GBT5009.139-2003 饮料中咖啡因的测定.pdf

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ICS67.040
C53
中华人民共和国国家标准
GB/T5009.139~-2003
代替GB/T16344-1996
饮料中咖啡因的测定
Determination of caffeine in beverages
2003-08-11发布
2004-01-01实施
中华人民共和卫售贇发布
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GB/T5009.139-~2003
前言
本标准代替GB/T16344-1996《饮料中咖啡因的测定方法》。
本标准与GB/T16344-1996相比主要修改如下:
按GB/T20001,4-2001《标准编写规则第4部分:化学分析方法》对原标准的结构进行
了修改
一修改了标准的中文名称,标准中文名称改为《饮料中咖啡因的测定
本标准由中华人民共和国卫生部提出并期口
本标准起草单位:上海市食品卫生监督检验所、上海卫生检疫局。
本标准第一法主要起草人:何倩琼、郑理、方有宗、李绍良。
本标准第二法主要起草人:李绍良、庄慎謙、毛显林、何情琼。
原标准于1996年首次发布,本次为第一次修订。
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GB/T5009.139-~-2003
引言
咖啡因( caffeine)又名咖啡碱,属甲基黄嘌呤化合物,化学名称为1,3,7-三甲基黄嘌呤,具有提神醒
脑等刺激中枢神经作用,但易上瘾。为此,各国制定了咖啡因在饮料中的食品卫生标准,美国、加拿大
阿根廷、日本、非律宾规定饮料中咖啡因的含量不得超过200mg/L,南斯拉夫规定不得超过120mg/L,
我国到目前为止咖啡因仅允许加入到可乐型饮料其含量不得超过150mg/kg,为了加强食品卫生监督
管理,建立咖啡因的标准测定方法十分必要。
紫外分光光度法和高效液相色谱法( FPLC)是可乐型饮料、咖啡和茶叶以及制成品中咖啡因含量
的测定方法。简单、快速、准确。
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GB/T5009.139-2003
饮料中咖啡因的测定
1范顾
本标准规定了可乐型饮料、咖啡、茶叶及其制成品中咖啡因含量的测定方法紫外分光光度法和高
效液相色谱法(HPLC)。
本标准适用于可乐型饮料、咖啡、茶叶及其制成品中咖啡因的测定
本标准紫外法检出限:可乐型饮料为3mg/L;如啡、茶叶及其固体制品为5mg/100g;对咖啡和茶
叶的液体制品为5mg/L。
本标准HPLC法检出限:可乐型饮料为0.72mg/L;茶叶、咖啡及其制品为1.8mg/100g。
第一法紫外分光光谱法
2原理
咖啡因的三氯甲烷溶液在276.5nm波长下有最大吸收,其吸收值的大小与咖啡因浓度成正比,从
而可进行定量
3试剂
3.1无水硫酸钠。
3.2三氯甲烷使用前重新蒸馏。
3.315g/L髙锰酸钾溶液:称取1.5g高锰酸钾,用水溶解并稀释至100mL
3.4亚硫酸钠和硫氰酸钾混合溶液:称取10g无水亚硫酸钠(Na2SO2),用水溶解并稀释至100ml
另取10g硫氧酸钾,用水溶解并稀释至100mL,然后二者均匀混合。
3.515%磷酸溶液:吸取15mL磷酸置于100mL容量瓶中,用水稀释至刻度,混匀
3.6200g/L氢氧化钠溶液:称取20g氢氧化钠,用水溶解,冷却后稀释至100ml
3.7200g/L醋酸锌溶液:称取20g醋酸锌[Zn(CH3COO)2?2H2O加入3mL冰乙酸,加水溶解并
稀释至100mL。
3.8100g/L亚铁氯化钾溶液:称取10g亚铁氯化钾[K4Fe(CN)s?3H2(O]用水溶解并稀释至
100mL
3.9咖啡因标准品:含量98.0%以上。
0咖啡因标准储备液:根据咖啡因标准品的含量用重蒸三氯甲烷配制成每毫升相当于0.5mg咖
啡因的溶液,置于冰箱中保存
4仪器
紫外分光光度计。
5分析步聚
5.1试样的处理
5.1.1可乐型饮料:在250mL的分液漏斗中,准确移入10.0mL~20.0mL经超声脱气后的均匀可
乐型饮料试样,加入5mL15g/L高锰酸钾溶液,摇匀,静置5min,加人混合溶液10mL,摇匀,加入
50mL重蒸三氯甲烷。振摇100次,静止分层,收集三氯甲烷。水层再加入40mL重蒸三氯甲烷,振摇
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GB/T5009.139~-2003
100次,静置分层。合并二次三氯甲烷萃取液,并用重蒸三氯甲烷定容至100mL,摇匀,备用
5.1.2咖啡、茶叶及其固体试样:在100m[烧杯中称取经粉碎成低于30目的均匀试样0.5g~2.0g,
加入80mL沸水,加盖,摇匀,浸泡2h,然后将浸出液全部移入100mL容量瓶中,加入2mL200g/L
醋酸锌溶液,加入2mL100g/L亚铁氯化钾溶液,摇匀,用水定容至100mL,摇匀,静置沉淀,过滤。取
滤液5.0mL~20.0mL按5.1.1操作进行,制备成100mL三氯甲烷溶液,备用
5.1.3咖啡或茶叶的液体试样:在100mL容量瓶中准确移人10.0mL~20.0mL均匀试样,加人
2mL.200g/L醋酸锌溶液,摇匀,加入2mL100g/L亚铁氯化钾溶液,摇匀,用水定容至100mL,摇
匀,静置沉淀,过滤。取滤液5.0mL~20.0mL按5.1.1操作进行,制备成100mL三氯甲烷溶液,
备用
5.2标准曲线的绘制
从0.5mg/mL的咖啡因标准储备液中,用重蒸三氯甲烷配制成浓度分别为0、5、10、15、20g/mL
的标准系列,以0g/mL作参比管,调节零点,用1cm比色杯于276.5nm下测量吸光度,作吸光度-咖
啡因浓度的标准曲线或求出直线回归方程。
5.3測定
在25mL具塞试管中,加入5g无水硫酸钠,倒入20mL试样的三氯甲烷制备液,摇匀,静置。将
澄清的三氯甲烷用1cm比色杯于276.5nm测出其吸光度,根据标准曲线(直线回归方程)求出样品的
吸光度相当于咖啡因的浓度c(gg/mL)。同时用重蒸三氯甲烷作试剂空白。
6结果计算
按下列公式计算
(c-co)×100
メ1000
自d自?●●甲导甲
X2
)×100×100X100
V1×m×1000
……………(2)
x(c-co)×100×100×1000
1×V×1000
式中
X1一可乐型饮料中咖啡因含量,单位为毫克每升(mg/L);
X2一咖啡、茶叶及其固体试样中咖啡因含量,单位为毫克/每百克(mg/100g);
X3-一-咖啡、茶叶及其液体制成品中咖啡因含量,单位为毫克每升(mg/L);
c一一试样吸光度相当于咖啡因浓度,单位为微克每毫升(Kg/mL)
c。一试剂空白吸光度相当于咖啡因浓度,单位为微克每毫升(pg/mL)
m2一称取试样的质量,单位为克(g);
Vー一移取试样的体积,单位为毫升(mL);
V1移取试样处理后水溶液的体积,单位为毫升(mL)
7精密度
可乐型饮料:在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的5%;咖
啡、茶叶及其