GBT 5009.208-2008 食品中生物胺含量的测定.pdf

CS67.040
C53
中华人民共和国国家标准
GB/T5009.208-2008
食品中生物胺含量的测定
Determination of biogenic amine in foods
2008-11-21发布
2009-03-01实施
中面国家标准化管理委员公发布
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GB/T5009.208--2008
前
本标准的附录A为资料性附录。
本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。
本标准由中华人民共和国卫生部负责解释。
本标准起草单位:中国疾病预防控制中心营养与食品安全所。
本标准参加起草单位:北京市疾病预防控制中心、娴台大学、河南省药品检验所。
本标准主要起草人:昊永宁、赵云峰、李志军、吕斌、李敬光、张磊、邵兵、苗虹
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GB/T5009.208--2008
食品中生物胺含量的测定
]范围
本标准规定了食品中色胺、β苯乙胺、腐胺、尸胺、组胺、酪胺、亚精胺和精胺含量的测定方法。
本标准适用于酒类(葡萄酒、啤酒、黄酒等)、调味品(醋、酱油等)、水产品(鱼类及其制品、虾类及其
制品)、肉类及乳制品中生物胺的测定。
本标准定量限
a)酒类、醋等调味品:色胺3g/kg、R苯乙胺10g/kg、腐胺3g/kg、尸胺?g/kg、组胺
10Ag/kg、路胺10Fg/kg、亚精胺5Ag/kg、精胺7Pg/kg。
b)水产品、肉类、乳制品及以豆类为原料的调味品:色胺15g/kg、-苯乙胺40g/kg、腐胺
15g/kg、尸胺35g/kg、组胺50Hg/kg、路胺25g/kg、亚精胺25g/kg、精胺35g/kg。
2原理
以1,7-二氨基庚烷为内标,以5%三氯乙酸为提取溶液,振播提取,以正已烷去除脂肪,经过三氯甲
烷-正丁醇(1+1)液液萃取净化后,以丹破酰氯为行生剂,60℃衍生30min,采用高效液相色谱的C2柱
分离,紫外检测器检测,内标法定量。
3试剂和材料
除非另有规定,本标准中所用试剂均为分析纯
3.1甲醇(CH1O):色谱纯
3.2两酮(C3HO):色谱纯。
3.3乙醚(C4HaO):重蒸。
3.4正丁醇(C4H1O)。
3.5三氯甲烷( CHCI)。
3.6无烷(CaH14):色谱纯。
7谷氨酸钠(C5 Ha NNAO,)
3.8碳酸氢钠( NAECO2)。
3.9氯化钠(NaCL)
3.10氢氧化钠(NaOH)。
3.11盐酸(HC])
3.12三氯乙酸(C2IHCl3O2)
3.13组胺盐酸盐( histamine dihydrochloride,CsHN。·2HCI)标准品(纯度>99%,计算时应折算掉
盐酸盐,CHN3/CsHN3?2HICl=155/184)
3.14β苯乙胺(β- phenylethylamine,CsH1N)标准品(纯度>98%。
3.15酪胺盐酸盐( tyramine hydrochloride,CgH2CINO)标准品(纯度>99%,计算时应折算掉盐酸盐,
Ca NO/C NO.HCI=137/174
3.16腐胺( putrescine,C4H12N2)标准品(纯度>98%)。
3.17尸胺( cadaverine,CH1N2)标准品(纯度>98%)
3.18色胺( tryptamine hydrochloride, Cio H2N2)标准品(纯度>99%)。
3.19亚精胺( spermidine,CrH1yN3)标准品(纯度>97%)。
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GB/T5009.208-2008
3.20精胺( Spermine,CoH2sN4)标准品(纯度>97%)。
3.211,7二氨基庚烷(1,7- diarninoheptane,CH1sN2)内标标准品(纯度>98%)。
3.22丹磺酰氯( dansyl chloride,CH42CINO2S)标准品(纯度>95%)。
3.23生物胺标准储备溶液的配制:准确称取各种生物胺标准品适量,分别置于10mL容量瓶中,用
0.1mol/L盐酸溶液稀释至刻度,混匀,配制成浓度为1000mg/L(以各种生物胺单体计)的标准储备溶
液,置4℃冰箱储存
3.24生物胺标准混合使用液的配制:分别吸取1.00mL各生物肢单组分标准储备溶液,置于同一个
10mL容量瓶中,用0.1mol/L盐酸稀释至刻度混匀,配制成生物胺标准混合使用液(100mg/L)
3.25生物胺标准系列溶液配制:吸取0.10mL、0.25mLし、0.50mL、1.00mL、1.50mL、2.50mL、
5.00mL生物胶标准混合使用液(100mg/L),分别置于10mL容量瓶中,用0.1mol/L盐酸溶液稀释
至刻度,混?,使浓度分别为1.00mg/L、2.50mg/L、5.00mg/L、10.0mg/L、15.0mg/L、25.0mg/L
50.0mg/L。
3.26内标标准储备溶液的配制:准确称取内标物质适量,置于10mL容量瓶中,用0.1mol/L盐酸溶
液稀释至刻度,混匀,配制成浓度为1000mg/L的内标标准储备溶液,置4℃冰箱储存.
3.27内标标准使用液的配制:吸取1.00mL内标标准储备溶液,置10mL容量瓶中,用0.1mol/L盐
酸稀释至刻度,混匀,作为内标使用液(100mg/L),置4℃冰箱储存
3.28丹磺酰氯衍生剂溶液的配制:准确称取丹磺酰氯适量,以丙酮为溶剂配制成浓度为0.01ms
的衍生剂标准使用液(10mg/mL丙溶液),置4℃冰箱储存
4仪器
4.1高效液相色谱仪( HIPLC),配紫外检测器
4.2离心机
4.3旋涡混合器。
4.4恒温箱
4.5氮气浓缩器。
4.6电子天平。
4.7酸度计。
4.8超纯水器。
4.90.22Hm潐膜针头滤器。
5分析步骤
5.1试样制备
5.1.1试样提取
5.1.1.1水产品、肉类、乳制品及以豆类为原料的调味品
准确称取已经绞碎或匀浆后的水产品、肉类、乳制品或以豆类为原料的调味品10.00g,置100mL
具塞锥形瓶中,加入20mL5%三氯乙酸溶液和2.0mL(100mg/L)内标使用液,混匀,振荡提取
60min,转移至50mL离心管中,3600r/min离心10min,取上清液,置50mL容量瓶中,连续提取两
次,合并上清液,用5%三氯乙酸稀释至刻度,滤纸过滤,待净化
5.1.1.2酒类、醋及醋饮料
量取含酒类、醋或醋饮料10.00mL,加入0.2mL(100mg/L)内标使用液,采用5.1.2.2方法直接
萃取。
5.1.2试样净化
5.1.2.1除脂肪:移取上述试样提取液10.00mL,置25mL具塞试管中,加入10mL正己烧,涡旋振
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