DB13T 1767-2013 苹果品种DNA指纹鉴定.pdf

CS65.020.20
B O
1DB13
河北省地方标准
DB13/T1767--2013
苹果品种DNA指纹鉴定
2013-09-05发布
2013-09-30实施
河北省质量技术监督局发布
DB13/T1767~-2013
前
本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草.
本标准由河北省林业厅提出。
本标准起草单位:河北农业大学。
本标准主要起草人:刘兴菊、杨敏生、梁海永、张军、左立辉、李雪雁、姚伟明、杨立华、韩志校
魏姗姗、甄红伟、工瑞霞。
ww. by [XW.con
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DB13/T1767~-2013
苹果品种DNA指纹鉴定
范围
本标准规定了苹果品种D呱A指纹鉴定的方法及判定标准。
本标准适用于苹果品种鉴定及河北省苹果品种DNA指纹库的建立。
原理
不同苹果品种出于遗传组成不同,基因組DMA中简单重复序列的重复次数有差异,这种差异可经过
PCR扩增、电泳分离、显色程序绘制的バA指纹图谱加以区分,从而对不同品种进行鉴定。从苹果幼苗、
叶片等组织中提取总DNA,利用SR引物对位于不同染色体上的SSI位点进行PCIお增,不同碱基长度的PCR
扩增产物通过聚丙烯酰胺凝胶电泳分离(或通过のNA分析仪、测序仪进行分离),并通过染色显示DNA
指纹谱带类型
3仪器设备及试剂
苹果品种DN指纹鉴定所需仪器设备及试剂名单见附录A。
溶液配制
苹果品种DNA指纹鉴定相关溶液配制方法见附录B。
5鉴定方法
5.1样品准备
5.1.1取样量
每份送检样品至少检测3个个体,每个个体至少1g,対一致性差的样品应至少检测5个个体。
5.1.2品种比较方式
成对品种的比较
送检样品提供两份,一份为待检品种,一份为对照品种。将待检品种与对照品种直接进行成对比
较。杂交后代需提供母本与父本的样品。
b)品种与DバA指纹库入库品种的比较
送检样品可提供一份。将待检样品与DNA指纹炸所有入库品种的指纹进行比较,筛选出指纹最相
似或相同的品种作为待检品种的近似品种,然后将待检品种与近似品种直接进行成对比较。
5.2DNA提取