植物组织培养技术二 环境条件在
植物组织培养中温度、光照、湿度等各种环境条件,培养基组成、pH值、渗透压等各种化学环境条件都会影响组织培养育苗的生长和发育。 温度temperature 因为温度是
植物组织培养中的重要因素,所以植物组织培养在最适宜的温度下生长分化才能表现良好,大多数植物组织培养都是在2327之间进行,般采用25 2。低于15时培养,植物组织会表现生长停止,高于35时对植物生长不利。但是,不同植物培养的适温不同,百合的最适温度是20、月季足25-27、番茄是28。温度不仅影响植物组织培养育苗的生长速度,也影响其分化增殖以及器官建成等发育进程。如烟草芽的形成以28为最好,在120以下,33以上形成率皆最低。
不同培养目标采用的培养温度也不同,百合鳞片在30以下再生的小鳞茎的发叶速度和百分率都比在25以下的高。桃胚在25条件进行定时间的低温处理,有利于提高胚培养成活率。用35处理草莓的茎尖分生组织35d,可得到无病毒苗。 光照light 组织培养中光照也是重要的条件之,主要表现在光强、光质、以及光照时间方面
1.光照强度light intensity
光照强度对培养细胞的增殖和器官的分化有重要影响,从目前的研究情况看,光照强度对外植体及细胞的最初分裂有明显的影响。般来说,光照强度较强,幼苗生长的粗壮,而光照强度较弱幼苗容易徒长。
2.光质light wave
光质对愈伤组织诱导,培养组织的增殖以及器官的分化都有明显的影响。如百合珠芽在红光下培养,8周后,分化出愈伤组织。但在蓝光下培养,几周后才出现愈伤组织,而唐菖蒲子球块接种15d后,在蓝光下培养首先出现芽,形成的幼苗生长旺盛,而白光下幼苗纤细。
3.光周期light period
试管苗培养时要选用定的光暗周期来进行组织培养,最常用的周期是16h的光照,8h的黑暗。研究表明,对短日照敏感的品种的器官组织,在短日照下易分化,而在长日照下产生愈伤组织,有时需要暗培养,尤其是些植物的愈伤组织在暗下比在光下更好。如红花、乌饭树的愈伤组织。 湿度 humidity湿度的影响包括培养容器保持和环境的湿度条件,容器内主要受培养基水分含量和封口材料的影响。前者又受琼脂含量的影响。在冬季应适当减少琼脂用量,否则,将使培养基干硬,以致不利于外植体接触或插进培养基,导致生长发育受阻。封口材料直接影响容器内湿度情况,但封闭性较高的封口材料易引起透气性受阻,也会导致植物生长发育受影响。
环境的相对湿度可以影响培养基的水分蒸发,般要求7080的相对湿度,常用
加湿器或经常洒水的方法来调节湿度。湿度过低会使培养基丧失大量水分,导致培养基各种成分浓度的改变和渗透压的升高,进而影响组织培养的正常进行。湿度过高时,易引起棉塞长霉,造成污染。