GBT 16346-1996 食品中诱惑红的测定.pdf

B/T16346-1996
前
言
本标准非等效采用国外标准。
本标准的附录A是提示的附录。
本标准由卫生部卫生监督司提出
本标准负责起草单位:卫生部食品卫生監督检验所;参加起草单位:河北省卫生防疫站、邯郎市卫生
防疫站。
本标准主要起草人:杨祖英、李良学、焦淑婷、王平、贾丽华。
本标准由卫生部委托技术归口单位卫生部食品卫生监督检验所负责解释。
中华人民共和国国家标准
食品中诱惑红的测定
GB/T163461996
Determination of allura red in foods
1范剧
本标准规定了食品中诱惑红的测定方法
本标准适用于糖果包衣等食品中诱惑红的测定。本方法的取样量10g时,最低检出限为25mg/kg。
2原理
诱惑红在酸性条件下被聚酰胺粉吸附,而在碱性条件下解吸附,再用纸色谱法进行分离后,与标准
比较定性、定量
3试剂
1石油醚:沸程30~60℃。
3.2甲醇
3.3聚酰胺粉(尼龙6):200目。
3.4硫酸:1+10。
3.5氢氧化钠:50
3.6海沙:先用盐酸(1+10)煮沸15min,用水洗至中性,再用氢氧化钠(50g/L)煮沸15min,用水洗至
中性,再于105℃干燥,贮于具塞瓶中保存,备用。
3.7乙醇溶液:50%(V/V)
3.8乙醇-氨溶液:取2mL的氨水,加70%(VV)乙醇至100mL。
3.9pH6的水:用20%的柠檬酸调至pH6。
0柠檬酸溶液:200g/L。
3.11钨酸钠溶液:100g/L。
3.12诱惑红的标准溶液:准确称取0.025g诱惑红,加水溶解,并定容至25mL,即得1mg/mL。
3.13诱惑红的标准使用溶液:吸取诱惑红的标准溶液5.0mL于50mL容量瓶中,加水稀释到
50mL,即得O.1mg/mL。
3.14展开剂
3.14.1丁酮十丙酮+水+氨水(7+3+3+0.5)。
3.14.2正丁醇十无水乙醇+1%氨水(6+2+3)。
3.14.32.5%柠檬酸钠十氨水+乙醇(8+1+2)。
3.15仪器
3.15.1可见分光光度计。
3.15.2微量注射器,10、50pL。
3.15.3展开槽。
中华人民共和国卫生部1996-06-19批准
1996-09-01实施
GB/T16346-1996
3.15.4电吹风机。
3.15.5痣纸:中速滤纸,纸色谱用
3.15.6恒温水浴锅。
3.15.7台式离心机。
4分析步验骤
4.1样品的处理
4.1.1汽水:将样品加热去二氧化碳后,称取10.0g样品于烧杯中,然后用20%柠檬酸调pH呈酸性,
加入0.5~1.0g聚酰胺粉吸附色素,将吸附色素的聚酰胺粉全部转到漏斗中过滤,用pH4的酸性热水
洗涤多次(约200mL),以洗去糖等物质。若有天然色素,用甲醇-甲酸溶液洗涤1~3次,每次20mL,至
洗液无色为止。再用70℃的水多次洗涤至流出液中性。洗涤过程必需充分搅拌然后用乙醇-氨溶液分次
解吸色素,收集全部解吸液,于水浴上躯除氨,蒸发至2mL左右,转入5mL.的容量瓶中,用50%的乙醇
分次洗涤蒸发皿,洗涤液并入5mL的容量瓶中,用50%的乙醇定容至刻度。此液留作纸色谱用
4.1.2硬糖:称取10.0g的已粉碎的样品,加30mL的水,温热溶解,若样品溶液的pH值较高,用柠檬
酸溶液(3.10)调至pH4左右。以下操作从“加入0.5~1,0g聚酰胺粉吸附色素”起,按4.1.1条操作。
4.1.3糕点:称取10.0g已粉碎的样品,加入30mL石油醚提取脂肪,共提三次,然后用电吹风吹干,
倒入漏斗中,用乙醇-氨溶液解吸色素,解吸液于水浴上蒸发至20mL,加入1mL的钨酸钠溶液沉淀蛋
白,真空抽滤,用乙醇-氨溶液解吸滤纸上的诱惑红,然后将滤液于水浴上挥去氨,调pH呈酸性,以下从
“加入0.5~1.0g聚酰胺粉吸附色素”起,按4.1.1条操作。
4.1.4冰淇淋:称取10.0g已均匀的样品于烧杯中,加入20g海沙,15mL石油醚提取脂肪,提取2
次,倾去石油醚,然后在50℃的水浴上挥去石油醚,再加入乙醇-氨溶液解吸诱惑红,解吸液倒入100mL
的蒸发皿中,直至解吸液无色。将解吸液于水浴上挥去乙醇,使体积约为20mL时,加入1mL硫酸(1+
10),1mL钨酸钠溶液沉淀蛋白,放置2min,然后用乙醇-氨溶液调至pH呈碱性,将溶液转入离心管
中,5000r/min,离心15min,倾出上清液,于水浴上挥去乙醇,然后用柠檬酸溶液(3.10)调pH呈酸性,
以下自“加入0.5~1,0g聚酰胺粉吸附色素”起,按4.1.1条操作。
.2定性
取色谱用纸,在距底边2cm起始线上分别点3~10L的样品处理液、1mL色素标准液,分别挂于
盛有3.14.1、3.14.2、3.14.3展开剂的展开槽中,用上行法展开,待溶剂前沿展至15cm处,将滤纸取出
空气中晾干,与标准斑比较定性。
4.3定量
4.3.1标准曲线的制备
吸取0.0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL诱惑红标准使用液,分别置于10mI.比色管中,各加水稀释到
刻度。用1cm比色杯,以零管调零点,于波长500nm处,测定吸光度,绘制标准曲线
4.3.2样品的测定
取色谱用纸,在距离底边2cm的起始线上,点0.20mnL样品处理液,从左至右点成条状。纸的右边
点诱惑红的标准溶液1I,依法展开,取出晾干。将样品的色带剪下,用少量热水洗涤数次,洗液移入
10mL的比色管中,加水稀释至刻度,混匀后,与标准管同时在500nm处,测定吸光度。
5结果
5.1计算:
X
AX1000
mXV2/V1×1000
……………(1)
式中:Xー一样品中的诱惑红的含量,g/kg;