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0lls1301-0
2013年第26卷第1期
粮食与油脂
脂肪酶修饰研究进展
付海霞,杨国龙,毕艳兰,孙尚德
(河南工业大学粮油食品学院,河南郑州450001)
摘要:脂肪酶广泛应用于食品、化工和生物技术等领域,反应体系涉及溶剂体系和水相体系;为
提高脂肪酶在反应中活性和稳定性,可采取多种方法对脂肪酶进行修饰。该文对脂肪酶修饰方法
进行综述
关键词:脂肪酶;酶修饰;酶
Research progress on modification of lipases
FU HR-XA, YANG Guo-ong, B Yan-an, SUN Shang-de
College of Food Science and Technology, Henan University of Technology, Wenzhou 450001, Henan, China
Abstract: Lipases were used widely in food, chemical engineering and biotechnology, and the
reactions could be done in solvent and aqueous system. In order to improve the reaction activity and
stability, many methods were applied to modify the lipase in the research. The methods for modification
of lipases were reviewed in this article
Key words: ipase; enzymic modification; enzyme
中图分类号:TS201.2+5
文献标识码:A
文章编号:1008-9578(2013)01-0001-04
脂肪嗨(EC3.1.1.3)能催化脂肪酸府水解、醇解、饰蛋自质作为药物比未修饰蛋自质有效许多。PEG
酸解、酯交换及脂肪酸酯化反应,?泛应用于食品、化主要通过改变蛋白分子侧链基团或分了中主链结构
工、医药、纺织等领域:脂肪酶可应用于水相反应,亦对脂肪晦进行修饰,按PEG修饰基团不同可将之分为
可应用」非水相反应2。脂肪嗨系出生物细胞所分氨基修饰、巯基修饰、羧基修饰等。但PEG用」脂肪
泌、以蛋自质为主要成分生物催化剂,其有选择性好、嗨化学修饰必须活化,因此PEG修饰般可分为两步:
催化活性高、反应条件温和、环保元污染等特点64中。首先,将PEG予以活化处理,使连接一个活性基团
但天然脂肪晦在实际应用中仍存在一些问题,如游离以便其与呼蛋白分子某些功能基团结合,然后将经活
嗨与产物分离困难、游离酶不易?收重父利川、游离化PEG与酶进行共价结合。H前,最常川活化剂有:
嗨稳定性差等。为解决犬然脂肪酶在实际应川中存在氯尿酰(:聚氧)、:狐乙烷横酰氯、甲酸-P
问题,研究者采用多种方法对其进行修饰,以改善其硝基苯酯、Nー羟基琥垍酰亚胺等。其中三聚氯是
功能2,
种常用淅化剂,价格低亷、容易获得;但毒性较人,
修饰化技术始于20世纪50年代,并很快应用
有可能会影响酶活性。脂肪酶经活化PEG修饰后
于业化生产的。酶修饰目的有:定向修佈酶催化活可提高其在有机溶剂中溶解性和稳定性;但酶活可能
性中心氨基酸残基,揭示晦活性中心构成及催化机理;会有不同程度改变。用硝基苯基氯仿、尿酸氯化物
修饰与组成悔活性中心尤关氨基酸侧链,改普嗨的应活化的PEG修饰念珠菌属脂肪嗨,修饰在异辛烷
用性能及醇原有催化功能或创造新功能;晦只它物
稳定性和活力均提高许多。而用对硝基苯一氯
质(或化合物)通过非共价键村.作用,改善酶的表?酸酯活化PEG,げ用此活化PEG修饰C. rugosa类
特性或应用特性233。根据修饰中与修饰分子问VI1脂肪嗨(CRL),修饰鲺降低晦活性,但提高晦稳定
作用力不同,可将嗨的修饰方法分为共价修饰和‖
姓S。经PEG修饰后可提高嗨在有机溶剂中稳定性
价修饰。
利溶解性:但PEG修饰脂肪酶在存在少量水条件下
1脂肪酶共价修饰
才能在酯化反应和酰基交换反应体系中发挥其活力
1.1大分子修饰脂肪酶
同时少量水的存在可使反应逆向进行。
很多大分子经活化可用以修饰脂肪酶,如聚乙
売素是·种在白然界储量丰天然多糖,对蛋
停、葡聚糖、右旋糖苷、甲壳素和壳聚糖及其衍生物等
白质呈有高亲和性,有许多反应基团,足一种具多功
聚乙二焞(PEG)是一种单功能聚合物,只有?系能基团高分子化合物,可发生.多种反应。甲壳素部
列不同分了量产品,其元毒副作用、无刺激性、无免疫分水解脱乙基可得到壳聚糖。甲壳素、壳聚糖均存
原性,并具良好水溶性,许多有机物纠份良好相在氮基,能j酶蛋白共价结个,又能螯个金属离了
浴性。20世纪70年代后期,PEG对蛋山质化学修饰便金属离子不能抑制晦活性。脱酰壳聚糖也可通
し很多报道。 Abuchowski?研究发现,经PEG修过成偶联到嗨分子。黄期?、Lcc等采用
收稿日期:2012-11-29
基金项目:国家自然科学基金项目(31071558
作者简介:付海霞(1986~),女,硕士研究生,研究方向:油脂化学
通信作者:杨国龙(1974~),男,博士,副教授,硕士研究生导师,研究方向:脂质化学与生物技术