菌落总数测试片研究进展.pdf

2015年第2期
江苏调味副食品
总第141期
菌落总数测试片研究进展
白F阳
(国家知识产权局专利局专利审査协作广东中心,广东广州510530)
摘要:蘭落总数作为判定食品被污染程度的标志,具有重要的卫生学意义。菌落总数测试片具有楊带方便、不用配制
培养基的优点,是一种新型的捡测工具。近年来专家学者国绕菌落总数測试片进行了相关研究。对这些研究进行分析和综
合,具有一定的理论价值和现实指导意义。
关键词:茵落总数;別试片;研究进展
中图分类号:TS201.5文献标志码:A文章编号:1006-8481(2015)02-000-04
食品是人类赖以生存和发展的物质基础,而的是食品工业上重要的发酵菌,如酵母菌等。某些
食品安全关系到人们的健康和国计民生,已经越残留的细菌不仅可能引起食品腐败变质,还可能引
来越受重视。随着社会的进步,人们的生活水平起疾病。目前食品中常见的微生物有19个种属,具
不断提高,有关部门加大了食品安全方面的执法体见表1。
力度,其中菌落总数是食品卫生检验中最基本、最
表1食品中常见的微生物菌属
常见的微生物指标检测项目。国际微生物规格委
名
代表菌株
容易被感染的食品
员会将菌落总数定义为在被检样品的单位重
量(g)、容积(mL)或表面积(cna)内,所含能于某埃希氏茵属大肠杆菌O157:H7
热肉制品、冷
水果等
种固体培养基上,在一定条件下培养后所生成的菌
落的总数。菌落总数是判定食品被细菌污染程度
沙门氏菌属鼠伤寒沙门氏萬、蛋、禽、乳、肉等
的重要标志,能反映食品加工及储藏过程是否符合
志贺氏菌属痢疾志贺氏简水、谷类食品
食品卫生要求。通常认为,食品中细薗数量越多,
萄球属金黄色葡萄球菌効物乳、剩饭、糯
致病菌污染的可能性越大。菌落总数还可用于观
察食品中微生物的性质以及微生物在食品中繁殖
芽孢杆薗属蜡样芽孢杆箇定粉类食品,鱼类
的动态,以便在对被检样品进行卫生学评价时提供
制品等
科学依据。近年来,随着环境污染的加剧和生态平
孤菌属
副溶血孤苗
衡的破坏,人类感染的致病菌的种类越来越多,病
发酵豆类及其制
原微生物对人类的威胁越来越大,因此,采用适当枚状芽孢杆菌产气美朕抱品、肉美、奶制品
的检验方法对食品菌落总数进行检测,是汤防食源
水果等
性中毒的重要手段。
牛奶、乳制品、肉
假单孢杆菌属铜绿假单孢薗类、蛋类、鱼贝类、
1食品中常见的微生物
蔬等
黄单孢茵属黄单孢杆萬新鲜鱼类、肉美等
引起食品污染的微生物种类繁多。有的是在
食品加工过程中被外界污染的细菌,如大肠杆菌
粮食、水果、蔬菜、
酷酸杄茵属
木酯杆
界汁等,酿制
金黄色葡萄球菌等;有的是新鲜食品上正常的菌群
品类
在加工过程中残留下来的微生物,如乳酸菌等;有
收稿日期;2014-11-02
作者简介:白阳(1987ー-),男,国家知识产权局专利局专利审査协作广东中心,硕土
万方数据
续表1
3菌落总数測试片
属名
代表菌袾容易被感染的食品
随着检测技术的不断发展,先进的检测方法不
变形杆菌属
普適变形杄菌鱼、蟹、水产加エ品
断出现。目前美国3M公司的菌落总数測试片法在
欧文氏菌属解淀粉欧文氏菌小麦、谷类等粮食
世界各地使用得比较多。菌落总数测试片是指以灭
黄色杆茵局
自养黄色杆菌食碗柔、乳、肉、菌滤纸、无纺布或冷水可溶凝胶等吸收培养基作为
鱼、蟹、蛋、黄油等
载体,将特定的培养基和显色物质附着在载体上面
内、鱼贝类及其加通过微生物在其上面的生长、显色情况来测定食品
微球茵属
黄微球
中徴生物的一种产品。菌落总数测试片的显著优
链球茵属
粪链球茵肉类制品、乳品
点2:第一,可测定少量检品,不需要配制试剂和大
粮食、蔬菜、发酵面量的玻璃器Ⅲ,操作简便,经济,实用;易于消毒保
乳酸杆菌属利斯射氏菌国、酒、麦芽汁、泡存,携带方便,价格低廉,能大大减少或消除对环境
菜等
的污染,能减少试验后的清洗工作,能克服热琼脂法
明串珠菌属肠膜明串珠菌牛乳、旒莱、水果等
不适宜受损细菌恢复的缺陷,故适用于实验室、生产
零菌属
黄曲霉
粮油食品、动物性现场和野外工作环境。第二,可以在取样的同时接
食品等
种,结果更能真实地反映当时样本中的细菌数,防止
砖母菌属
白假髒母果、发果由于细菌繁殖造成的数量增多。第三,不用进行使
汁等
用前的准备工作,能大大节省时间、人力和物力。
3.1菌落总数测试片研究进展
2菌落总数传毓检验方法
3.1.1菌落总数测试片载体
目前,滤纸、无纺布和冷水可溶性凝胶是3种最
目前国内食品中的菌落测定主要是按常见的载体
CB/T4789.22010《食品卫生微生物学检验菌落
滤纸。由于滤纸具有较大的间隙,用滤纸作载
总数测定》标准进行,采用平板计数法。根据样体,滤纸双面和纤维之间容易有菌落生长,使肉眼无
品的实际污染情况,对样品进行10倍递增稀释,法准确判断、所以测定结果一般比实际菌数要少;滤
选择2-3个适宜稀释度的样品匀液,吸取1mL纸保水性差,检验培养时又不能保持充分湿度,不利
样品匀液于无菌平皿内,每个稀释度做两个乎于菌体生长;滤纸检验卡存在营养物质分布不均匀
皿;将融化并冷至4550℃的平板计数琼脂培的问题,加样也不能迅速扩散,致使菌体生长分布不
养基倾注到各平皿内,每皿15-20m,随即转动均匀:由于显色指示剂系统单一,不能有区别地对细
平皿,使样品与培养基充分混匀,侍琼脂凝固后,菌进行计数,对真菌更差,所以很难全面推广
转平皿,置于36±1℃培养箱内培养48士2h;另取
无纺布。无纺布是以纺织纤维为原料,经过黏
个不加样品的灭菌空平皿,加入15~20mL.平板合、熔合或其他化学、机械方法加工而成的纺织品。
计数琼脂培养基,待琼脂凝固后,翻转平皿,置于无纺布有薄型和厚型两大类,可用以制成有透气、防
36±1℃培养箱内培养48±2h,作为空白对照;按毒和加速扩散等特殊用途的材料。徳国拜发公司的
照CGB/I4789.2-2010《食品卫生微生物学检验菌RIDA的 COUNT微生物菌落计数板和日本 C HISSO
落总数测定》标准进行结果判定。一般来说,传统培公司的 SANITA-KUN微生物快速检测片,都是以无
养基成本较低,但采用传统方法进行菌落总数测定纺布为载体的新型检测片。无纺布加样后能迅速扩
存在明显不足:一是培养基制备、仪器清洗、灭菌散,菌体生长分布均匀;但无纺布和滤纸型菌落总数
都需要较多的时间和人力,费时费力;二是由于传统测试片都不能挑菌作进一步实验,因而影响其应用
方法一般需要较长时间,且需要特定的温度,对实验前景。
室仪器及无菌条件要求较高,不适合野外操作;三是
冷水可溶性凝胶。冷水可溶性凝胶结构稳定
传统培养方法中如果培养基的温度过高,容易使待透明、回收率高,且可进行挑菌,方便对微生物做进
测样品中的徴生物因不适宜而受损,从而影响测定一步鉴定,使得此类测试片的综合评价较高,具有广
结果的准确性。

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