GBT 13091-2002 饲料中沙门氏菌的检测方法.pdf

ICS07.100.30
中华人民共和国国家标准
GB/T130912002
代替GB/T13091-1991
饲料中沙门氏菌的检测方法
Determination of Salmonella in feeds
(ISO 6579: 1993, Microbiology-general guidance on
methods for the detection of Salmonella, MOD
2002-09-24发布
2003-03-01实施
中华人民共和国
国家质量嗌懵检验疫总局发布
050928075217
中华人民共和国
国家标准
饲料中沙门氏的检测方法
GB/T13091-2002
中国标准出版社出版
北京复兴门外三里河北街16号
邮政編码:100045
电话:6852394668517548
中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷
新华书店北京发行所发行各地新华书店经售
开本880X12301/16印张1宇数34千字
13年4月第一版2003年4月第一次印刷
印数1-1500
书号:155066?1-19203定价13.0元
网址www.bzcbs.com
科目634493

举报电话:(010)68533533
GB/T13091-2002
前
本标准代替GB/T13091-1991《饲料中沙!氏菌的检验方法》,因为国际上的发展原标准在技术
上已过时。
本标准修改采用ISO6579:1993《微生物学沙门氏菌检验异则》(英文版)。
本标准根据ISO6579:1993重新起草。除增加了资料性附录D、附录E外,本国家标准章条编号与
ISO6579:1993完全一样
考虑到我国国情,在采用IS)6579:1993时,本标准做了一些修政。有关技术性差异已编入正文中
并在它们所涉及的条款的页边空白处用垂直单线标识。在附录E给出了这些技术性差异及其原因的
覧表以供参考。
为便于使用,本标准还做了以下編辑性修改
a)“本国际标准”一词改为“本标准”;
b)用小数点“.”代替作为小数点的逗号“,”
c)删除国际标准的前言;
d)标准名称由“微生物学沙门氏菌检验导则”改为“饲料中沙门氏菌的检测方法”
本标准的附录A、附录B、附录C为规范性附录,附录D、附录E为资料性附录。
本标准由全国饲料工业标准化技术委员会提出。
本标准由全国饲料工业标准化技术委员会归口。
本标准起草单位:国家烔料质量监督检验中心〈北京)
本标准主要起草人:饶正华、李丽蓓,高生、杨曙明、苏晓鸥。
本标准所代替标准的历次版本发布情况为:GB/T13091-1991。
GB/T13091-2002
饲料中沙门氏菌的检测方法
警告:为保障实验室人员的健康,只有具备适当设备的实验室オ能承担沙门氏菌检验。应小心处理
所有培养材料的废弃物。
范围
本标准规定了沙门氏菌检验方法。
本标准适用于饲料中沙门氏菌的检验
2规范性引用文件
列文件中的条款通冠本标准的引用而成为本标准的条款凡是日期的引用文件,其随后所有的
修改单(不包括勘误的内》或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根本标准达成协议的各方研究是
否可使用这些文件的最版本。凡是不注日期的引用文件?其最新版本通于本标准
GB47891食略卫生微生物学检验总则
GB/T1469.料采样方
3术语和定义の
列术语和岸适用于本标准。
沙门氏菌 Salmonella
检验中,能在选性固体培养基中形成典型菌落,且生化和血清学鉴定与本标准中描述一致的微
生物
3.2
沙门氏菌的检验 detection of Salmonella
按本标准检验以論定沙门氏菌在某种产品中存在与否的过程
4原理
沙门氏菌的检测需要四个连的阶段(见附录A)。
注:样品中可能存在少量的氏函但却含有大量肠杆菌科的其他,因此,择性増菌是必须的;而且,为了检验
受伤的沙门氏菌,常须进行预增菌。
4.1用非选择性液体培养基预增
将试料接种到缓冲蛋白胨水,在36C土1℃下培养15h~20h。
4.2在选择性液体培养基上增菌
将4.1中的培养物接种到氯化镁-孔雀绿培养基和亚硒酸盐胱氨酸培养基中,
氯化镁一孔雀绿培养基在42C培养24h,业哂酸盐胱氨酸培养基在36C士1C培养24h或再延长
24h。
4.3划线及识别
将4.2的培养物接种到以下两个选择性培养基
应使用酚红煌绿琼脂培养基,除非国际标准对检样有规定或有特殊考虑(如分离乳糖阳性沙门
氏菌)
GB/T13091--2002
DHEL琼脂培养基(见5.2.4.2
在36C土1C培养,24h后检查,必要时培养至48h,根据菌落特性,辯别可疑菌落。
4.4鉴定
挑出4.3中的可疑沙门氏菌菌落,再次培养,用合适的生化和血清学试验进行鉴定。
5培养基、试剂和血清
5.1总则
做生物实验室的操作,按照GB4789.1进行。
5.2培养基和试剂
注:由于有大量的培养基和试剂可供选择,为明确起见,在附录B中规定了它们的成分和制备方法。
除非另有说明,在分析中仅使用确认为分析纯和蒸馏水或去离予水或相当纯度的水
1缓冲蛋白胨水(BP):见第B.1章。
2.2氯化镁-孔雀绿增菌液(RV):见第B.2章
2.3亚硒酸盐胱氨酸增菌液(SC):见第B.3章
5.2.4选择性刘线固体培养基:
a)酚红、煌绿琼脂:见第B.4章和附录C。
b)DHL琼脂:见第B.5章
5.2.5营养琼脂:见第B.6章。
2.6:糖铁琼脂(TSI):见第B.7章。
5.2.7尿素琼脂:见第B.8章。
5.2.8赖氨酸脱羧试验培养基:见第B.9章
2.9β半乳櫥苷酶试剂:见第B.12章
5.2.10V-P反应培养基(见第B.10章)
a)V-P培养基
b)肌酸浴液
萘酚乙醇溶液
d)氢氧化钾溶液
2.11靛基质反应培养基(见第B.11章
a)胰蛋白胨色氨酸培养基。
b)柯凡克试剂
2.12半固体营养琼脂:见第B.13章。
2.13盐水溶液:见第B.14章。
5.2.14沙门氏岗因子(),Vi,H型血清。
设备与材料
注3:可以用一次性使用的仪器代替可重复使用的伩器
6.1高压灭菌锅或灭菌箱。
6.2于热灭菌箱:37C土1C~55C士1C。
6.3培养箱:36C士1C。
42C土1C水浴或42C土0.5C培养箱。
水浴:45C土1℃C,55C土1C,70C士1C。
6.6水浴:36C士1C。
6.7接种环:铂铱或镍骼丝,直径约3mm。