GB 5009.240-2016 食品安全国家标准 食品中伏马毒素的测定.pdf

中华人民共和国国家标准
GB5009.240-2016
食品安全国家标准
食品中伏马毒素的测定
2016-08-31发布
2016-09-20实施
中中
民共和国
国家卫生和计划生育委员会
发布
GB5009.240--2016
前
木标代替GB/T252282010《粮油检验玉米及其制品中伏马毒素含量测定免疫亲和柱浄
化高效液相色谱法和荧光光度法》、SN/T1958-2007《进出口食品中伏马毒素B1残留量检测方法醇
联免疫吸附法》、SN/T1572-2005《进出口粮谷中伏马毒素检验方法高效液相色谱法》
本标准将以上标准进行了整合,主要修订如下
标准名称修收为“食品安全国家标准食品中伏马毒素的测定”
伏马毒素种类增加为伏马毒素B1、B2、B3一.种;
增加了免疫亲和柱浄化-柱后衍生液相色谱法作为第一法;
增加了液相色谱-串联质谱法作为第二法;
取消荧光光度法;
改变了样品提収溶液
收变了免疫亲和柱净化-柱前衍生高效液相色谱法流动相的组成
GB5009.240--2016
食品安全国家标准
食品中伏马毒素的测定
1范围
本标准规定了玉米及其制品中伏马毒素B、伏马持素B2、伏马毒素B3(以下简写为FB3、FIB2、FB3)
的测定方法。
本标准第一法为柱后衍生液相色谐法,第二法为液相色谱-毕联质谱联用法,第一法为柱前衍生液
相色谱法,适用于玉米及其制品中伏马毒素的测定。
第一法免疫亲和柱净化-柱后衍生高效液相色谱法
2原理
样品用乙腈水溶液提取,经稀释后过免疫亲和柱净化,去除脂肪、蛋白质、色素及碳水化合物等千
扰物质。经高效液相色谱分离后柱后邻苯二甲醛衍生,荧光检测,外标法定量
试剂和材料
除非另有说明,本方法使用的试剂均为分析纯,水为GB/T682规定的一级水。
3.1试剂
3.1.1甲崞(CH2()IH):色谱纯
3.1.2乙腈(CH3CN):色谱纯。
3.1.3乙酸(CH3C(OH)。
3.1.4氢氧化钠(Na()I)。
3.1.5氯化钠(NaCl)。
3.1.6磷酸氢二钠(Na2HPO,)。
3.1.7磷酸二氢钾(KII2P(O4)。
3.1.8氯化钾(KCI)。
3.1.9硼砂(Na2B1O1?10H2O)。
3.1.102-巯基乙醇(C2I4。()S)。
3.1.11邻苯二甲醛(OPA,CHO2
3.1.12吐温-20(C5H1O2s)。
2溶液配制
3.2.1甲酸水溶液(0.1%):吸取1mL甲酸,加入倒999mL水中,混合均匀
3.2.2乙腈水溶液(50+50):分别量取500mL乙腈和500mL水,混合均匀
3.2.3乙腈-水溶液(20+80):分别量取200mL乙腈和800ml.水,混合均匀。
GB5009.240--2016
2.4甲醇-乙酸溶液(98+2):吸取2mL乙酸,加入到98mL甲醇中,混合均匀。
3.2.5氢氧化钠溶液(1mol/1L):准确称取氢氧化钠4.0g,溶于100mL水,混合均匀
2.6磷酸盐缓冲液(PBS):称収8.0g氯化钠、1,2g磷酸氢二钠、0.2g磷酸二氢钾、0.2g氯化钾,用
980mL水溶解,用盐酸调整pIHI至7.4,用水稀释至1000mL,混合均匀。
3.2.7吐温-20/PBS溶液(0.1%):吸取1mL吐温-20.加入磷酸盐缓冲液(3.2.6)并稀释至100mL,
混合均匀。
3.2.8砌砂溶液(0.05mol/L,pH10.5):称取砌伈19.1g,溶于980mL水中,用氧氧化钠溶液调pH至
10.5,用水稀释至1000mL,混合均匀。
3.2.9衍生溶液:称取2.0g邻苯二甲醛,溶于20mL甲醇中,用硼砂溶液(0.05mol/L,pHl10.5)(3.2.8)稀
释至500mL,加入2巯基乙醇500pL,混匀,装入棕色瓶中,现用现。
3.3标准品
3.3.1伏马毒素B1(FB1,CaH3sNO1;),纯度95%,或有证标准溶液。
3.2伏马毒素B2(FB2, C,, H- NO1),纯度≥95%,或有证标淮溶液
3.3.3伏马毒素B3(FB3,C4I1NO)1),纯度≥95%,或有证标准溶液
3.4标准溶液配制
3.4.1标准储备溶液(0.1mg/mL):分别准确称取FB、FB2、FB:各0.01g(精确至0.0001g)至小烧杯
中,用乙腈-水溶液(3.2.2)溶解,并转移至100ml.容量瓶中,定容至刻度。此溶液密封后避光一20℃保
存。有效期6个月。
3.4.2混合标准溶液:准确吸取FB1标准储备液1mL、FB2和FB标准储备液0.5mL至同一10mL
容量瓶中?加乙購-水溶液(3.2.2)稀释至刻度,得到FB1浓度为102g/ml-、FB2和FBs浓度为5pg/ml
的混合标准溶液。稀释10倍,得到FB1浓度为1wg/mL、FB2和FB浓度为0.5g/mL的混合标准
溶液。此溶液密封后避光4℃保存,有效期6个月。
3.4.3混合标准工作溶液:准确吸取混合标准溶液,用乙水溶液(3.2.3)稀释,配制成FB1浓度依次
为20ng/mL、80ng/mL、160ng/mL、240ng/mL、320ng/mL、400ng/mL,FB和FB3浓度依次为
10ng/mL、40ng/mL、80ng/mL、120ng/nL、160ng/mL、200ng/mL的系列混合标准工作溶液
4仪器和设备
4.1高效液相色谱仪,带荧光检测器
4.2柱后衍生系统。
4.3天平:感量0.01g和0.0001g
4.4均质器。
4.5振荡器。
4.6氮吹仪。
4.7离心机:转速4000r/min
4.8免疫亲和柱(柱容量≥5000ng,FB柱回收率≥80%)(柱容量及柱回收率验证方法参见附录B)
注:对于每个批次的亲和柱在使用前需进行质量检验。
4.9微孔滤膜:0.45m,有机型。
分析步骤
5.1样品制备
将固体样品按四分法缩分至1kg,全部用谷物粉碎机蘑碎并细至粒度小于1mm,混匀分成2份作