SN 0294-1993 出口贝类腹泻性贝类毒素检验方法.pdf

中华人民共和国进出口商品检验行业标准
SN0294-93
出囗贝类腹泻性贝类毒素检验方法
Method for the determination of diarrhetic
shellfish poison in shellfish for export
1993-12-28发布
1994-05-01实施
中华人民共和国国家进出囗商品检验局发布
中华人民共和国进出口商品检验行业标准
出ロ贝类腹泻性贝类毒素检验方法
SN0294…-93
Method for the determination of diarrhetic
shellfish poison in shellfish for export
1主题内容与适用范翻
本标准规定了海产双壳类贝肉、贝柱、外套膜及其制品的腹泻性贝类毒素检验方法
本标准适用于海产双壳类與肉、與柱、外套膜及其制品的腹泻性贝类毒素的检验
2引用标准
GB4789.26罐头食品商业无菌的检验
ZBB50001出口水产品检验抽样方法
ZBB50004出口冷冻水产品解冻方法
3检验批
同一检验批的商品应具有相同特征,如产地、规格等
4祥品的保客
4.1样品要有充分的代表性并尽可能没有个体差异。同时,还要有充分的个数。去壳贝肉、带壳的或罐
装的等;均应采取足够的个数并使贝肉达200g以上
4.2远离实验室,不能及时送检的样品,除了在常温下品质不会发生变化的,应将样品置于合成树脂袋
内冷冻送检。如为带売样品,应按5.3的方法开壳,去除水分后冷冻送检
5样品的制备
5-1生鲜带壳样品,用刀切开闭壳肌开壳取出贝肉。不得以加热及加药物的方法开壳。注意不要破坏
闭壳肌以外的组织,尤其是中肠腺(又称消化盲囊,组织呈暗绿色或揭绿色)。
将去壳贝肉放在孔径约2mm的金属网上,控水5min,按5.4或5,5制备检样。
5-2冷冻的带壳样品,使其在室温下呈半冷冻状态后,以前述方法开壳取肉,这时的贝肉仍呈冷冻状
态。经除去贝肉外部附着的冰片,轻轻抹去水分后,按5.4或5.5制备样品。
3事先已去除水分的冷冻去壳贝肉,按5.4或5.5制备样品。
5-4扇贝、贻贝、钍蛎等可以切取中肠腺的去壳贝肉,狝量200g贝肉重量后仔细切取全部中肠腺,将
中肠腺狝重后细切混合做为检样。同时,注意不要使中肠腺内容物污染案板。
5-5对不便切取中肠腺的去壳贝肉样品,可将全部贝肉细切、混合,做为检样。
5.6为避免毒素的危害,应戴手套进行检验操作。移液管等用过的器材应在5%的次氯酸钠溶液中浸
泡1h以上,以使毒素分解,同样,废弃的提取液等也应以上述溶液处理。
中华人民共和国国家进出口商品验局1993-12-28批准
1994-05-01实施
SN0294-93
6洲定方法
6.1方法提要
用丙酮提取贝类中毒素,再转移至乙醚中,经减压浓缩至干后,再以1%吐温60生理盐水溶解残留
物注射小白鼠观察存活情况,计算其毒力
6.2试剂和材料
6.2.1丙酮(分析纯)
6.2.2乙醚(分析纯)。
6.2.31%吐温60生理盐水。
6.3仪器和设备
6.3.1旋转蒸发器。
6.3.2均质器。
6.3.3天平:感量0.1g
6.3.4刻度试管:15mL,具0.2mL刻度。
6.3.5冰箱:0~5℃和15~20C
6.3-6注射:1mL。
6.3.7注射器针头:8。
6.3.8体重为16~20g的健康ICR系雄性小自鼠。
6.4测定步骤
6.4.1提取
6.4.1.1将检样置于均质杯内,加3倍量丙酮至少均质2main。如为小均质杯,可分两次操作。
6.4.1.2用布氏漏斗抽滤并收集提取液
6.4.1.3对残渣以检祥两倍量丙酮再抽滤两次,合并抽液。
6.4.1.4将抽提液移入旋转蒸发瓶内,减压浓缩去除丙酮直至在液体表面分离出油状物。
6.4.1.5将浓缩物移入分液漏斗内,以100~200mL乙継和少量的水洗下粘壁部分,以不生成乳浊液
的程度轻轻振荡,静置分后去除水层。
6.4.1.6用相当乙醚半量的蒸馏水洗醚层两次,再将醚层移入300~500mL的茄形瓶中,减压浓缩去
除乙醚。
6.4.1.7以少量乙醚将浓縮物移入50或100mL茄形瓶中,再次减压浓縮去除乙醚。
6.4.1.8以1%吐温60生理盐水将全部浓缩物在刻度试管中稀释到10mL。按5.4条以中肠腺做为检
样的,此时1mL液量相当于预先测定的20g去壳贝肉的重量。对其他检样,此时1mL液量也相当于
20g去売贝肉的重量,以此悬浮液做为试验溶液
6.4.1.9如必要时,对试验溶液可做进一步稀释,稀释前,应先以振荡器使试液成均一悬浮液,再取其
部分以1%吐温60生理盐水稀释成4倍或16倍的试液。
6.4.2小白鼠试验
6.4.2.1以振荡器使试液或其稀释液成为均一的悬浮液。
6.4.2.2分别将1mL.试液注射到三只体重16~20g的健康ICR系雄性小白鼠腹腔中。
6.4.2.3按上项方法,注射1%吐温60生理盐水,做为阴性对照。
6.4.2.4观察自注射开始到24h后的小白鼠存活情况,求出一组三只中死亡两只以上的最小注射量。
6-4-2-5小白鼠注射腹泻性贝毒后的症状为运动不活泼,大多呼吸异常,致死时间长(也有24h以上
的)
6.5结果计算和表述
6.5.1毒力的讨算