WS 290-2008 钩端螺旋体病诊断标准.pdf

ICS11.020
C59
备案号:22759-2008
WS
中华人民共和国卫生行业标
WS290--20
钩端螺旋体病诊断标准
iagnostic criteria for leptospirosis
2008-01-16发布
2008-08-01实施
中华人民共和国但生帝部发布
WS290-2008
前言
根据《中华人民共和国传染病防治法》制定本标准。
按照国家质检总局、国家标准委公告(2005年第146号),GB159951995《钩端螺旋体病诊断标准
及处理原则》自本标准实施之日起废止。
本标准的附录A是规范性附录,附录B是资料性附录。
本标准由卫生部传染病标准专业委员会提出。
本标准由中华人民共和国卫生部批准
本标准起草单位:中国疾病预防控制中心传染病预防控制所、中国药品生物制品检定所、浙江大学
医学院、上海交通大学医学院
本标准主要起草人:蒋秀高、秦进才、严杰、郭晓奎、鲁亮。
WS290-2008
钩端螺旋体病诊断标准
范围
本标准规定了钩端螺旋体病的诊断依据、诊断原则和鉴别诊断。
本标准适用于全国各级医疗卫生机构及其工作人员对钩端螺旋体病的诊断、报告。
2术语和定义
下列术语和定义适用于本标准。
赫氏反应 Herxheimer reaction
指钩端螺旋体病患者,在接受青霉素治疗时,由于大量菌体在体内裂解,释放大量的内毒素样物质,
这些物质不仅可引起寒战、发抖、发热,而且具有特异的致病作用,使原有的钩端螺旋体病的症状、体征
加重。
群更迭 serogroup chang
同一地区不同年度,引起钩端螺旋体病流行的菌株血清群发生改变.
2.3
安水 polluted water
指受到致病性钩端螺旋体污染的江河、溯泊、池塘、水田、沟渠、地表水等水体。
3诊断依据
3.1流行病学
发病前1d~30d接触疫水,或带菌动物尿液,或带菌动物血液。
3.2临床表现
钩端螺旋体病根据临床表现主要分为:流感伤寒型、肺出血及肺弥漫性出血型、黄疸出血型、肾型及
脑膜脑炎型。其早期典型临床表现为:三症状(即寒热、酸痛、全身乏力)和三体征(即眼红、腿痛、淋巴结
肿大)。
3.2.1发热:起病急,可有畏寒。短期内体温可高达39℃左右,常为弛张热,有时也可稽留热,少数间
歇热。
3.2.2肌痛:全身肌痛,特别是腓肠肌痛明显。
3.2.3乏力:全身乏力,特别是腿软症状明显。
3.2.4眼结膜充血:轻者主要在眼球结膜、外眦及上下穹隆部,重者除角膜周围外的全球结膜血管扩张
呈网状,无分泌物,无疼痛感,不畏光。
3.2.5腓肠肌压痛:双侧腓肠肌压痛,重者拒按。
3.2.6淋巴结脚大:主要为表浅淋巴结及股淋巴结,一般为1cm~2cm,质偏软,有压痛,无化脓
3.3实验室检测
3.3.1从血液、脑脊液或尿液中分离出钩端螺旋体,见附录A.1
3.3.2从血液、尿液或脑脊液中检测出钩端螺旋体核酸,见附录A.2
3.3.3患者恢复期血清中钩端螺旋体抗体效价较早期血清有4倍或4倍以上升高,或单份血清抗体效
价≥1:400,见附录A.3。
WS290-2008
诊断原则
根据患者的流行病学、临床表现和实验室检查结果进行综合判断,病例确诊需要实验室证据
5诊断
5.1疑似病例
符合下列情况之一者即可诊断
5.1.1具备3.1加3.2.1;
5.1.2具备3.1加3.2.2
1.3具备3.1加3.2.3。
5.2临床诊断病例
符合下列情况之一者即可诊断
5.2.1疑似病例加3.2A
5.2.2疑似病例加3
5.2.3疑似病例加3
5.3实验室确诊病例
符合下列情况之者即可诊断:
5.3.1疑似病例力
5.3.2疑似病侧
5.3.3疑似病例
6鉴别诊断
钩端螺旋体病床表现复杂多样,非典型病例较多,特别是散发时容易误诊。本病应注意与流行性
感冒、流行性出血热警革热、急性黄塇型病毒性肝炎、流行性乙型脑炎等鉴别诊断,参见附录B。
0
WS290-2008
附录
规范性附录)
钩端螺旋体病的病原学和血清学诊断方法
A.1钩端螺旋体直接镜检、分离培养及分群、分型
A.1.1患者血液的直接镜检
A.1.1.1取早期患者血液一滴,加蒸馏水一滴?使细胞溶解,在暗视野显微镜下检査有无活动的钩
端螺旋体。
A.1.1.2取早期患者静脉血1mLc2nmuD于无菌试管中待凝固,离心沉淀,吸取血清与血细胞交界处
略显白色的悬液,置于载玻片上,在暗视野显做镜下检查有无活动的钩端螺旋体
A.1.3差速离心暗野检法:采集早期想者静脉血1mL如于含mL栒酸钠盐水管中。
1000/min离心10mi,吸上层血浆置另一清洁管中,3000/min~3500r/uin离心30min~6omin
弃上清,取沉淀物一滴于玻片上,用暗视野显微镜检査有无活动的钩端螺旋体。
A.1.2病原体分离培养
A.1.2.1患者血液培养:采集早期患者血液无菌操作接种于2~3管 Korthof i或EMJH等适宜培养
基中,每管按培养基体积的1%接种。血液培养管置28℃培养。每隔5d~7d取培养物在暗视野显微镜
下观察有无钩端螟旋体生长,若有生长,即为分离阳性。若未见生长,需继续培养60,仍不见钩端螺旋
体生长方作阴性处理
A.1.2.2患者尿液培养:接取病后两周以上的患者中段尿30mL~50m于无菌离心管中,以
3500r/min~4 oor/min离心1h。取沉渣0.3mL~0.5mL接种于第一管培养基中,混匀后吸0.3ml
0.5mL接种于第二管,混匀后吸Q.3mL~0.5mL接种于第三管,28℃孵育。每隔5a~7d取培养物镜
检。检查要求同血液培养。为提高检出率和减少污染,可在采集尿标本的前一天晚上给患者口服碳酸
氢钠2g~4g,同时在培养基中加入100g/mL~40g/mL氟尿嘧啶或1/200的胺嘧啶。
A.1.2.3动物接种取患者血液1mL或尿液2mL接种金黄地鼠或幼龄豚鼠体重120g~140g之间),
进行发病观察和钩端螺旋体分离
A.1.3病原体分群、分型
应用分群血清与新
分的
钩端螺旋体作显微镜凝集试验,确定菌群应用凝集素交叉吸收试验确
定菌型。
A.2钩端螺旋体核酸的检测方法、一聚合酶链反应(PCR)技
A.2.1引物
引物1(G1):5 CTGAATCGCTGTATAAAAGT-3
引物2(G2):5 GGAAAA CAAATGGTCGG/AAG3。
扩増产物分子大小:285bp
A.2.2血液标本和动物组织标本的预处理
A.2.2.1试剂配制
A.2.2.1.1血液消化液:10mmol/ L Tris-HICl、10mmol/ L EDTA、50mmol/ L NACI、2%SDS,临用前
每毫升加0.3mg蛋白酶K
A.2.2.1.2组织裂解液:10mmol/ L TRIS-HCI、25mmol/ L EDTA、100mmol/I.NaC、0.05%SDS,临
用前每毫升加0.1mg蛋白酶K
A.2.2.2操作步骤