GB 1886.257-2016 食品安全国家标准 食品添加剂 溶菌酶.pdf
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- GB 1886.257-2016 食品安全国家标准 食品添加剂 溶菌酶 1886.257 2016 食品安全 国家标准
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中华人民共和国国家标准
GB1886.257-2016
食品安全国家标准
食品添加剂溶菌酶
2016-08-31发布
2017-01-01实施
中中
民共和国
国家卫生和计划生育委员会
发布
GB1886.257-2016
食品安全国家标准
食品添加剂溶菌酶
1范围
本标适用于以鸡蛋清为原料,经提取、精制等工艺制得的食品添加剂溶菌酶。
技术要求
2.1感官要求
感官要求应符合表1的规定
表1感官要求
要求
检验方法
固体
体
色泽
白色至淡黄色
浅黄色至深褐色
将适量试样均匀置于烧杯或白瓷盘内,于自然
状态
粉末
液体
光线下观察其色泽和状态
2.2理化指标
理化指标应符合表2的规定
表2理化指标
指标
项目
检验方法
液体
嗨活力/U/
符合标示值
附录A中A.
水分,c/%
GB509.
灰分,/%
B5009.4
H
附录A中A.3
铅(Pb)/(mg/kg)
2.0
GB5009.12
总伸(以As计)/(mg/kg)
1.0
GB5009.11
2.3微生物指标
做生物指标应符合表3的规定
GB1886.257-2016
表3微生物指标
日
指标
检验方法
菌落总数/000
(B4789,2
髯菌和酵母/LCFU/g(mL)
GB1789,15
大肠埃希氏/ MPN/g(mL)
GB1789.38
沙门氏闲/25g(mL)
不得检出
B4789.4
金黄色葡萄球菌,25g(mL)
不得检出
GB1789.10定性检验
GB1886.257-2016
附录A
检验方法
A.1一般规定
本标准除另有规定外,所用试剂的纯度应在分析纯以上,所用标准滴定溶液、杂质测定用标准溶液
制剂及制品,应按GB/T601、GB/T602、GB/T603的规定制备,实验用水应符合GB/T6682中三级水
的规定。试验中所用溶液在未注明用何种溶剂配制时,均指水溶液
A.2酶活力的测定
A.2.1方法原理
溶菌晦可水解细菌的细胞壁,造成藤黄微球菌的溶解而引起溶液败光度值的降低
个渀蘭嗨活力单位定义为25℃,pH6.2条件下,使用藤黄微球菌悬浊液在450nm处每分钟引
起吸光度变化为0.001所需溶菌晦的量。
A.2.2试剂和材料
A.2.2.1藤黄徴球菌:ATCC4698或CICC10680
A.2.2.,2.1mol/L磷酸盐缓冲液:pH6.2。
称取11.70g磷酸二氢钠(NaH2PO4?2H2O)、7.86g磷酸氢二钠(Na2HPO4?12H2O)及0.372g
乙二胶四乙酸二钠(EDTA-2Na)于无菌水屮并稀释定容至1000mL。调整缓冲溶液pI至
注:用小份缓冲溶液检査pH,以避免缓冲溶液被污染。如果需要,通过加人多的憐酸二氢钠溶液或磷酸氢二钠
溶液调整pH。
A.2.2.3溶菌晦标准品:蛋清溶菌酶。
A.2.2.4底物溶液:用磷酸盐缓冲液制备50mL.藤荳微球菌悬浊液。使用前,底物于37℃培养30min。
该底物溶液温下可稳定2h。以磷酸盐缓冲液调分光光度计零点,然后测定底物溶液的吸光度,
450nm下读数应为0.70士0.1。
A.2.3仪器和设备
A.2.3.1分光光度计:精度士0.001。
A.2.3.2pH计
注:所用的器Ⅷ应保持无菌,保证工作环境的清洁。
A.2.4分析步骤
A.2.4.1试样溶液的制备
准确称取100mg.1mg试样,置于50mL容量瓶中,用约25mL磷酸盐缓泖液搅拌溶解并稀释
定容,充分混匀。再转移3mL上述试样制备溶液至100mL容量瓶中,用磷酸盐缓冲液搅拌溶解并稀
释定容
GB1886.257-2016
A.2.4.2标准溶液的制备
精确称取50mg蛋清浴菌嗨标准品于50mL容量瓶中,用约25mL磷酸盐缓沖液搅拌溶解并稀释
定容,充分混匀(如果需要,冷冻该溶液以备后续测定)。转移3m1.上述标汇制备溶液至100ml.谷量
瓶中,用磷酸盐缓冲液搅拌溶解并稀释定容
A.2.4.3测測定
取3份标准溶液和3份试样溶液进行测定
25C室温下,将1cm比色皿放入分光光度计,用磷酸盐缓冲液调整吸光度零点。吸2.9mL底物
溶液于比色皿,最初450nm处吸光度应为0.70+0.10,3min之内初始吸光度值变化应小于或等于
0.903时,方可开始测定。吸取0.1mL标准溶液加入底物溶液,充分混合。记录3min吸光度值的变
化,每15s记录一次吸光度值。每分钟吸光度值变化应在0.03~(0.08,若不在要求范围需调整试样溶液
的浓度。重复作测定试样溶液
反应1min后稳定,计算时忽略最初1min的读数
A.2.4.4结果计算
晦活力X,按式(A.1)计算:
2×1×0.001
式中
A1一试样在450nm处反应1min时的收光度;
试样在150mm处反应3min时的吸光度;
用于分析的试样制备溶液中的溶菌酶质量,单位为亳克(mg);
获得1min和3min吸光度读数所用的时间,单位为分钟(min)
由单位溶菌酶每分钟引起的吸光度降低的值。
试验结果以平行测定结果的算术平均值为准。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差
值不大于算术平均值的10%
A.3p的测定
A.3.1仪器
A.3.1.1酸度计:精度0.01pH,备有玻璃电极和甘求电极(或复合电极
A.3.2分析步骤
按仪器使用说明书调试和校正酸度计。
用无菌水配制15g/L的溶菌待测液(液体产品直接测定)。用水冲洗电极探头,用滤纸轻轻吸
千,将电极插人待测液中调节温度调节器,使仪器指示温度与待测液温度相同,稳定后读数。
所得结果表示至一位小数。
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