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试验研史国食晶添加剂
黏度法测定原花青素聚合度
赵平,刘亚静,张月萍
(河北科技大学化学与制药工程学院,石家庄050018
摘要:原花青素是一大类天然多酚化合物的总称。具有很强的抗氧化活性和清除自由基的能力。原花
青素的生物活性与聚合度密切相关,为充分发挥原花青素生物活性,找到一种方便、准确、稳定测定聚合度
的方法具有重要的意义。本文讨论了黏度法测定原花青素聚合度,利用乌氏黏度计测定不同原花青素样品的
流出时间,得到各样品的特性貓度,结合Mak- Houwink方程,确定比例系数K和扩张因子,求得各样品
聚合度。分别利用黏度法和香草醛法对梯度洗脱得到的原花青素样品聚合度进行测定,证明黏度法测定原花
青素聚合度是可行的。
关键词:原花青素:聚合度黏度法:抗氧化活性
中图分类号:0657.91文献标识码
文章编号:1006-2513(2013)01-0149-04
Detecting the polymerization degree of proanthocyanidins
with viscosimetry
ZHAO Ping, LIU Ya-jing, ZHANG Yue Ding
College of Chemical &Pharmaceutical Engineering, Hebei University
of Seience and Technology, Shijiazhuang 050018)
Abstract Proanthocyanidin is a kind of polyphenol natural product with high activity of antioxidant and ability to scav-
nge free radical. II is of importance lo searh a convenient, accurate and stable method to detect the polymcrization e-
gree of proanthocyanidin, as its biological activity is closely related to the degree of polymerization. The viscosimetr
was researched to detect the polymerization degree of proanthocyanidins. The washout time of ifferent proanthoyani
dins was measured with Ubbelohde viseomcler lo gcl Their characteristic vise sily and the proporlional e efficient K an
the expansion factor a of Mark-houwink equation, so the degree of polymerization was obtained. The viscosimetry was
proved to be feasible comparing with vanillin method to detect the polymerization degree of proanthocyanidin received
Ihrough ethanol gradicnt elution
Key words. proanthocyanidins, degree of polymerization, viscosimetry,antioxidant activity
原花青素是自然界中广泛存在的一大类天然域越来越受到人们的青睐-。原花青素单体的
多酚化合物的总称,由不同数量的儿茶素和表儿活性低于二聚体,聚合体的活性随聚合度的増大
茶素单体及各自没食子酸酯聚合而成,其结构中而降低,所有聚合体中二聚体在抗氧化活性、抗
含有众多酚羟基基团,具有优良的抗氧化活性和动脉粥样硬化、抗肿瘤、抗炎症等方面体现出极
清除自由基的能力,在营养、保健、医药等领好的效果。目前对原花青素的研究主要以多
收稿日期:2012-07
作者简介:赵平(19%5-)男,教授,研究方向为化工分离及生物分离。
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13年第1期
21994-2015ChinaAcademicjournalelectronicPublishingHouseAllrightsreservedhttp://www.cnki.net
史国食區添加剂試验研
种聚合度混合物的形式进行,缺乏单一聚合度样2%)、60%浓度的乙醇溶液各2BV,以1BV
品的生物活性数据。找到一种方便、准确、稳定h'的流速对原花青素进行洗脱,得到各洗脱液
的方法测定原花青素聚合度,对于富集低聚体,经浓缩回收溶剂,真空冷冻干燥得到原花青素
并进一步研究其生物活性有重要意义。
样品
黏度法测定聚合度在石油、化工、纺织、国
(2)原花青素样品以乙醇为溶剂配制成适宜
防、医学等行业应用广泛,具有设备简单、操作浓度的原花青素溶液,利用传统香草醛法測定质
方便、实验精度较好等优势。如林春梅采用黏量浓度。在30℃水浴中恒温十分钟,乌氏黏
度法测定壳聚糖的黏均分子量,章守权等以聚度计测定流出时间1
乙二醇、水体系为例,对黏度法测定分子量数据
(3)相同条件测定纯乙醇溶剂的流出时间to
处理进行了改进。
(4)将(2)中的样品溶液分别稀释到初始
原花青素粗提液经AB-8大孔树脂柱吸附,浓度的2/3、1/2、1/3,测定流出时间2い4、4
不同浓度乙醇溶液梯度洗脱,冷冻干燥后得到聚
(5)以0~10%、22%~24%乙醇洗脱液对
合度分布较窄的原花青素样品。任鹏等在原应样品作为单体、二聚体,按1.2.2方法得到两
花青素分级分离实验中发现0~10%乙醇洗脱液个样品的特性黏度值,结合Mak- Houwink方
对应的原花青素样品多为单体,平均聚合度在1程计算k值与Q值
左右。任鹏和孙芸等的实验均显示22%
n =KM
24%乙醇浓度对应的样品抗氧化活性最强,根据
式中
特性黏度
原花青素平均聚合度与抗氧化活性的关系知对应
Kー一比例常数,mI.mg
样品多为二聚体。本文利用黏度法测定各原花青
扩张因子,与溶液中聚合物分子链的
素样品乙醇溶液的特性黏度,结合Mank-Hou
形态有关
wink方程与单体分子量,得到各样品平均分子量
Mm一貓均分子量
与聚合度。
(6)计算各原花青素样品聚合度
1.2.2数据处理
根据周从山、庄银凤等对黏度法测定
1材料与方法
分子量数据处理方法的研究,本文数据处理过程
1.1材料、试剂及仪器
如下
葡萄籽原花青素粗提液(葡萄籽于40%乙醇
恒温条件下,用同一只黏度计测定几种不同
溶液浸提得到),AB-8大孔树脂(天津市光复
浓度样品溶液和纯溶剂的流出时间。设定t和
精细化工有限公司),乙醇(天津市永大化学试分别为溶液和溶剂的流出时间,p和。分别为
剂有限公司,分析纯),实验用水为自制二级反者的密度。溶液的相对黏度n为:
渗透去离子水。
(4ーB/)
1835型乌氏黏度计(上海建强玻璃仪器有限
,=m/o=
P。(Ao-B
公司),752C型紫外可见分