高效液相色谱法测定含乳饮料中苯甲酸、山梨酸钾、水杨酸.pdf

化学世界
2012年
高效液相色谱法测定含乳饮料中苯甲酸、山梨酸钾、水杨酸
田玉平,舒晓莲。顾玲玲,陈度
上海市计量测试技术研究院,上海201203)
摘要:建立了含乳饮料中苯甲酸、山梨酸钾等添加剂的高效液相色语仪同时检测的方法。含乳饮
料经前处理后,由Cg反相色语柱进行分离,流动相A:唪酸盐缓冲溶液(1,25gK2HPO与1.25g
KH2PO4加水定容至500mL),流効相B:乙,流动相A、B按9:1比例洗脱,流速0,6mL/min,进
样量为10L。甲酸检测波长为225nm,山梨酸钾的检测波长为240nm,水杨酸的检测波长为
225nm。该方法线性范国为0.6~30pg/mL,检测限为0.06pg/ml-
关键词:含乳饮料;苯甲酸;山梨酸;水杨酸;高效液相色语法
中分类?:R155.5
文献标志码:A
文章编号:0367-6358(2012)01-0024-03
Determination of Benzoic Acid, Potassium Sorbate, Salicylic
Acid in Milk Beverage by HPLC-DAD
TIAN Yu-ping, SHU Xiao-lian, GU Ling-ling, CHEN Ying
(Shanghai Institute of Measurement and Testing Technology, Shanghai, 201203, China)
Abstract: A HPLC method for the determination of benzoic acid, potassium sorbate, salicylic acid in milk
beverage was established and reported. The sample was extracted and the components were separated on a
Cs reversed phase column eluated with a mobile shase of Acn/water(l 25 g K2HPO, and 1.25 g KH2PO
dissolved in 500 ml water), and detected by the DAD detector Linearity of the calibration curve was in the
range of 0. 630.0 ug/ML, and the detection limit was 0. 6 u/ML. The method was already applied to
real sample analysis
Key words: milk beverage; benzoic acid; potassium sorbate; salicylic acid; HPLC
根据GB/T21732-2008定义含乳饮料为以乳滥用食品添加剂的行为,保障消费者健康,卫生部陆
或乳制品为原料,加入水及适量辅料经配制或发酵续发布了五批《食品中可能违法添加的非食用物质
而成的含乳制品,分为配制型、发酵型、乳酸菌饮料和易滥用的食品添加剂名单》,苯甲酸、山梨酸钾等
种。苯甲酸、山梨酸钾等是允许使用的食品防腐在易被滥用的物质名单之列,国家相关部门也加强
剂,在一定限量范围内食用对人体没有危害,然而由了该类物质的检测工作。
于一些生产厂商为了使各种食品的保质期限更长,
本工作建立了高效液相色谱法测定含乳饮料中
添加过量的该类防腐剂,给人体的健康带来了危苯甲酸、山梨酸钾、水杨酸的方法,通过设置二极管
害
阵列紫外检测器扫描时间事件,保证各化合物在流
自2008年三聚胺事件以后,为进一步打击在出色谱柱被紫外检测器检测时为其最大吸收波长检
食品生产、流通、餐饮服务中违法添加非食用物质和测,从而提高方法灵敏度。
收稿日:2011-06-21;回日期:201201-05
基金項目:上海市科学技术委员会资助(0914200901,10142201000
作者简介:田玉平(1979~),女,江苏,主要研究色谱-质谱联用技术,Tel:021-3839800*35106;E-mai:tianyu(@sina.com,cn
第1期
化学世界
试验部分
benzoic acid
主要仪器与试剂
KQ3200DE超声波萃取仪; Sigmal221离心机;
Organomation Associates,JacN-EVAP24氮吹仪;
60
Agilent1100高效液相色谱仪,带有二极管阵列紫外
0
检测器。
20260300340380
苯甲酸、山梨酸钾、水杨酸标准品(纯度
potassium sorbate
99%);标准储备溶液:分别称取一定量的苯甲酸、山
梨酸、水杨酸标准物质于容量瓶中,甲醇溶解,使其
150
浓度为300g/mL,作为储备液;甲醇、乙腈为色谱
100
纯;纯水(18.2M2cm);其余所用试剂为分析纯
0
1.2仪器工作条件
220260300340380
入/mm
ZORBAX Eclipse XIDB-C18色谱柱(4.6mm×150
mm×5am);流动相A:磷酸盐冲溶液(1,25g
salicylic acid
K2HPO与1.25gKH2PO4加水定容至500mL),流
动相B:乙腈,流动相A、B按9:1的比例洗脱。流速
200
为0.6mlL/mim进样体积10L;检测波长苯甲酸为
225mnm,山梨酸钾为240nm,水杨酸为225nm。
3n02
260300340380
1.3试验方法
称取含乳饮料样品1.000g于10mL带刻度的
图1400~600imn紫外扫描谱图
离心管中,加t人5mL提取试剂(甲醇?水=3:1(V
表1DAD扫描时间
:Vの),加入1mL乙酸铅(2g/mL),超声波仪以功
率40kHz超声波萃取15min后,静置10min,继续
时间/min
扫描波长/nm
加入提取试剂3mL超声提取10min,冷却至室温,
240
用提取液定容至刻度,以4000r/min离心15min,
准确移取上层溶液5.00mL,氮吹仪吹至近干,加人
甲醇1.00mL,涡旋2minn使样品完全溶解,经
0.45pm针式过滤器过滤,按仪器工作条件测定
表2测定回归方程及相关系数
2结果与讨论
化合物线性回归方程相关系数线性范围/pg“mL
2.1检测波长的选择
苯甲酸
43.60x-3,180.99992
仪器工作条什在190~400nm波长的范围进山梨敵钾y=4の2x-4.230.9096300
行扫描,对萃甲酸、山梨酸钾、水杨酸进行检测,见图
水杨酸y=140.12x+23.610.9971
1,综合考虑各化合物的最大吸收波长及避免流动相2.3方法的检出限
的干扰,选择225nm为苯甲酸、水杨酸的检测波
按试验方法对空白样品加标进行测定,以3倍
长,240nm为山梨酸钾的检测波长。
的信噪比为方法检出限,苯甲酸、山梨酸钾、水杨酸
由上确定的检测波长,根据各化合物在流动相的检出限为0.06gg/mLe