苯并芘对褐菖鲉肝细胞DNA交联的影响.pdf

第29卷第4期
湾海峡
Vol
2010年11月
JOURNAL OF OCEANOGRAPIIY IN TAIWAN STRAIT
Nov.,2010
苯并芘对褐菖蚰肝细胞DNA交联的影响
张景智',陈荣2,李东晓
(1.厦门大学海洋与环境学院近海海洋环境国家重点实验室,福建厦门361005;
2.厦门大学细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室,福建厦『门361005)
摘要:以禍葛( Sebastiscus marmoratus)为实验材料,设定苯并茈[B(a)P]的注射剂量梯度分别为
0.00.05、,0.50、5.00mg/kg,分别于实验的第0、3、6天对每一条鱼进行腹腔注射,于第1、4、7天
取样,测定胆汁中的B(a)P及其代谢物含量.采用荧光检测法检测B(a)P染毒后禍葛鲇肝细胞
DNA-DNA交联(DDC)交联系数的变化,并用KCI-SDS沉淀法检测DNA-蛋白质交联(DPC)交联系
数的变化.结果表明:(1)经注射染毒后鱼体胆汁中的B(a)P及其代谢物含量蕎积程度存在着明显
的剂量效应和时间效应;(2)B(a)P的注射剂量分别为0.05、0.50mg/kg时各时间点祸菖軸肝细
跑DC交联系数均无显著增大(P>0.05),在5.00g/kg剂量组,随着时间延长DC文联系数逐
渐增大,第4天即有显著羞异(p<0.05),第7天差异极显著(p<0.01);(3)B(a)P诱导DPC的趋
勢与DDC类似,但0.5mg/kg荆量组在第7天DPC交联系数即出现显著增大(P<0.05).这表明
B(a)P对DPC的诱导高于DDC.这为进一步研究B(a)P的遺传毒性提供了位据,并为探讨B(a)P
致癌的作用机理提供了新的信息
关键词:海洋生物学;生物毒理;DNA-DNA交联;DNA-蛋白质交联;苯并茈;祸葛
DOl:10.3969/J.ISSN.1000-8160.2010.04.002
中图分类号:P735
文献标识码;A
文章编号:1000-8160(2010)04-0446-06
苯并芘[B(a)P]是1种具有强致癌性的多环芳烃( polycyclic aromatic hydrocarbons,PAHs),被国际癌症
研究机构(IARC)列为第2类A组人类致癌物.B(a)P在环境中广泛存在,且对鱼类具有毒性作用. Pache
co等(2002)的研究表明B(a)P会在欧洲鳗( Anguilla anguilla)胆汁内蓄积,并可造成肝脏细胞的萎缩、组
织坏死及点状炎症?.翁朝红等(2008)和 Ribeiro等(2005)也分别发现B(a)P可以引起黑鲷( Sparus macro-
cephalus)和欧洲鳗鲡肝组织的病理变化4.由于B(a)P的强致癌性,一些研究表明它也会引起鱼类DNA
损伤,主要是DNA断链】和形成DNA加合物?
DNA交联是DNA损伤中的1种.DNA交联一般分为DNA-蛋白质交联(DNA- protelncros-inks,DPC)和
DNA-DNA交联(DNA- DNA crosslinks,DC)2类,谢静芳等(2007)研究了S02致小鼠肝细胞DNA-蛋白质交
联作用,表明强致癌剂可以导致DNA交联作用?,而B(a)P是否可以引起哺乳类或者鱼类DNA交联目前
文献报道比较少.本研究以海洋鱼类褐菖( Sebastiscus marmoratus)为实验对象,分别检测B(a)P染毒后致
褐菖肝细胞DDC和DPC交联系数的变化,为进一步研究B(a)P的遗传毒性提供依据,并为探讨B(a)P
致癌的作用机理提供新的信息
1材料与方法
1.1材料
B(a)P购自 Dead Sea Bromine Group公司,纯度为99.9%;胰蛋白酶( typsin)购自上海生工生物工程有
限公司;THis、HEPS、小牛胸腺DNA标准液购自上海生物工程有限公司,由美国 Amresco公司生产;十二烷
基硫酸钠(SDS)购自Merk公司;蛋白酶K购自Merk公司; Hoechst3258购自 SIGMA公司; SQ Tissue DNA
Ki试剂盒购自 OMEGA公司;其他试剂如KCl、EDTA、KH2PO2、K2HPO-均为国产分析纯,美国瓦里安公司的
收稿日期:2009-10-29
甚金项目:国家自然科学基金资助项目(40776067):厦门大学细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室开放基金资助项目(2009104)
作者简介:张景智(1983-),男,颂士研究生;E-mail:gouzhil93@sohu.com
通讯作者:陈荣(1974-),男,副教授;E-mail; herong@xmu.edu,cm
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