对乙酰基偶氮羧光度法测定大豆中可溶性蛋白.pdf

2013年1月
食品研究与开发
第34卷第2期
检測分析
54
Food Research And Development
对乙酰基偶氮羧光度法测定大豆中可溶性蛋白
冯爱青',胡秋奕2,侯晓慧
(1.洛阳师范学院生命科学系,河南洛阳471022;2.洛阳师范学院化学化工学院,河南洛阳471022
摘要:紫红色的有机试剂对乙酰基偶氮羧在pH290的 Britton- Robinson缓冲溶液中,能与白质形成蓝色复合物,
Amax为669nm,比试剂本身红移约92nm,表观摩尔吸光系数em=3.09×10°1/(mol-cem),蛋白质在10pg/ml
100ugnl.(BSA)范国内遵循比尔定律。0.1%的 Fritton-100存在,吸光度提高23%。探讨了反应的最佳条件,建立了
测定蝥白质的光度分析新方法,用于大豆蛋白的测定,方法操作简便,重现性好,基本无千扰。
关键词:吸光光度法;对乙酰基偶氮羧;大豆;蛋白质
Determination of Soluble Proteins in Soybean by B-acetylcarboxyazo
FENG Ai-qing, HU Qiu-luan", HOU Xiao-hui
(1. Department of life Science, Luoyang Normal Ur
ang 471022, Henan, China; 2. Deparment of
Chemistry, Luoyang Normal University Luoyang 471022, Henan, China)
Abstract Purple B-acetylcarboxyazo could combine with protein form blue complex in Britton-robinson
bufer at pl 2.90, which presents a maximum absorption al 669 nm with 92 nm of red shift compared to
Acelylcarboxyazo itself. Its apparent molar absorptivity and line r range were 3.0910(molcm )and 10 W/ml
100 w/ml BSA). Sensitivity increased 23 with the presence of 0.1 of lrittonx-100. A new method for
determination of soluble proteins in soybean was established under the optional condition. The method is simple
fast, high sensitivity and good reproducibility
Key words: Spectrophotometry; B-acetylcarboxyaz0 soybean protein
006年在上海召开的“中国大豆食品产业圆桌峰
白质测定的光谱分析方法有直接紫外光谱法
会议”提出了发展中国大豆产业,实施“双蛋自(大豆+分光光度法、荧光光度法、共振瑞利散射光谱法等。其
牛奶)工程”振兴计划",人们对大豆蛋白的研究与开中分光光度法具有操作简便、成本低、灵敏度高、重现
发倍加重视。大豆足最丰富、最优质的植物蛋白资源,性好等优点的。研究发现,在pH2.90的 Britton- Robinson
其水溶性蛋白质可以被人体直接吸收利用,因此对大缓冲介质中,紫红色的有机试剂对乙酰基偶氮羧能与
豆水溶性蛋白的研究及测定具有重要意义2列。
蛋白质形成蓝色复合物,Amax669m,该波长下的表
国内对大豆水溶性蛋白质的测定主要采用经典观摩尔吸光系数为3.09x10°L/( moll. cm),蛋白质在
的凯氏定氮法,此法操作繁杂,而且测定的是样品中10pg/mL.~100pg/mI(BSA)范园内遵循比尔定律、以
的含氮量,除了蛋自质组成中的氮外,还包括非蛋自此建立的蛋自质测定新方法,线性范围宽,灵敏度高。
质组成中的其他有机或无机态氮。如何科学准确地用于大豆水溶性蛋自的测定,操作简便,重现性好,基
测定蛋白质含量,足现代食品检测研究中最活跃的领本无十扰,取得满意结果。
或之一,也是解决食品安全方面所面临的重要问题。
1材料与方法
基金项目:河南省科技厅科技攻关重点项日(102102110154);河南省
教育厅自然科学研究计划项目(2011A150020):河南省教育厅自然
1.1仪器与试剂
科学研究计划项目(2010B180020)
UV-3010型紫外可见分光光度计:日本口立公司;
作者简介:冯愛青(1979-),女(汉),讲师,敌十、主要研究方向为生PHS-3C精密pH计:上海雷磁仪器厂;722型光栅分光
物分析
光度计:上海欣茂仪器有限公司:10mL.貝塞比色管。