食品检验中的菌种保藏方法.pdf

2013年第1期
食品工程
3月出版
FOOD ENGINEERING
蚕蛹蛋白水解液中游离氨基酸测定方法初探
Primary study on determination method of
free amino acids in the pupa protein hydrolyzate
泆炳财”
(揭阳市质量计量监督检所,广东揭阳515300)
HONG Bing-cai
Guangdong Jieyang supervision testing institution of quality and meterology, Guangdang Jieyang 515300, China
摘要水解委提取気基酸,制备氨基酸系列产品是开发我国キ富委埇资源最有效的途径之一。在蚕蛹
水解过程中,需要对水解液游高氩基酸含量进行检测,以实现工艺控制。常见的游离魚基酸总量及各种游
离酸含量检验的方法包括双指示剂甲滴定法、电位滴定法、基酸自动分析仪法、高效液相色语法二极
管阵列一荧焚光检测器联用技术等。
关健词蚕蛹蛋白;水解;游离基酸;检测方法
Abstract Preparation of amino acid products by h drolysis sikworm chrysalis is one of the most effective ways tod
velop the rich silkworm chrysalis resouces in China In order to control the technological process, the ydrolysis free
amino acid contents were detected in the silk worm chrysalis hydrolysis process. This aper summarized several est
methods for the detection of total amino acids and each of the free acid content, the double indicator formaldehyde
titration, the po al titration, amino acid analyz high per ormance liquid chromatography coupled with a photo
diode array detector and an evaporative light scattering detector(hplc-dad-elsd)were employed in the determina
ton.
Keywords the pupa protein; hydrolysis; amino acids; determination metho
中阳分类号:TS207.4
文献标识码:A
文章编号:1673-6004(2013)01-0011-04
DOI:10.3969is.1673-60442013.01.005
我国是世界最大的茧丝生产国和供应国,全国多种功能的氨基酸稀土配合物。
每年生产蚕茧50万吨左右。蚕蛹是丝绸工业的大
现在不少企业看中蚕蛹的营养价值,加大对養
宗副产品,国内每年平均有10万吨干蚕蛹可供蛹营养资源的开发与利用。通常是水解蚕蛹蛋白提
利用。蚕蛹富含蛋白质,干蚕蛹中蛋白质含量达取氨基酸,制备氨基酸系列产品。蚕蛹蛋白的水解
45g/100g~50g100,且主要为优质球蛋白。蚕蛹有酶水解、酸水解、碱水解和发酵等方法,还有结
蛋白质中含有18种氨基酸,组成合理,比例均衡,合徵波辐射、电滲电解等工艺,水解技术日臻完
其中必需氨基酸含量之和超过40g10g。水解蚕蛹善。在各种各样的水解生产过程中,都需要对水解
蛋白可制备多肽、复合氫基酸营养液,分离出纯的液中游离氨基酸含量进行检测,以实现对生产过程
氨基酸或进一步深加工成具有农药、植物生长剂等的工艺控制。本文对参照相关的检测标准,对几种
洪炳财,男,193年出生,2007年毕业于中山大学行政管理常用的蚕蛹水解液中游离氨基酸含量的测定方法进
学专业,质量工程师。
行了归纳和对比分析。
收稿日期:2013-01-14
万方数据
食品工程
2013年第1期
3月出版
蚕蛹水解液中游离氨基酸常用的测
a)吸取含氨基酸约20mg的样品溶液,置于
定方法
100mL容量瓶中并加纯水至刻度,混匀后吸取
20.0mL置于200mL的烧杯中,加60mL纯水,搅
1.1双指示剂甲醛滴定法
拌后用0.05mol/L氢氧化钠标准溶液滴定至溶液
1.1.1原理
pH为8.2,记下消耗0.05mol/L氢氧化钠标准溶液
氨基酸具有酸性的-COOH基和碱性的-NH2的体积,计算总酸含量。
基,他们相互作用而使氨基酸成为中性的内盐。当
b)加入10.0mL甲醛溶液,混匀。再用0.05
加入甲醛溶液时,-NH互2基与甲醛结合,从而使其ml/L氢氧化钠标准溶液将溶液pH滴定至9.2,记
碱性消失。这样就可以用强碱标准溶液来滴定下消耗的氢氧化钠标准溶波的用量
-COO基,并用间接的方法测定氨基酸的总量。
e)同时取80mL纯水,先用0.05ml/L氢氧
1.12试剂
化钠溶液调节至pH为8.2,再加人100mL甲醛溶
质量分数40%中性甲醛溶液,以百里酚酞作指液,用0.05mdl/L氢氧化钠标准溶液滴定至pH为
示剂,用氢氧化钠将质量分数40%甲醛溶液中和至9.2,做试剂空白试验。
淡蓝色;质量分数0.1%百里酚酞乙醇溶液;质量分1.2.4研究进展
数01%中性红乙醇(体积深度50%)溶液;0.1mol/L
汤春兰等应用电位滴定法测定食品中游离氨基
氢氧化钠标准溶液。
酸的含量,仪器设备简单,操作方便快捷,利用
1.13操作方法
pH的变化确定滴定终点,无需指示剂,不受溶液
吸取含氨基酸约20mg~30g的样品溶液2色泽影响,从而提高了准确度,回收率达95%以
份,分别置于250mL锥形瓶中,各加50mL蒸馏上。陈继峰等分别用自动电位滴定仪和人工滴定法
水,其中1份加人3滴中性红试剂,用0.1mol/L测定总酸和氨基酸态氮含量,通过对16个样品的
氢氧化納标准溶液滴定至由红色变为琥珀色为终测定,配对检验结果表明,两种方法测定样品中
点;另1份加入3滴百里酚酞指示剂及中性甲醛总酸和氨基酸态氮含量无差异显著性(P>0.05
20mnL,摇匀,静聲1min,用0.1mol/L氢氧化钠表明采用自动电位滴定仪测定样品中的总酸和氨基
标准溶液滴定至淡蓝色为终点。分别纪录两次所消酸态氮与国家标准检验方法所得的结果一致。
耗的碱液量。
1.3氨基酸自动分析仪法
1.1.4研究进展
1.3.1原理
白剑清利用双指示剂甲醛滴定法测定味精中谷
食品中的蛋白质经盐酸水解成为游离氛基酸,
氨酸钠含量,结果表明:5份样品的谷氨酸钠检测经氨基酸分析仪的离子交换柱分离后,与茚三酮溶
的变异系数为0.33%,回收率试验表明该方法平均液产生颜色反应,再通过分光光度计比色测定氨基
回收率99.5%,表明双指示剂甲醛滴定法测定谷氨酸含量。利用样品各种氨基酸组分的结构不同、酸
酸钠具有较高的准确度和精密度。
碱性、极性及