GBT5009.157-2003 食品中有机酸的测定.pdf

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C53
中华人民共和国国家标
CB/T5009.157~-2003
食品中有机酸的测定
Determination of organic acid in foods
2003-08-11发布
2004-01-01实施
中华人民共和国卫生部
中国国家标准化管理委员界发布
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GB/TI5009.157-2003
前言
本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。
本标准负责起草单位:华西医科大学公共卫生学院。
本标准主要起草人:黎源倩、王光建、杨庆、杨元。
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GB/T5009.157--2003
食品中有机酸的测定
范囝
本标准规定了测定食品中有机酸(酒石酸、苹果酸、柠檬酸、丁二酸)的高效液相色谱法。
本标准适用于果蔬及其制品、饮枓等食品中有机酸含量的测定。
本方法的检出限为:酒石酸0.1g/mL、苹果酸0.3g/nL、将檬酸0.5Ag/mL、丁ニ
酸2.0gg/mnL。
2原理
食品试样经匀浆提取、离心后,样液经0.3m滤膜抽滤;以(NH4)2HPO-H3POλ缓冲溶液(pH=
2.7)为流动相,用高效液相色谱法在C:色谱柱上分离,于210nm处经紫外检测器检测,用峰高或峰面
积标准曲线测定有机酸的含量
3试剂
本方法中所用试剂均为分析纯,试验用水为重蒸水或同等纯度的水,经0,45μm滤膜真空抽滤。
3.180%乙醇。
3,21mol/L;群酸氢二铵溶液。
3.31mol/L酸。
3.4有机酸标准溶液:称取酒石酸、苹果酸、柠檬酸各0.5000g;丁二酸0.1000g;用超滤水溶解后,
定容至50mL。酒石酸、苹果酸、柠檬酸的浓度分别为10.0mg/mL,丁二酸为2.0mg/mL,此液为标准
储备液。标准使用液:取5.00mL标准储备液于50mL容量瓶中用超滤水稀释到刻度。酒石酸、苹果
酸、柠檬酸的浓度分别为1.0mg/mL,丁二酸为0.2mg/mL。
4仪器
4.1组织捣碎机。
4.2恒温水浴箱。
4.3高效液相色谱仪,配紫外可见检测器。
4.4酸度计。
4.5针头过滤器,0.3m合成纤维树脂滤膜
5分析步骤
5.1试样处理
5.1.1体试样:称取50g试样于组织捣碎机中,加入100mL80%乙醇,匀浆1min。取一定量匀浆
(相当于5g试样)以3000r/min离心10min分出上清液,转入50mL容量瓶中,残渣再用80%乙蹲洗
涤两次,每次15mL,离心10min,合并上清液,加80%乙醇至刻度,混匀,此液为提取液。取5.0mL
提取液于蒸发中,在70℃恒温水浴上蒸去乙醇,残留物用重蒸水定量转入10mL其塞比色管内,加入
1mol/U酸(H3PO2)0.2mL,用重蒸水定容到10mL,混匀。取部分样液经内装0.3以m滤膜的针头
过滤器过滤,液供高效液相色谱分析用。
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GB/T5009.157-2003
5.1.2液体试样;准确吸取5.00mL试样〈若试样中含二氧化碳应先加热除去;若试样中含有人工合
成色素应先加人聚酰胺粉于70℃水浴中加热脱色,样液在3000r/min下离心10min,再取上清液),加
人0.2mL1mol/L磷酸,用重蒸水稀释至10mL,经0.3pm滤膜过滤,滤液供分析用。
6测定
6.1色谱条件
预柱:C8柱,10gm,4.6mm×30mm。
分析柱:Cs柱,5gmn,4.6mm×250mm。
流动相:0.01mol/L礫酸氢二铵,用1mol/L礫酸謂至pH=2.70,临用前用超声波脱气
流速:1mL/min
进样量:20gL。
紫外检器波长:210nm
6.2标准曲线的绘制
取标准使用液0.50、1.00、2.00、5.00、10.00mL,加人0.2mL1mol/L磷酸,用超滤水稀释至
10mL,混匀。进样20L,于210nm处测量峰高或峰画积,每个浓度重复进样2次~3次,取平均值。
以有机酸的浓度为横坐标,色谱峰高或峰面积的均值为纵坐标,绘制标准曲线或经过线性回归得出回归
方程。
6.3试样测定
在与绘制标准曲线相同的色谱条件下,取20aL试样液注入色谱仪,根据标准曲线或线性回归方
程,求出样液中有机酸的浓度。
7结果计算
试样中有机酸的浓度按下式计算:
体试样
X
X V2
液体试样:
X
X VI
式中:
X一一试样中有机酸的含量,单位为毫克每千克毫克每升)[mg/kg(mg/L)]y
c-一由标准曲线或线性回归方程中求得样液中某有机酸的浓度,单位为微克每毫升(Hg/mL)y
vV1ー一试样的最后定容体积,单位为毫升(mL);
vV一一固体试样为提取液的总体积液体试样为用于分析的试样体积,单位为毫升(mL
V2-一分析用试样提取液的体积,单位为毫升(mL)
m-一试样的质量,单位为克(
8精密度
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的9%。
9其他
有机酸的标准溶液色谱图见图1
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