GB 7650-1987 谷物籽粒色氨酸测定法.pdf

中华人民共和国国家标准
UDC833.1543.06
谷物将粒色氨酸测定法
GB7850-87
Determination of tryptophan in cereal grains
近用范
本标准适用于测定谷物籽粒色氨酸含量
2原理
谷物蛋白质碱解后,降解成肽和游离的氨基酸。在酸性介质中,有硝酸盐存在条件下,色氨酸吲哚
环与对二甲胺基苯甲醛反应,生成蓝色化合物,在一定范围内颜色深浅与色氨酸含量成正比。
3仪、设备
3.1分析天平,感量0.1mg。
3.2实验室用粉碎机。
33721型分光光度计,或相当的仪器
3.4离心机,4000/nmin
3.5培养箱。
3.20ml具塞刻度玻璃试管(须校准)。
4试剂
除注明者外均为分析纯。水为蒸馏水。
4.1浓盐酸(GB62277),比重1.19。
4.210%盐酸溶液:22.7ml浓盐酸加水至10ml
4.35%对二甲胺基苯甲醛(HGB3486-62)溶波:5g对二甲胺基恭甲醛溶于10%盐酸中,并定容
100ml
4.41%硝酸钠(GB636一77)水溶液(m/)
注:4℃冰箱中保存,一周内使用有效。
4.510%氢氧化钾(GB2306一80)水浴液(m/)。
4.6L-色氨酸,层析纯。
4.7L色氮酸标准溶液:准确称25mgL色氨酸(105℃手燥2h),加少量0.1mol/L氢氧化钠(GB
629-81)使之溶解,定量地转移到250mH棕色容量瓶中,用水定容。浓度为100ug/ml。
注:4℃冰箱中保存,一个月内使用有效
5试样的选取与制各
5.1,选取具有代表性谷物将粒,挑拣干净,按四分法缔减取样,样量不得少于20g。将粒充分风干后
用粉碎机膠碎(带壳籽粒先脱壳),使95%以上通过0.25mm孔径筛。
5.2按GB2906-82(《谷类、油料作物种子粗脂眆测定法》脱脂并测定脂眆含量。脱脂样品风干后,
混匀,装入磨口瓶中备用。
中华人民共和国农牧渔业部1987-03-26批准
1987-11-15实施
GB7650-87
6校准曲线的绘制
吸色氨酸标准溶液0.2,0.3,0.4,0.5,0.6,0.7ml分别置于20ml具塞刻度玻璃试管中,加1ml
10%氢氧化钾溶液,播匀:加0.2ml5%对二甲胺基苯甲醛,摇匀;加0.2ml1%硝酸钠,摇匀;将试管置
于冰水中,再加5ml浓盐酸。取出试管,强烈振摇后放入25℃培养箱中显色75min(温度升到25℃时记
时),取出后用水稀释至刻度,摇匀。以试剂空白作对照在590nm波长处测读吸光度。以色氨酸含量
(g)为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制校准曲线。在温度较高的季节和地区,制定校准曲线时,参见附录
7测定步骤
7.1称样:称取40mg试样两份,准确至0,1mg,与此同时,另称样品,按GB3523一83《谷类、油料作
物种子水分测定法》测定水分含量
7.2水解:将试样置于20ml具塞刻度玻璃试管中,加1ml10%氢氧化钾,振摇,样晶全部湿润后,放
入40℃培养箱中水解16~18h。
7.3显色:从培养箱中取出试管冷至室温后加0.2ml5%对二甲胶基苯甲醛,摇匀;加0.2ml1%硝
酸钠,摇匀;将试管蛩于冰水中,再加5m]浓盐酸。取出试管,强烈振摇后置于40℃培养箱中显色45min
温度升到40℃时记时)。
7.4测定:取出试管冷至室温后,用水稀释至刻度,摇匀。以4000/mn离心10mlin。取上清液以试
剂空白作对照,在590nm波长处测读吸光度。
8结计算
8.1计算公式
色氨酸,%①(干基)=×10X100
式中
试样质量,mg
从校准曲线上查得的色氨酸含量
H一一试样水分百分率
8.2结暴的夜示
两个平行样品的测定结果用算术平均值表示,保留有效数字两位,第三位数按GB1.1-81《标准
化工作导则编写标准的一般规定》附录C规定取舍。
8.3允许
两个平行样品色氨酸测定值为0.10%以下时,相对差允许为8%:0.10%或0.10%以上时为5%
①为脱脂试样的色氨酸百分含量,换算成原样品的色氢酸含量应乘以系数(1一脂防%)。如脂肪含量为4%以下
时,に个结果在允许差之内。
3l8
G37650-87
附录A
(参考件
在温度较高的季节和地区,制定校准曲线时,L色氨酸标准溶液的显色条件可采用30℃60min,测
定结果与25℃75minー致。
附加说明t
本标准由中国农业科学院分析室负责起草
本标准主要起草人崔文。