SNT 1571-2005 进出口粮谷中呕吐毒素检验方法液相色谱法.pdf

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中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
SN/T1571-2005
进出口粮谷中呕吐毒素检验方法
液相色谱法
Inspection of deoxynivalenol in cereals for import and export
Liquid chromatographic method
2005-05-20发布
2005-12-01实施
华人民共和国
家质量嗌督检验檢疟总局
发布
SN/T1571-~-2005
前
本标准的附录A为资料性附录
本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归
木标起草単位:中华人民共和国辽宁出人境检验检疫局、中华人民共和国黑龙江出人境检验检
疫局。
本标准主要起草人:林维宣、出苗、康庆贺、王玫、曹冬梅
本标准系畄次发布的出人境检验检疫行业标准
SN/T1571-2005
进出口粮谷中呕吐毒素检验方法
液相色谱法
1范围
本标准规定了进出口粮谷中呕吐毒索检验的样、制样和液相色谱检测方法
木标雅适用于进出ロ小麦和玉米中呕吐毒素的检验
2期范性引用文件
列文件中的条款通过在本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所
有約修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不迓用于本标雅,使用本标准的各方应研究使用下列标准
最新版木的能性
SN/I'07991999进出口粮油、料检验检验一般规则
SN/T0800.1-1999进出口粮油、饲料检验抽样和制样方法
3抽样和制样
按SN/T080.]执行。在抽样和制样过程中,应防止.样品受到污染或发生呕吐毒素含量的变化
4测定方法
4.1方法提要
样品以水或乙腊十水提取,提取液经 Dontest HPLC免疫亲和柱或固相萃取(SPE)柱净化,反相
液相色谱杜分离,紫外检测器220rn波长下检测,外标法定量
4.2试和材料
水:超纯水
4.2.2甲醇:色谱纯。
4.2.3乙腈:色谱纯
4.2.4乙脂十水(84+16)。
2.5呕吐毒素标储备液:称取呕吐毒素10.0mg,用甲醇溶解并定容到10mL容量瓶中,浓虔为
100gg/mL(収吐毒素标准储备液在一20℃冷冻条件下可以贮存4个月)
4.2.6呕吐毒素标准巾阃储备液:取标准储备液1.0mI.于10mI.容量瓶中,用流动相定容,浓度为
10.0ga
4.2.7呕吐毒素标祖工作液:用上述标雅中间液,根据需要配制成适用浓度的标准工作液。所有标祖
工作液均需在冷藏条件下更存(每周配制)。
4.2.8液相色谱流动相:甲醇十水(20+80),0.45m滤膜过滤
4.2.9 DONIESL HPI.C免疫亲和柱
4.2.10固相萃取(SPE)柱: Mycosep No.225。
4.2.11聚丙烯塑料管:15mm(内径)×85mm,与固相萃攻柱( Mycoscp No.225)配套使用
4.2.12微纤维滤纸:⊥.5!m,直径I1cm
2.13聚乙二醇8
2.14离心管:10ml。
SN/T1571-2005
4.2.1510mL玻璃注射器
4.2.16膜:0.45trm。
4.3仪器和设备
4.3.1高效液相色谱仪:配有紫外检测器。
4.3.2泵沉控制台
4.3.3臣相苳取仪
4.3.4组纠均质器:20000r/min。
4.3.5涡旋均匀器
4.4测定步骤
4.1提取和净化
4.1.1免疫亲和柱净化法
提取:样品经粉碎并通过40目筛子。称取25.0g于均质杯中,加入5g聚乙醇8
L和
100mL纯水,盖上质杯的盖子,高速均质2min。静置10min,将提取液槽纹滤纸过潓,收集滤液。
取20mL滤液通过徴纤维滤纸过滤到50mL量杯中
化:将 DONTCST亲和柱(4.2.9)的盖帽取下,剪掉帽盖的封口端,再把喟盖盖上。济10mL玻璃
注射器筒(4,2.15)与亲和柱相连。准确移取上步滤液2.0mL于玻璃注射器筒中,接上泵流控制器,拔
掉亲和柱底帽。控制压力使样液以1滴/s的流速全部通过亲和柱,直至空气进入到亲和柱中,弃去全
部流出液。加10tnl,纯水以2滴/s的流速淋洗亲和柱,弃去全部流出液。准确加入1.0mIL.甲醇于玻
璃注射器针筒屮中,以1滴/s的沇速洗脱,收集全部洗脱液于10rmL玻璃管屮,氮气吹干,残留物加
L甲醇十+水(4.2.8)溶解,混匀,过滤膜(4.2.16),进样分析
4.4
固相萃取(SIPE)柱净化法
提取:样品经粉悴并通过40日筛子。称取25.0g于均质杯中,加入100mL乙腈十水(4.2.4),高
速均质3min。静置10min,将提取液经纸过滤,收集滤液
净化:移取8mL提取液于丙烯塑料管(4.2.11)中,一手持净化柱,一手持含提取液的料管,把
浄化柱橡胶法兰一端垂直缓缓推人聚?烯塑料管中(进行此步操作时不要用手指盖位浄化柱上部开
口),净化的提取液进入净化柱上部管内。收集约4mL净化的提取液。从浄化柱上部准确移取2.0mL
净化的提取液于10mL离心管(4.2.14)中,在60℃加热条件下氮气吹于(必要时加甲加快吹干),残
留物加200gL流动相(4.2.8)渀解,过滤膜(4.2.16),进样分析
4.4.2测定
4.2.1液相色谱条件
)色谱柱: Waters5CMS柱,250mmX4,6mm(内径〉,10m,或相当者;
b)流动相:见4.2.8;
流速
d)检测波长:220nmn
e)柱:室温
f)进样量:20L。
4.4.2.2色谱测定
分别取净化后的样液利标淮溶液各20xL进行HPIC分析,以其标粧溶液峰的保囧时间为依据进
行定性,以其峰面积求出样液中被测物质的含量,供计算。在上述色谱条件下,呕吐毒素的保留时间为
10.5min左右,参见附录A。
4.4.3空白试验
除不加试样外,按上述测定步骤进行