(x=
mi/ms)有良好的线性关系,其线性回归方程为y=1.3127x+0.5705,相关系数r=09981。据此测得氯霉素片中氯霉素的含
量为72%,相对标准偏差为18%,加标回收率分别为968%~103.8%,测定结果与药典规定的紫外分光光度法相近。该
方法测量专属性强,无需分离提取,简便、快速、成本低,测定结果准确,特別适合快速批量检测,有应用价值。
关键词:红外光谱内标法;氯霉素片;氯霉素
中图分类号:065733
文献标识码:A
文查编号:1671-9902013)110046-03
氯霉素是第一个人工合成的广谱抗生素,对革待测组分和内标物的一个特征峰作为测量峰和内标
兰阳性、阴性细菌均有抑制作用,尤其对伤寒杆菌、峰。在同一份样品中,若待测组分的质量为m,加入
流感杆菌、沙门菌、副流感杆菌和白日咳杆菌有较强的内标物质量为m,样品总质量为m,待测组分和内
的抑制作用,故被广泛用于治疗由伤寒杆菌、痢疾杆标物的峰高为h和,根据朗伯比耳定律,则有
菌、大肠杆菌、流感杆菌、布氏杆菌、肺炎球菌等引起
的感染叫
氯霉素片含量测定在《中国药典》2000年版采
又:C=mA/m,C,=m3/m
用的是紫外分光光度法,在2005年版补充了高效
得
液相色谱法。采用紫外分光光度法测定氯霉素
片中氯霉素的含量,操作简单、检验成本小,检验时
.
间短,但专属性不强,缺乏防掺假力。黄秀风在“氯
即在同一份样品测定中,测量峰和内标峰的峰
蛋素片的含量测定方法”中的研究表明,采用中国
高比与待测组分和内标物质量比成正比,该法可消
药典法一紫外分光光度法和微生物检定法测定含杂除KBr压片厚度及仪器波动带来的影响,据此可进
质的氯霉素片含量,2种方法差异存在显著性:对于
行红外光谱的定量分析?。
含有杂质的氯霉素片,不能采用紫外分光光度法来
测定含量叫。采用高效液相色谱法测定氯霉素片中1实验部分
氯霉素的含量,专属性强,结果准确,但操作繁琐,
1.1主要仪器和试剂
检验成本高,费时,不适合快速检测。
本文建立了红外光谱内标法测定氯霉素片中氯
Nicolet Avatar360傅立叶变换红外光谱仪,
霉素含量的新方法。利用红外光谱仪对氯霉素含
AE240电子分析天平,FW4A手压式粉末压片机,
量微小变化的灵敏响应,采用红外光谱内标法,以DHGC-9140电热鼓风干燥箱。
KAFe(CNal·6H20作内标物质,以KBr粉末压片制
溴化钾(AR),六水合铁氰化钾(AR),可溶性淀
样测定了氯霉素片中氯霉素的含量。该方法简便、
粉(AR),氯霉素标准品(纯度≥99.0%),氯霉素片
快速、成本低专属性较强。方法用于实际药品氯霉(编号:B1210101,规格:025g)。
素片中氯霉素含量测定,结果与药典法相近。
1.2实验方法
红外光谱内标法是通过比较红外光谱,各选取
取适当质量的氯霉素样品粉末、内标物(KFCN
作者筒介;彭梦侠(1964),女,硕土,化学教授,主要从事化学教学和科研工作。E-mailpexia(@jyu.edu.cn
收稿日期:2013-09-12
第10期
彭梦侠等:红外光谱内标法测定氯霉素片中氯霉素的含量
6H20)与KBr晶体混合,固定氯霉素、内标物和KBr的较好,且无其他物质的吸收峰干扰。故2117,2cm1
总质量在03g左右,同时固定内标物的质量为0004g左和1686.4cm'这两处吸收峰可以分别作为内标峰和
右。研磨,混合均匀。压片,采集红外谱图,对谱图进行测量峰,测量的专属性强。
基线校正,保存谱图。测出测量峰(168644m1)和内标
峰(2112m)的校正峰髙(吸光度)光谱测定范围为
40004cmn,扫描次数32次,分辦率4cm。每次谱图
扫描前用一个空白的Kb片做背景,以即时除去水、CO2
和KBr中所含杂质的影响。
2结果与讨论
2.1内标物的选择
红外光谱内标法常用的内标物有KFe(CN
6H20、KFe(CNa]?3H10和KSCN等。实验表明,
4000350030002500200015001000500
KSCN易潮解,用KlFe(CNMl·6H20与氯霉素片样
品、溴化钾混合制样后所测红外谱见图
1.氯素片样品;2.氯霉素;3.淀粉;4KFe(CMJ6H(内标物)
图2样品各组分和内标物的红外光谱图
Fig 2 FT-IR of chloramphenicol samples, chloramphenicol
starch and potassium ferricyanide
2.3氯素浓度的选择
将氯霉素与KBr晶体分别按质量比为1
1:80、1:100、1:150混合研磨,压片,测绘红外光
谱。观察谱图可知,质量比为1:80时氯霉素的各
个峰强度较合适,且峰形较好,故选择氯霉素与KBr
晶体混合比例为质量比1:80左右。
00350030002500200015001000500
2.4氯素的稳定性探讨
1 K: [Fe(CN)?6H20(内标物);2.氯霉素片样品;
将适量氯霉素和KBr晶体混合(质量比1:80
3.内标物+氯霉素片样品
左右),加人适量的内标物KFe(CNJ?6H20,混
图1内标物、样品、样品加内标物的红外光谦
合研磨,在红外烘灯下露置于空气中,放置Omin、
Fig1FT- R of potassium ferricyanide, chloramphenicol samples5min、10min、30min后取样压片,测绘红外光谱。观
and samples added with internal reference
察谱图可知,测量峰和内标峰的峰高比基本不变,说
由图1可知,样品加内标物混合物的红外谱图,明在上述实验条件下,氯霉素比较稳定。但是,它们
除多了一内标物的特征峰以外,出峰的位置、峰形与的峰高在逐渐减小。为了试验的准确性,在试验过
单一样品的完全一致,内标物特征峰出现的位置与程中应该尽量快速(10min内)地测量,以免由于长
单一内标物特征峰出现的位置也完全一致。且谱图期暴露在空气中而影响试验的准确度。
峰形好,各峰之间无干扰,谱图稳定性好,故本试验
2.5标准工作曲线的绘制
选K2.Fe(CMVJ]?6H120为内标物。
固定氯霉素、内标物和KBr的总质量在03g左
2.2测量峰和内标峰的选择
右,同时固定内标物的质量为0.0040g左右,调整氯
按实验方法测定氯霉素片样品、氯霉素、淀粉、霉素的质量。准确称取