原料乳中舒巴坦的测定——高效液相色谱仪-二极管阵列检测法.pdf

分析与检测
原料乳中舒巴坦的测定一高效液相色谱仪-二
极管阵列检测法
口丁红梅李进军李静徐州绿健乳品饮料有限公司
利用高效液相色谱仪ー二极管阵国药集团色谱纯;原料乳:徐州市周95:5的磷酸二氢钾溶液ー乙腊作为流
列法檢测原料奶中舒巴坦的含量。采边奶站;硃酸二氢钾:分析纯;业铁动相,流速采用1m!血in,檢测波长
用C18色谱柱,以体釈比为955的嘩氰化钟:分析纯;乙酸锌:分析纯。220m;柱温30℃;进样体积20ul
酸氢溶液-乙腈作为流动相,流溶液配制
样品前处理
速为1mL和in,检测的波长为220nm,
219g4乙酸锌溶:准确称取21.9g
准确称取原料乳5g(精确至0.001
温湿30C?样品用业铁氧化钾、乙酸乙酸锌溶解于100容量瓶中,加水置于25n1具塞试管リ,次加入1
锌沇淀蛋白
定谷至刻度,匀备用
业铁氰化钾溶液,摇匀,再加入1.0m
舒巴归为不可逆的党争性3-内酰
106g4L业铁氰化钾浴液:准确称乙酸锌溶液,究分匀,用水定容至
酶抑制剂,对革兰阳性及阴性润(除取106g乙酸锌溶解j1001容量2an,匀,室温下超声提取30min,
绿旅菌外)所产生的β-内酰中,加水定容至刻度,掃匀备
过淞收集液,将液再次经0.45
(B-内酰胺醇可分解奶屮残留的β
2m0lL僯酸溶液(用于调节PH值
滤膜过滤到2.0m!样品中(过滤器不
内胶类抗牛素)均有抑制作用,与酶吸取12.ml磷酸溶液放于100m1容量得重复使用),即可进行分析測定。
发生不可逆的反应斤使海失活,抑制。瓶中,加水稀释全刻度,播匀备用。标准曲线的绘制
清除后也不能使嗨的性得到恢复。我
5.4g川磷酸盐绥冲液:准确称取
根据实验婁求,配配置舒四归标准
们国家对」食品安全作常重视,农业部54g磁酸二氢钾溶解丁10001容量瓶溶液10、20、50、100、150ug血l,
235公告中対ず抗牛素的残留做出严格中,加水约950m1,、用2moん磷酸调浓度由低到高进行HPLC分析,然后以
要求,一些不法分」为牟取利益,在有H至5.0,定容全1L,摇匀备用。
峰面积-浓度作图,绘制标准曲线。
抗牛素的原料奶中加入B-内酰胺酶
标准储备液:蓿确称取舒巴坦标结果计算
人m抑抗牛素的检出,现有回家対推品10mg(精确到0.1ng),放于
试中舒巴坦的含量出色谱数据
丁β-内能陵酶的检测已列入必检检测10mn1容量瓶中,采用磷酸盐绶冲液处埋软件完成或按下式计算获得:
项日,四此他们就在加人了βー内酰核溶解(室温下采用超声淑振荡器充分
梅的原料奶巾加入舒ピ坦,使3-内酰溶解),并定容至刻度,充ハ端別,公式:X=AS×m
胺失大活性,导纹-内酰版晦附配成1mg加L的祢准储备液,低温保你。
式中:X
样品中舒
性的什奶不能被俭出而逃避进而追求利
标准出线的配制:根括实验室实验ピ坦的
量(mg/kg)
益。为乳品理下安全忠,“重威胁消要求,采用流动相将舒巴坦标准储备
标准溶液中舒
费人群的身体健康,降低了消费者对食液逐级稀释得到相应浓度的标准工作坦的浓度(gg/m);
品心其是乳品的信任。国家食品安全风液(10、20、50、100、150ugmL)
称取样品质量(g)
险抽样把此项列入风险监控项日,
仪器与设备
Vー一样液的最终定容体积(m1);
是,国家并未出台一些关」舒巴坦的检
00高效液相色增仪(配
A一一样液中舒巴坦的峰面积
测方法标准,然而近年米也有些方法有一极管阵列检测器):安捷伦
As一一标准溶液中舒巴坦峰面积。
被采用,但是操作起率复杂,需要高品Br2245塑电子分析天平:北京塞多结果分析
的设爸,且运行成本高,此我们结利斯仪器系統有限公司;超纯水机通过查阅资料约共文献等资料
合自身条件,利用现有的设备,在前辈
济南格林特环保设备有限公司;得知舒巴坦吸收的渺长介别为22
们的基础上做了改进,该方法操作简便、xQ3200E型数控超声波清沈器:尾230nm。木得到更完美准确的数据,故
成本低康,使す推广。适用す检测札称、山超声仪器有限公司:真空泵及砂芯将舒ど担标准溶液在波に210360m
专业院校,小的加に厂等进行原料乳过装置,X03-C18(4.6×150mm
范围内进行多次设定检测得知(见图
试剂舒巴旧标準品(低温保:色違約,:安
中舒四坦的初步快速排查
5-micron)
1)。从图1获得的光谱图中可以看出,
试剂和材料
舒巴坦的最大吸收波长在210nm处,
采用安捷伦XDB-c18且此时峰偵最高,基线分离最完全,
ade in Ge rm any纯度>98%;乙腈
(4.6×150m,5- Micron)色谱杜
峰面积较德定。舒巴坦是一和极性物