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研究报告
中国酿造
2012年第31卷第6期
总第243期
产CLA嗜酸乳杆菌的筛选诱变与鉴定
李志刚,程爱华,张东杰,李志江
(器龙江八一农垦大学食品学院,黑龙江大庆163319)
摘要:从传统泡菜中选育高产共轭亚油酸( Conjugated Linoleic Acid,CLA)的菌株L28,利用人工诱变方法,以工L28为出发菌株,采
用紫外线、亚硝基胍(NTO)依次诱变及紫外、亚硝基胍复合诱变处理,经进一步液体发酵复筛获得多株突变薗株,CLA的最优产量为
95.1425gmL。其中L4突变株为CLA生成能力最高株。经16 S IDNA全序列分析法和生理生化试验确定茵株的种属,然后经过
Gene Bank基因比对确定同源基因,最后经鉴定为嗜酸乳杆涸( Lactobacillus acidophilus)
关鍵词:共轭亚油酸;嗜酸乳杆蘭;鉴定;诱变
中图分类号:TS201.3
文献标识码:A
文章编号:0254-5071(2012)06-0069-05
Screening, breeding and identification of conjugated linoleic acid-producing Lactobacillus acidophilus by mutation
LI Zhigang, ZHAI A]hua*, ZHANG Dongjie, LI Zhijiang
(College of Food, Heilongjiang Bayi Agricultural University, Daqing 163319, China)
bstract: Alactic acid bacterial strain, L28, having the ability to synthesize conjugated linoleic acid (CLA )was isolated from pickle juice samples
analysis and API system. The L28 as first strain was treated by ultaviolet and NTG to obtain several mutant strains, which obtain 95.1425 /m for
CA production. The strain was med A4 The ain A4 ouh physio ical and biochemical den ification combining and e ful-length 16
TDNA sequence analysis was Lactobacillus acidophilus
Key words: conjugated linoleic acid(CLA Lactobacillus acidophilus identification; mutation
共轭亚油酸( Conjugated Linoleic Acid,CLA)是必需脂无毒副作用等优点。因此利用微生物生产CLA已成为目前
肪酸亚油酸衍生物的共轭双烯的多种位置与空间异构体国内外学者的主要研究方向。
的总称。其中CLA的2种异构体cis9, transl-共轭亚油酸
目前,利用紫外分光光度法筛选CLA已经被很多国家
(c9,t1l-CLA)和 transl0,cis12-共轭亚油酸(t10,c12-CLA)学者所使用啊,实验从传统泡菜中利月CLA在波长232mm
具有重要的生理功能,如抗癌(结肠癌、胃癌、乳腺癌、前列234nm处有特征吸收峰的特点进行筛选有较高合成CLA能
腺癌)提高细胞免疫、降低体脂含量、预防糖尿病的发生力的乳酸菌菌株,然后对菌株进行紫外及亚硝基胍NTG)
以及抑制动脉粥样硬化等。目前工业上主要是采用化学诱变,目的为了得到一株CLA产量较高的菌株,最后进行
合成法生产CLA,如碱法异构化,使亚油酸(A)发生异构菌种的生理生化及16 SIDNA鉴定,确定菡株的具体名称。
化而生成CLA。但化学合成法存在较多缺点,如CLA产物1材料与方法
中异构体繁多、有毒成分残留、分离纯化工艺复杂、生产成1.1材料与试剂
本高等。许多微生物都能够利用自身的酶将LA转化成
材料:泡菜购自大庆市九区批发市场:MRS培养基
CLA。同化学合成法相比,利用微生物合成的CLA具有特南瓜将油(纯度≥90%);黑龙江八一农垦大学食品学院实
异性强,条件温和,产物中活性CLA异构体含量高,对人体验室。
收稿日期:2012-04-10
基金项目:黑龙江省教育厅科技攻关项目(115211980)
作者简介:李志刚(1986-),男,黑龙江牡丹江人,硕士研究生,研究方向为粮食油脂及植物蛋白工程;翟爱华帝,教授,通讯作者
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