神经降压素类似物的固相合成.pdf

第44卷第5期
应用化工
2015年5月
Applied Chemical Industry
May 2015
神经降压素类似物的固相合成
王小青,李松涛',官闻婧,尹志峰',王良友
(].承德医学院河北省中药研究与开发重点实验室,河北承德067000;2.承德天创生物制品有限公司,河北承德067000)
摘要:以 Wang Resin为载体,Fmo保护氨基酸为原料,经DIC/HOBT缩合,三氟乙酸(TFA)/间甲酚/乙二硫醇
(EDT)裂解体系脱除保护基,经PP-HPIC纯化后得到了纯度为98%以上的神经降压素类似物,总收率为39.99%。
关键词:神经降压素;类似物;多肽合成;纯化
中图分类号:TQ031.2;R914.5
文献标识码:A文章编号:1671-3206(2015)05-0855-03
Solid phase peptide synthesis of the neurotensin analogue
WANG Xiao-qing LI Song-tao, GONG Wen-jing, YIN Zhifeng, WANG Liang-you
(1. Hebei Key Iaboratory of Research and Development for Traditional Chinese Medicine, Chengde Medical College
Chengde 067000, China: 2. Chengde Tianchuang Biological Products Corporation, Chengde 067000, China)
Abstract: The neurotensin analogue was successfully synthesized according to its peptide sequence by
using Wang Resin as a solid supporter with Fmoc-amino acids as raw materials and HOBT/DIC as the
coupling reagent. The peptide was cleaved from the resin with trifluoroacetic acid(TFA)in the presence
of two additional scavengers m-cresol and EDT. The crude peptide of neurotensin analogue was purified by
RP-HPLC. The purity was more than 98% and the total yield was 39.99%
Key words: neurotensin; analogue; solid phase peptide synthesis; purification
神经降压素(NT)是1973年美国生理学家Car-合成策略,合成了神经降压素类似物( Neurotensin
away和 Leeman在分离牛的下丘脑P物质时,发 analogue,NTA),氨基酸序列pCu-Leu-Tyr-CHu-Asn
现的一种能使毛细血管通透性增加、皮下血管扩张 Lys-ser- Arg-arg-Pho-Tyr-e-Ieu,分子量163.1,并优
以及短暂降低动脉血压的物质。NT由13个氨基酸化了裂解条件,为进一步研究其降压活性提供物质
残基组成,氨基酸序列为pClu-Leu- Tyr-glu-Asn-Lys-基础。
Pro-Arg-Arg-Pro-Tyr- le-leu,具有广泛的生物学功1实验部分
能2。NT具有开发成为安定药、镇痛药和降压1.1试剂与仪器
药)的应用前景。同时,NT具有高活性、作用快速
Wang Resin(替代度为1.14mo/g),天津南开
等特点,能迅速降低人或动物的血压,在军用失能剂合成科技有限公司;Fmoc保护的氨基酸包括Fmoe
开发方面具有一定的潜力。
PRO-OH, Fmoc-arg(pbf)-oh, Emoc-leu-oh, Fmoc
NT游离羧基端是受体主要结合部位,决定其生Ser(tBu)-OH,Fmoc-Tyr(tBu)-OH,Fmoc-Asn(Tr)-
物活性。在血液循环和组织中,NT被作用于羧基端OH,Fmoe-Leu-OH,Fmoc-pCu-OH,Fmoc-l-OH均
的金属内切肽酶缓慢灭活,主要降解部位是Ag-购自成都滅诺新技术有限公司;缩合试剂1-羟基苯
Ag,Pro"-Tyr"及Po-A'三处肽键。NT作为并三氮唑(HOBt),N,N-二异丙基碳二亚胺(DC)由
军用失能剂开发,需作用迅速,持久,并且不易失活。苏州中科天马肽工程中心有限公司提供;醋酸酐、哌
本文设计将神经降压素的Po'替换成Ser2,可能会啶、三氟乙酸(TFA)、甲醇、二氯甲烷(DCM)、N,N-
避免被金属内切酶识别而失去活性,以Fmoc固相二甲基甲酰胺(DMF)、冰乙醚均为分析纯;乙腈,色
收稿日期:201501-16修改稿日期:201502-14
基金项目:河北省海外高层次人オ“百人计划”资助项目(E201200002);承德医学院博士基金项目(201303
作者简介:王小青(1984-),女,河北承德人,承德医学院硏究实习员,硕士,从事生物活性多肽药物的研发。电话:0314
2290474,E-mailwangxgsmart(@163.com
通讯联系人:王良友,男,副教授,从事生物活性多舦药物的研发。电话:0314-2290640,E-mail:liangyang@yahoo.com