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第37卷第4期
化工技术与开发
Vol37 No4
2008年4月
Technology Development of Chemical Industry
Apr.2008
山豆根中苦参碱不同提取方法的对比研究
梁燕明,郭伟
(广西卫生管理干部学院,广西南宁530021)
摘要;采用渗漉法、温浸法2种传统方法和OO2超临界萃取法分别提取山豆根中苦参减,运用高效液相色谱
法,以苦参碱为标准品,测定各提取物中苦参碱的含量,考察了传统方法与超临界OO2萃取方法从山豆根中提取生
物碱的工艺的优劣,从而确定从山豆根中提取苦参破的最佳方法。结果表明,用超临界萃取方法苯取的苦参减含
量比渗漉法高出0.072%,比温浸法高出0.105%,可看出,超临界萃取方法萃取的苦参破的含量要高于传统方法。
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关键词:超临界萃取;高效液相色谱法;山豆根;苦参碱
中图分类号R284.2
文献标识码:A
文章编号:1671-9905(2008)04001703
山豆根为豆科植物越南槐的根茎,主产广西,野中国药品生物制品检定所提供)乙脂(色谱纯)、磷电
生,具有豆腥气,味极苦,具有清热解毒,祛风止痛,酸二氢钠(分析纯),所有实验用水为纯净水。
子
消肿利咽的功效。其药理作用的主要基础物质为各
种生物碱,包括苦参破、氧化苦参碱、安那吉碱和甲2实验方法
吊
基金雀花碱。研究发现苦参碱类生物碱在中枢神经2.1传统方法从山豆根中提取苦参碱
秤
系统,心血管系统,抗病毒,抗炎,免疫及抗肿瘤等方
传统提取生物破的方法有许多,本实验主要以「电
面有重要的药理活性和应用前途1。
稀盐酸为溶媒,采用渗擁法和温浸法从山豆根中提子
超临界萃取技术( Supercritical Fluid Extraition,取生物碱。
简称SFE)是20世纪60年代兴起的一种新型分离2.1.1渗漉法从山豆根中提取苦参碱
汽
技术,是利用超临界流体具有特异增加的溶解能力
步骤:闷润→封底→装筒→封顶→加液→浸渍
车
而发展出来的化工分离新方法2。山豆根的主要→渗漉
衡
成分为生物碱,高效液相色谱法(HPLC)在生物碱
方法:取山豆根药粉(0.042m3g,置于大「各
分析中广泛应用。
嫙杯中,加人适量(约4mL)0.4%的盐酸水溶液,种
本文分别采用Cの超临界萃取法与传統提取润均匀,5-30m取脱格ー小片,小专
方法提取山豆根中苦参碱,运用 HPLC测定各萃取量0.4%盐酸水溶液润湿,轻轻墊在滲漉筒底部,铺
物中苦参碱的含量,从而确定从山豆根中萃取苦参平。然后将闷润后的药粉分多次装筒,并注意压匀
用
碱的最佳方法。
压平压些)上盒边纸加破球打开参秤
1实验材料
筒下口开关后,加人溶媒(0.4%盐酸)。待有流出液
时关闭开关。将流出液倒回筒内。继续加入溶,「网电
址话
1.1实验器材
当溶媒加到高出药面4~5cm处,加盖放置24bho
9FZ14粉碎机,GM32-1型超临界O2萃取实以5 ml'min'的流速渗漉。收集到10倍量的溶液写
验装置,电热恒温干燥箱,万分之一电子天平;时,压渣取液合并。循环水真空泵抽滤。在恒温80
DOX高效液相色谱仪(包括P68泵,AS100し的水浴锅内加热蒸发。浓缩干燥,制成干浸膏,
自动进样器,UⅣVD340U检测器,柱温控制系统);渗膏得率为6.8%。其工艺流程图如图1所示。
漉筒、大烧杯、抽滤瓶、布氏漏斗、容量瓶等。
2.1.2温浸法从山豆根中提取苦参碱
1.2药品与试剂
取山豆根药材粗粉50g,加入8倍量的0.4%に:o
使用的山豆根及实验中使用的试剂均为市售。的盐酸水溶液。放置30min后,于60℃的恒温水に
0
95%乙醇(分析纯)、37%的盐酸、苦参碱( Matrine,浴锅内加热提取4h。过滤后,再加入6倍量的
收稿日期:2007-09-10
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化工技术与开发
第37卷
0.4%的盐酸,于60℃的恒温水浴锅内加热提取4燥,制成千浸膏,于膏得率为5.7%。
h。合并提取液。加热浓缩,干燥,制成干浸膏,干膏
表1起临界OO2萃取条件
得率为7.0%。提取工艺如图2所示。
样品序号度歴力萃取时间。夹带荆流遠
mml.min-1
山豆根粗粉
约40mL的0.4%盐酸
闷润15~30min
药材粗粉
平铺于铺有脱脂棉的渗漉锜中
12345
50
1.5
上盖滤纸,压上小石子。加入适当溶媒
12
静置24h,滲漉
2.3HPLC法测定苦参碱的含量
滲漉液
药渣
恒温水浴锅蒸去水
2.3.1色谱条件
色谱柱为迪马公司ODSC18柱,150L×4.6,
湿浸膏
流动相为乙猜-0.05mol·L-1磷酸二氢钠(85:15);
电热恒温干燥箱中干燥
检测波长210nm;流速为1.0mL?min-1
干浸
2.3.2标准曲线的制备
图1漉法从山豆根中提取苦参碱
精密称取苦参碱的标准品10mg于10mL的
容量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,配成
山豆根粗粉50
8倍量0.4%盐酸静置30min
1000g·mL'的溶液,经0.45m的微孔滤膜滤
过,分别进样10、52.5、1、0.5mL,按上述色谱条件
浸渍后粗粉
60C恒温水浴锅提取4h,过滤
测定,以峰面积对浓度(g'mL-1)进行回归,得回归
方程为Y=0.6169X+5.3937,R2=0.9995。苦参
碱浓度范围为5.0~1000gmL-1时,峰面积与苦
滤液
药渣
参碱的浓度呈良好的线性关系。
6倍量0.4%盐酸
恒温提取4h,过滤
2.3.3样品溶液的制备
分别精密称取渗漉法、温浸法和超临界萃取法
所得浸膏各约0.15g,用氨水调纯净的甲醇pH=9
滤液
药渣
左右,分别用该碱性的甲醇溶解浸膏,超声振荡提取
合并滤液
30min(加入甲醇的体积不大于10mL)。将该溶液
合并后滤液
置于离心管中,高速离心机离心25min。取上清
↓恒温水浴锅蒸去水
液,加入pH=9左右的甲醇溶液,定容于10mL的
湿浸膏
容量瓶中,得样品溶液,并对样品进行稳定性实验、
电热恒温干燥箱中干燥
精密度实验、重现性实验、加样回收率实验,均符合
千浸膏
要求。
图2温浸法从山豆根中提取苦参碱
3结果与讨论
2.2超临界OO2萃取山豆根中苦参碱
取山豆根粗粉(0.042mm)50g,置入萃取罐
1样品的测定结果
水浴加热,挥去乙醇浓缩,置电热恒温干燥箱中干进样10L,取平均值,测定结果如表新示学
中,分别在表1所示的条件下萃取。达到萃取时间
按2.3.3项制备的各样品溶液(同一条件下
后,打开阅门,收集萃取物。在8℃的恒温条件下行3个样品)经滤过后在上述色谱条件下进样,每次