GB 5009.5-2010 食品中蛋白质的测定 含修改单.pdf

CE
中华人民共和国国家标准
GB5009.52010
食品安全国家标准
食品中蛋白质的測定
National food safety standard
Determination of protein in foods
2010-03-26发布
2010-06-01实施
中华人民共和国卫生部发布
GB5009.5-2010
本标准代榃GB/T5009.5-2003《食品中蛋白质的测定》、GB/T14771-1993《食品中蛋白质的测定方
法》和GB/T5413.1-1997《婴幼儿配方食品和乳粉蛋白质的测定
本标准与GB/T5009.5-2003相比主要修改如下:
一在第一法中增加了自动蛋白质测定仪的方法
增加了燃烧法,作为第三法
修改了换算系数;
对计算结果的有效数字规定进行了修改;
一一增加pH计对滴定终点的判定。
本标准所代替标准的历次版本发布情况为:
GB/T5009.5-1985、GB/T5009.5-2003
GB/T14771-1993。
GB5009.5-2010
食品安全国家标准
食品中蛋白质的测定
1范围
本标准规定了食品中蛋白质的测定方法。
本标准第一法和第二法适用于各种食品中蛋白质的测定,第三法适用于蛋白质含量在10g/100g以
的根食、ブ类、奶粉、米粉、蛋白质粉等固体试样的筛选测定。
本标准不适用于添加无机含氮物质、有机非蛋白质含氮物质的食品测定
第一法凯氏定氮法
2规范性引用性文件
本标准中引用的文件对于本标准的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仪所注日期的版本
适用于本标准。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本标准
3原理
食品中的蚩白质在催化加热条件下被分解,产生的氮与硫酸结合生成硫酸铵。碱化蒸馏使氨游离
用硼酸吸收后以硫酸或盐酸标准滴定溶液滴定,根据酸的消耗量乘以换算系数,即为蚩白质的含量。
4试剂和材料
除非另有规定,本方法中所用试剂均为分析纯,水为GB/TI6682规定的三级水
4.1硫酸铜(CuSO:5H2O)。
4.2硫酸钾(K2SO4)。
4.3硫酸(H2SO4密度为1.84gL)。
4.4硼酸(H3BO3)。
4.5甲基红指示剂( CISHIN3O2)。
4.6溴甲酚绿指示剂(C2IH14Br-OS)。
4.7亚甲基嗌指示剂(C6H1sCIN3S3H2O)
4.8氢氧化钠(NaOH)。
4.995%乙醇(C2HOH)。
4.10硼酸溶液(20gL):称取20g倗酸,加水溶解后并稀释至1000mL
GB5009.5-2010
4.11氢氧化钠溶液(4009L):称取40g氢氧化钠加水溶解后,放冷,并稀释全100mL。
4.12硫酸标准滴定溶洨(0.0500molL)或盐酸标准滴定溶液(0.0500molL)。
4.13甲基红乙醇溶液(1gL):称取0.1g甲基红,溶于95%乙醇,用95%乙醇稀释至100mL
4.14亚甲基监乙醇溶液(1gL):称取0.1g亚甲基监,溶丁95%乙醇,用95%乙醇稀释全100mI
15溴甲鼢绿乙醇溶液(1gL):称取0.1g溴甲绿,溶丁95%乙醇,用95%乙醇稀释全100mL。
4.16混合指示液:2份甲基红乙醇溶液(4.13)与1份亚甲基嗌乙醇溶液(4.14)临用时混合。也可用
1份甲基红乙醇溶液(4.13)与5份溴甲酚绿乙醇溶液(4.15)用时混合。
5仪器和设备
5.1天平:感量为1mg。
5.2定氮蒸馏装置:如图1所示
5.3自动凯氏定氮仪。
6分析步骤
6.1凯氏定氮法
6.1.1试样处理:称取充分混匀的固体试样0.2g~2g、半固体试样2g~5g或液体试样10g~25g
(约相当于30mg~40mg氮),精确至0.001g,移入干燥的100mL、250mL或500mL定氮瓶中,加
入0.2g硫酸铜(4.4)、6g硫酸钾(4.2)及20mL硫酸(4.3),轻摇后于瓶口放一小漏斗,将以45°
角斜支于有小孔的石棉网上。小心加热,待内容物全部炭化,泡沫完全停止后,加强火力,并保持瓶内
液体微沸,至液体呈隘绿色并潑清透明后,再继续加热0.5h~1h。取下放冷,小心加入20mL水。放
冷后,移入100mL容量瓶中,并用少量水洗定氮瓶,洗液并入容量瓶中,再加水至刻度,混匀备用。
同时攸试剂空白试驗
6.1.2测定:按图1装好定氮蒸馏装置,向水蒸气发生器内装水至2/3处,加入数粒玻璃珠,加甲基
红乙醇溶液(4.13)数滴及数毫川硫酸(4.3),以保持水呈酸性,加热煮沸水蒸气发生器内的水并保持
6.1.3向接收瓶内加入10.0mL硼酸溶液(4.10)及1滴~2滴混合指示液(4.16),并使冷凝管的下端
插入液面下,根据试样中氮含量,注确吸取2.0mL~10.0mL试样处理液由小坡杯注入反应室,以10mL
水洗涤小玻杯并使之流入反应室内,随后塞紧棒状玻塞。将10.0mL氢氧化钠溶液(4.11)倒入小玻杯
提起玻塞使其缓缓流入反应室,立即将玻塞盖紧,并加水于小玻杯以防漏气。夹紧螺旋夹,开始蒸馏。
蒸馏10min后移动蒸馏液接收瓶,液面离开冷凝管下端,再蒸馏1min。然后用少量水冲洗冷凝管下端
外部,取下蒸馏液接收瓶。以硫酸或盐酸标准滴定溶液(4.12)滴定不终点,其中2份甲基红乙醇溶液(4.13)
与1份亚甲基乙醇浴液(4.14指示剂,颜色山紫红色变成灰色,pH5.4;1份甲基红乙醇溶液(4.13
与5份溴甲酚绿乙醇溶液(4.45)指示剂,颜色山洲红色变成绿色,pH5.1。同时作试剂空白。