菌落总数测食品卫生微生物学检验菌落总数测定(1).pdf

ICS07,100.30
中华人民共和国国家标祖准
GB/T4789.2-2003
代替GB/T4789.2
食品卫生微生物学检验
菌落总数测定
Microbiological examination of food hygiene
Detection of aerobic bacterial count
2003-08-11发布
2004-01-01实施
串命麓犯晏绩寳发布
GB/T4789.2-2003
本标准对GB/T4789.2-1994《食品卫生微生物学检验菌落总数测定》进行修订。
本标准与GB/T4789.2-1994相比主要修改如下
一按照GB/T1.1-2000对标准文本格式和文字进行修改。
修改并规范原标准中的“设备和材料”。
将菌落总数的表示单位修改为:cfu/g(mI)
本标准自实施之日起,GB/T4789.2-1994同时废止
木标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。
本标准起革单位:中国疾病预防控制中心营养与食品安全所。
本标准主要起草人:刘宏道、计融、付萍、杨宝兰、姚景会。
本标准于1984年首次发布,1994年第一次修订,本次为第二次修订。
GB/T4789.2--2003
食品卫生微生物学检验
菌落总数测定
1范围
本标准规定了食品中菌落总数的测定方法。
本标准适用于各类食品中菌落总數的河定
2规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有
的修改单(不包括物误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根掘本标准达成协议的各方研究
是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准
GB/T4789.28-2003食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂
3术语和定文
下列术语和定义适用于本标准。
菌落总數 aerobic bacterial count
食品检样经过处理,在一定条件下培养后(如培基成分、培养温度和时间、pH、需氧性质等),所得
1mL(g)检样中所含菌落的总数。本方法规定的培养条件下所得结果,只包括一群在营养琼脂上生长
发育的嗜中温性需氧的菌落总数
菌落总数主要作为判定食品被污染程度的标志,也可以应用这一方法观察绷菌在食品中繁殖的动
,以便对被检样品进行卫生学评价时提供依据
4设备和材料
冰箱:0"℃
4.2恒温培养籍:36℃士1℃。
4.3恒温水浴锅:46℃士1℃
4.4均质器或灭菌乳钵。
4.5架盘药物天平:0g~500g,精确至0.5g
4.6菌落计数器。
4.7放大镜4X。
4.8灭菌吸管:1mL(具0.0lmL刻度)、10mL(具0.1mL刻度)
4.9灭菌锥形瓶:500mnL。
4.10灭菌玻璃珠;直径约5mmn
4.11灭菌培养皿:直径90mm
4.12灭菌试管:16mmX160mm
4.13灭菌刀、剪子、镊子等。
5培养基和试剂
5.1营养琼脂培养基:按GB/T4789.28-2003中4.7规定。
GB/T4789.2-2003
5.2磷酸盐缓冲液:按GB/T4789.28-2003中3.22规定。
5.30.85%灭菌生理盐水
5.475%乙醇
6捡验程序
菌落总数的检验程序见图1。
检样
做成几个适当倍数的稀率液
选择2个~3个透宜稀旱度
各取1mL分别加入灭爾培养皿内
每皿内加入量营养琼脂
36℃士U℃148k土2h
落计数
报
图
操作步骤
7、1检样稀釋及培养
7.1.1以无菌操作将检样25g(m)剪碎放于含有225mL灭菌生理盐水或其他稀释液灭菌玻璃瓶内
瓶内预置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳缽内,经充分振摇或研磨成110的均匀稀释液。
固体检样在加入稀释液后,最好置均质器中以8000r/min~10000r/min的速度处理1min,做成
1:10的均匀稀释液
7.1.2用1mL灭蓝吸管吸取1:10稀释液1mL,沿管壁徐徐注人含有9mL灭菌生理盐水或其他稀
释液的试管内(注意吸管尖端不要触及管内稀释液),振摇试管,混合均匀,做成1:100的稀释液。
7.1.3另取1mLル灭菌吸管,按上条操作方法,做10倍递增稀释,如此每递增稀释一次,即换用1支
1mL灭菌吸管。
7.1.4根据食品卫生标准要求或对标本污染情况的估计,选择2个~3个适宜稀释度,分别在做10倍
递增稀释的同时,即以吸取该桮释度的吸管移1mL稀释液于灭菌培养皿内,每个稀释度做两个培
养皿
7.1.5稀释液移人培养皿后,应及时将凉至46℃营养琼脂培养基(可放置于46℃土1℃水浴保温)注入
培养皿约15mL,并转动培养皿使混合均匀。同时将营养琼脂培养基倾人加有1mL稀释液灭茵培养
皿内作空白对照。
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