SNT 0475-95 出口商品中粪链球菌群检验方法.pdf

中华人民共和国进出口商品检验行业标准
SN/T0475-95
出口商品中粪链球菌群
检验方法
Examination methods of the fecal streptococcus
group in commodities for expor
1995-09-06发布
1996-01-01实施
中华人民共和国国家进出口商品检验局发布
中华人民共和国进出口商品检验行业标准
出口商品中粪链球菌群检验方法
SN/T0475~95
Examination methods of the fecal streptococcus
group in commodities for export
1主题内容与适用范?
本标准规定了出口商品中粪链球菌群的抽样、制样和多管法、滤膜法及平板计数检验方法。
本标准适用于食品中粪链球菌群的检验,也适用于羽绒制品填充料中粪链球菡群的检验。
2设备与材料
2.1取样工具:綬子、手术剪、刮勺、乳胶手套等。
2.2具盖样品瓶、金属样品桶或其他容器。
2.3高压蒸汽灭菌器。
2.4天平:称量1000g,感量0.01g。
2.5均质器及1000mL具盖均质杯。
2.6移液管:容量1mL,10mL(大口径)。
2.7培养:60mm×15mm,90mm×15mm或50mm×12mm玻璃皿或塑料皿。
2.8各种规格的培养基容器。
2.9玻璃、耐髙温塑料、陶瓷或不锈钢过滤器。
2.10滤膜:直径47mm,微孔直径0.45土0.4pm,亦可用性能栢同的其他涞膜替代。
2.11振荡器。
2.12恒温培养箱:36土1C,44.5土0.5℃C
2.13恒温水浴箱:44.5土0.5C.。
3培养基
3.1叠氮化钠葡萄糖肉汤[参见附录A(补充件)中A11。
3.2 Pfizer肠球菌选择性琼脂(PSE琼脂参见附录A(补充件)中A2]。
3.3KF链球菌琼脂[参见附录A(补充件)中A3]。
3.4脑心浸液[参见附录A(补充件)中A4]。
3.5脑心浸液琼脂[参见附录A(补充件)中A5]
4抽样与制样
4.,1检验批
以不超过2500件(以商品包装件数计,如包、箱、袋等)为一检验批。如另有规定,则按不同商品所
规定的报验批为检验批。
同一批商品应具有相同的特征,如包装、标记、产地、颊格和等级等。
4.2抽样数量
中华人民共和国国家进出口商品检验局1995-09-06批准
1996-01-01实施
SN/T0475-95
在无特殊规定时,按照公式√N/2(式中N为该批商品的总件数),遵循四舍五入规则计算抽样件
数;如另有规定,则按不同商品所规定的抽样数进行抽样。
4.3抽样方法与样品保存
按4.2规定的抽样件数随机抽取,以无菌操作逐件开启。
4.3.1食品:对于有内包装(如袋、瓶或装者)的食品,每件至少取一完整未开封的小包装单位作为原
始样品;如无内包装或包装较大者,则使用灭菌工具取样。原始样品总量不少于1kg(1L),装入清洁灭
菌容器内,加封后标明标记。如不能及时检验,冷冻食品样品应保持冷冻状态;非冷冻样品需在2~5℃
保存。
4.3,2羽绒制品填充料:通常情况下是在填充前临时包内取样,必要时从制品中取样。使用灭菌镢子或
戴经消毒的乳胶手套从每件的不同部位抽取100g作原始样品,放入灭菌样品桶内,加封后标明标记。
如不能及时检验,样品需在2~5℃保存。
样品制备
5.1液体食品
用无菌吸管吸取25mL样品,放入装有225mL灭菌生理盐水的500mL稀释瓶中,迅速振摇,充分
混匀,制成;10样品匀液。
5.2水产品、禽类制品
以无菌操作取25g样品放入装有225mlL灭茵生理盐水的均质杯内,以8000r/min均质1
2min,制成1:10样品匀液。
5.3羽绒制品填充料
取10g样品放入适当大小的锥形烧瓶内、加入400mL无菌水于锥形烧瓶中,用灭菌胶塞塞紧瓶
口,置振荡器桭荡10min
对上述各样品稀释液可根据需要进一步按10倍递增稀释。
6接种培养和计数
6.1多管法
6.1.1用适当稀释的样液接种一套叠氮化钠葡萄糖肉汤管。接种量为1mL或1mL以下时,使用
10mL单料管;接种量为10m:L,使用10mL双料管。接种后的试管置36±1℃培养24士2h,检査各试
管的混浊情况。若混浊不明显,继续培养至48士2h后记录结果
6.1.2培养24±2h或48士2h之后,对所有呈现混浊的叠氮化钠葡萄糖肉汤管进行确证试验。用接
种环将各管的培养物划线于PSE琼脂平板上,倒置平皿于36土1℃培养24±2h。琼脂平板上出现的带
棕色环的棕黑色菌落,确证为粪链球菌群细菌。
6.1.3MPN值的记录和计算
根据接种的样品量和确证为粪链球群细菌的管数,査MPN表[参见附录B(补充件)],报告每克
毫升)样品中粪链球菌群MPN值
6.2滤膜法
6.2.1平板培养基制备:倾注或吸取4~5mL融化的KF琼脂于平m(60mm×15mm)中,若平板表
面有气泡,可用火焰灼除。若使用盖合紧密的塑料培养Ⅷ(50mm×12mm),可预先制成储备平板,于4
~10℃冰箱内保存4周效果不减。
6.2.2样品量的选择与样品过滤:根据样品的污染程度,使用样液的量为100,10,1,0.3或0.01mL.
使用灭菌滤膜过滤样液,以能在滤膜上生长出20~100个菌落为宜
6.2.3接种与培养:将已滤过样液的滤膜紧贴在KF琼脂培养基表面上,膜下避免出现气泡。倒置平皿
于36土1C培养48土2h。