GB 15193.3-1994 急性毒性试验.pdf

中华人民共和国国家标准
GB15193.3-94
急牲毒性试验
Acute toxicity test
1主题内容与适用范配
本标准规定了急性毒性试验的基本技术要求。
本标准适用于测定环境有害物质的急性毒性作用。
2原理
经口一次量给予或24h内多次给予受试物后,在短时间内动物所产生的毒性反应,包括致死的和
非致死的指标参数,致死剂量通常用半数致死剂量LD。来表示。
半数致死量(ID0)的定义
半数致死量(LDso)是使一组受试动物死亡50%的剂量,其单位是每公斤体重所摄入受试物质的毫
克数,即mg/kg体重。
4实验步骤
4.1动物
一-般均分别用两种性別的成年小鼠和大鼠。小鼠体重为18~22g,大鼠体重为180~220g。如对受
试物的毒性已有所了解,还应选择对其敏感的动物进行试验,如对黄曲霉素选择维鸭,对氰化物选择鸟
类
4.2给予受试物的途径
经口。
4.2.1动物应隔夜空腹(一般禁食16b左右,不限制饮水)。
4.2.2一般采用水或食用植物油,可考虑用羧甲基纤维素、明胶、淀粉作为混悬液;不能作成混悬液时,
可作其他型式的制备(如糊状物等)。必要时可采用二甲基亚砜。但不能采用具有明显毒性的有机化学
溶剂。如采用未知毒性的溶剂应单设对照组观察。
4.2.3给予受试物的体积,小鼠为0.4mL-/20g体重,大鼠为2.0mL/200g体重。
4.2.4一般一次性给予受试物,如估计受试物的毒性很低或溶解度很低者,可一日内多次给予。每次间
隔2~3h,仍合并作为一次剂量计算。但只须剂量达到10g/kg体重仍不引起动物死亡,即可停止再进
行更多次的给予。
4.3方法
可任选下列方法之
4.3.1恩氏(Horn)法
4.3.1.1预试验:可根据受试物的性质和已知资料,选用下述方法:一般多采用10,100和1000mg/kg
的剂量,各以2~3只动物预试。根据24h内死亡情況,估计ID-o的可能范围,确定正式试验的剂量组
中华人民共和国卫生部1994-08-10批進
1994-08-10实施
GB15193.3-94
也可简单地采用一个剂量,如215mg/kg,用5只动物预试。观察2h内动物的中轟表现。如症状严重
估计多数动物可能死亡,即可采用低于215mg/kg的剂量系列,反之症状较轻,则可采用高于此補量的
剂量系列。如有相应的文献资料时可不进行预试。
4.3.1.2动物一般每组用5只大∵小観。
4.3.1.3常用的剂量系列为:
t=0士1,士2,±3
因为剂量间距较x°1=0,士1,土2,土3为小,所以结果较为精确。一般试验时,可根据上述
剂量系列设计5个组,即较原来的方法在最低剂量组以下或最高剂量组以上各增设一组,这样在査表时
容易得出结果。
4.3.1.4正式试验:将动物在实验动物房饲养观察1~2d,使其适应环境,证明其确系健康动物后,进
行随机分组。给予受试物后一般观察7或14d,若给予4d后继续有死亡时,需观察14d,必要时延长到
28d。记录死亡数,査表求得ID。,并记录死亡时间及中毒症状等。
4.3.1.5此法优点是简单易行,节省动物;缺点是所得LD3的可信限范围较大,不够精确。但经多年来
的实际应用与验证,同一受试物与寇氏法所得结果极为相近。因此对其测定的结果应认为是可信与有效
的
4.3.2寇氏( Kerber)法
4.3.2.1预试验:除另有要求外,一般应在预试中求得动物全死亡或90%以上死亡的剂量和动物不死
亡或10%以下死亡的剂量,分别作为正式试验的最高与最低剂量。
4.3.2.2动物:除另有要求外,一般以设5~10个剂量组,每组6~10只动物为宜
4.3.2.3剂量:将由预试验得出的最高、最低剂量均换算为常用对数,然后将最高、最低剂量的对数差,
按所需要的组数,分为几个对数等距(或不等距)的剂蜇组。
4.3.2.4试验结果的计算与统计
4.3.2.4.1列试验数据及其计算裘
包括各组剂量(mg/kg),剂量对数(X)、动物数(n)、动物死亡数(r)、动物死亡百分比(P,以小数表
示),以及统计公式中要求的其他计算数据顼目。
4.3.2.4.2LD3a的计算公式
根据试验条件及试验结果,可分别选用下列三个公式中的一个,求出 log LDSO,再査其自然数,即
Dsa(mg/kg)
4.3.2.4.2.1按本试验设计得出的任何结果,均可用式(1)
logldso=>y(x,+x+)(P+ーP.)…
式中:X;与X及P与P,一分别为相邻两组的剂量对数以及动物死亡百分比。
4.3.2.4.2.2按本试验设计且各组间剂量对数等距时,可用式(2)
iogldso =XK
P: P
式中:XK一一最高剂量对数,其他伺式(1)
4.3.2.4.2.3若试验条件同4.3.2.4.2.2且最高,最低剂量组动物死亡百分比分別为100(全死)和0