GBT 11446.10-2013 电子级水中细菌总数的滤膜培养测试方法.pdf

ICS31-030
中华人民共和国国家标准
GB/T11446.10-~-2013
代替GB/T11446.10-1997
电子级水中细菌总数的
澽膜培养测试方法
Test method for total bacterial count in
lectronic grade water by membrane filters
2013-12-31发布
2014-08-15实施
中华人民共和囻国家质量监督检验检疫总局发布
GB/T1446.10-2013
前言
GB/T11446疯计结构如下
ーGB/T1146.1电了级水;
1146.2(待定
-GB/T11446.3电了级水测试方法通则
GB/T11446.4电子级水电阻率的测试方法
-GB/T11446.5、电子级水中痕量金属的原子吸收分光光度测试方法;
GB/T11446.6电子级水中二氧化硅的分光光度测试方法;
GB/T1146.7电子级水中痕量阴离子的离子色谱测试方法;
GB/"T11416.8电子级水中总有机碳的测试方法;
GB/T11116.9电子级水中微粒的仪器测试方法
GB/T11446.10电子级水中细菌总数的漶膜培养测试方法。
本部分为GB/T1146的第10部分
木部分按照GB/T1.1-2009给出的规则起草
本部分代替GB/T11446.10-1997《电子级水中细菌总数的膜培养测试方法》。
本部分与GB/^T11446.10-1997相比,主要有下列变化
3术语和定义”中去掉了“无関操作”定义,增加了“细菌总数”和“培养基”定义(见第3章);
增加了“5干扰因素”(见第5章);
删除了“10注意事项”(见1997年版的第10章)。
本部分由中华人民共和国工业和信息化部提出。
本部分由中国电子技术标准化研究院归口。
本部分起草单位:信息产业部专用材料质量监督检验中心、中国科学院半导体研究所、中国电子技
术标准化研究院、中国电子科技集团公司第四十六研究所
本部分主要起草人:王奕、诸连青、何秀坤、段曙光、提刘吐、刘筠。
本部分所代替标准的历次版本发布情况为:
CB/T11446.10-1989、GB./"T11446.10-1997
CB/T11446.10-2013
电子级水中细菌总数的
滤膜培养测试方法
范围
GB/T11446的本部分规定了电子级水中细菌总数(活菌)的滤膜培养測试方法
本部分适用于EW-⊥~EW-下级电子级水中细菌总数的测定。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注国期的版本适用于本文
件。凡是不注口期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件
CGB/T11446.1-2013电子级水
GB/T11446.32013电子级水测试方法通则
3术语和定义
GB/T11446.3·2013界定的以及下列术语和定义适用于本文件
薗落 bacterium colon
将单个菌体或孢子在固体培养基上培养一定时间后,使其生长繁殖形成肉眼可见的微生物团,即为
菌落。
3.2
菌培养法 bacterium culture metho
将一定量水样经超滤膜过滤,再用适当的培养基将留在超滤膜表面的细菌培养以形成茵落,然后计
数以测量水中活细菌的数量
3.3
细菌总数
单位体积样品中存在的有生存能力的微生物总数,不包括厌氧有机体
培养基 medium
是提供食用菌等生物生长发育所需的营养与特定环境条件的基质,般都含有碳水化合物、含氮物
质、无机盐(包括微量元素)以及维生素和水等。
4方法原理
水中的细菌经过0.45m微孔膜过速截留于滤膜上,将滤膜贴在村底(吸透了TGY培养基的滤
纸)上,在适宜的条件下进行培养,细菌繁殖成肉眼可见的菌落。细菌体内存在的脱酶,与2,3,5-三
苯基氯化四氮唑(简称T.T.C)在胞内反应使体是红色,反差增大,借此观测及计数
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GB/T11446.10--2013
干扰因素
5.1外来徽生物的污染影响分析结果,细菌分析时应特别注意
5.2将载菌膜置于培养基上时,中间如有间隙或气泡影响分析结果的现象应严格避免
6试剂
6.1空白用水:GB/T1116.12013规定的EW-「级电子级水于高压灭菌器内在1.4×10Pa压力
下,灭菌15min。
6.2TGY培养基:1L室门用水中加入10.0g蛋白胨(B.R)、6.0g牛肉膏(B.R)利和2.0g葡萄糖
(A.R),加热溶解,冷却至室温,以1mol/L氢氧化钠调节pH日至7,4-7.6,再加15.0g琼脂,加热溶解并
趁热过港(以四层纱布、一层脱脂棉为介质),装于300mL三角瓶中,灭菌后备用。
注:在制备培养基的加热过程中,需补充所损失的水分。
6.31mol/L氢氧化钠溶液:20g氢氧化钠(A.R)溶于50mL空门用水并储于聚乙烯瓶中。
6.4T.T.C溶液1.0g/I灭菌备用
7测量仪器和设备
7.1无菌室(或无菌工作台):备有功率大于或等于2W/m2的紫外灯,置于工作台上距离工作台面1.5m处。
7.2电热恒温培养箱:(20~60℃)土1℃
7.3高压蒸汽灭菌器
7.4恒温箱:CC~30℃
7.5体视显微镜。
6微孔有机滤膜:50mm,孔径0.45m格慨膜
7.7过器:50mm杯式不锈钢过滤器。
7.8各种玻璃器Ⅲ;广臼瓶、三角瓶、培养皿、量筒等
7.9酒精灯、平头锧子、纱布、棉花、定性潓纸等。
7.10抽滤系统:如图1所示
滤杯
2一滤膜
3-一载膜网
抽滤瓶
缓冲瓶;
6真空泵
图1抽滤系统示意图