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2013年6月
高效液相色谱仪自动进样器的验证研究
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高效液相色谱仪自动进样器的验证研究
黄桂荣
(江西国药有限责任公司,江西南昌330052)
摘要:根据《药品生产质量管理规范》GMP要求,对分析仪器进行验证在实验室管
理系统越来越重要。验证高效液相色谱仪自动进样器的准确性、重复性,是对产品质量分
析的保证。根据CMP要求我们采用 Gemini5uC18110A色谱柱,流动相用40%的甲醇水
溶液,检测器波长为254mm。色谱柱温度为40℃,用1x10-g/mM袭-甲醇标准溶液作为
测定物质来测量自动进样器进样量的准确性和线性。
关键词:高效液相色谱仪自动进样器验证
根据《药品生产质量管理规范》〉, Good manufa
ctur
(2)40%甲醇水溶液傲流动相
ng practices简称CMP。药品生产CMP验证是国家依
(3)波长254nm
法对药品生产企业及药品的品种实施药品监督检査并
(4)流速1.0ml/min
取得认可的一种制度,是政府对药品生产企业监督的
(5)温40℃
重要内容,也是确保药品生产质量的一种科学的、先进
三、实验方法及结果
的科学管理手段,具有合格的检测手發,才是生产合格
1.用1.0x10-“k/ml莠一甲醇标准溶液来测定
产品的保证。
2.实验方法
中国药品CMP验证要求对所有药品检验仪器进
(1)重复性
行验证,自动进样器作为高效液相色谱仪的一部分,其
高效液相色谱仪将自动进样器进样量分别设置为
作用相当重要,进样的准确性直接影响样品测定的结5u、10ul、15u、20ul、25ul,每个体积用1.0x10-“g/ml
果。所以对自动进样器进样量的准确度及线性的验证萘一甲醇标准溶液连续进样六次。
具有重要的意义。
(2)测定指标
我们根据高效液相色谱仪自动进样器的仪器特
重复性RSD≤1.0%
性,选择了1.0x10-g/m券-甲醇标准溶液作为测定
线性回归系数R2≥0.999
物质,根据进样量与峰面积成正比例的关系,用1.0X
(3)计算公式
10-g/ml券一甲醇标准溶液来验证自动进样器的重复
RSD=[(X1ーX均)2/(ュー1)]09x1/X平均
性和线性。因此我们通过对高效液相色谱仪自动进样100%
器做以下三方面的测试:
式中:X第i次测得的保留时间或峰面积;
相同进样量重复六次进样计算其RSD来考察其重
X平均一n次测量结果的算术平均值;
复性;
I一测量序号;
进样体积的改变与峰面积的关系是否呈线性;
高浓度的样品的残留是否影响下次样品的测定。
打开电源,将液相色谱仪和自动进样器连接好,使
通过这三方面的测试来判断自动进样器的性能是仪器处于正常工作状态。用液相色谱仪的标准品:1
否符合规定。
10g/ml禁一甲醇标准溶液作为测定物质,将标准溶
一、仪器与实验药品
液置于自动进样器内样品瓶中,将自动进样器分别设
仪器:高效液相色谱仪. A glen1100
置为5ul、10ul、15ud、20ul、25ul的体积进行进样,每个体
试剂:1.0x10-g/ml-甲醇标准溶液(中国计积重复进样6次,记录保留时间和峰面积,计算
量科学院标准物质)。
RSD%、线性方程和回归系数
二、色谱条件
4)高效液相色谱仪自动进样器重复性、线性测试
(1)色谱柱 Gemini5uC18110A
数据记录
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江西化工
2013年第2期
高效液相色谱仪自动进样器重复性、线性测试数据记录
测试物质
1x10-g/ml萘一甲醇标准溶液
色谱柱
Gemini 5u C18 110A
色谱条件
流动相
甲醇
流速
1. Om/min
柱温
接受标准:重复性RSD≤1.0%
线性回归系数R2=0.999
面积
5
6
A
RSD%o
5ul
718.54715.33717.45714.29
719.97
717.43
717.17
0.29%
1416
1436
142142.
0.83%
15ul
2162
2168
2167
2157
262162?6
670.24%
20ul
282
2886
2886
2887
2884
2886.000.11%
Su
3601
3605
3629
3610
3611
3611
3611.170.27%
线性
Y=144.9X-12,213
方程
R2=1
3.1x10-g/ml萘-甲醇标准溶液5山进样量的色谱图
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图一一组进样量5u山萘一甲醇标准溶液色谱图