DB34T 816-2008 饲料中沙门氏菌的测定 免疫色谱反应法.pdf

备案号
1DB34
安徽省地方标准
DB34/T816-2008
饲料中沙门氏菌的測定
免疫色谱反应法
2008-08-01发布
2008-08-01实施
安省质量技术监督局发布
DB34/T816-2008
本标准由安徴省畜牧兽医局提出。
本标准由安微省质量技术监督局批准。
本标准由安省农业标准化技术委员会归口
本标准起草单位:安徽省兽药饲料监察所。
本标准主要起草人:刘红云、张莉、丁在亮、陶小平
本标准自2008年8月1日首次发布
DB34/T816-2008
饲料中沙门氏菌的测定
免疫色谱反应法
1范围
本标准规定了用免疫色谱法对饲料中沙门氏菌的测定。
本标准适用于配合饲料、単一饲料中沙门氏菌的测定,检出限为25g饲料中1个沙门氏南。
2规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的
修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究
是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。
GB/T6682-1992分析实验室川水规格和试验方法
B/T14699.1-1993饲料采样方法
原理
沙门氏菌特异性抗体是快速定性检测的基础,沙门氏菌检测卡/条是专门用米检测饲料中沙门氏菌
抗原,经过増菌和选择性増菌的的阳性样品会与沙门氏菌检测測卡/条上:染色剂标记的抗体结合形成抗原
抗体复合物,其沿着膜移动,在沙门氏菌检测卡/条上被固定的抗体将使复合物着色,在样品区(S区)
形成一条色带,以判定试验结果,内置质控色带(C区)用于确认进行的实验是否正确
材料与设备
4.1小型粉碎机。
2电子大平(0.01g)。
4.3尤菌试管或尢菌袋
4.4沙门氏菌检测卡或检测条。
4.5沙『」氏陌増培养基(BP)
4.6沙『」氏菌选择性增菌培养基(RV)。
4.7细培养箱。
4.8迢纯水器。
4.9200L的移液器。
4.10200儿的吸头。
4.11高压灭菌锅。
4.12水浴钻。
13量筒,1000ml。
5试样的制备
按GB/T14699.11993饲料采样方法采样,逃取有代表性的饲料样品,至少500g,四分法缩减至
200g,粉碎,使全部通过40日筛,在密闭瓶中4℃保存。器具要经过消毒。
6操作步骤
DB34/T816-2008
6.1使用之前所有检测卡/条自然回川到室温(15C~30℃
6.2沙门氏菌増菌培养基(BP)的制备:称取20g缓冲蛋白胨水于L蒸馏水中,加热煮沸至完全溶解,
定量分装,在121℃15min高压灭菌。
6.3沙门氏菌选择性增菌培养基(RV)的制备:称取20g亚硇酸盐胱氨酸丁1L灭菌水中,加热煮沸全
完全溶解,定量分装。该培养基在配制当日使月。
6.4样品与沙门氏菌增菌培养基(BP)按1:10比例混合,例如,10g饲料样品加入9 OMLBP。
6.5混合物(样品/BP)在36℃士1℃培养16h~2h。培养过程中无菌瓶或无菌袋的瓶口或袋口不要封
死
6.6加入与BP体积相同并且预先加温至36℃士1℃的沙」氏菌选择性增菌培养基(RV)至上述培养混
合物中,在36℃土1℃培养16h~24h。培养过程中无菌瓶或尤菌袋的瓶口或袋口不要时死。
6.7移取经过增菌和选择性增菌的培养混合物150則在每一个检测卡或检测条的样品孔中。
7结果
实验结果须需在10minr~15min内进行,最退不能超过30min;低阻性结某延退15min,某些阻性结果
30s就可显现结果,这主要取决于样品中抗原的浓度。
C区不出现色带,判为结果无效
C区与S区同时出现色带,判为结果阳性。色带と间可以有深浅差异。如果色带出现在30min之后,
判为结果无效。
C区出现色带,S区不出现色带,判为阴性。