制备水溶性的叶绿素衍生物示例.pdf

制备水溶性的叶绿素行生物示例
叶绿素的提取
预处理采集新鲜的竹叶.称取1Og左右.洗浄后剪成碎片.放入沸水中浸烫1-2min.取出叶片用
冷水急速冲凉再用搅拌器进一步搅悴.以利于溶剂浸提。
溶剂浸提
将预处理过的竹叶放入供量瓶中.加入2.5倍量的85%丙酮.置于50℃水浴上浸提2次.第
次2h.第二次1h。
浓缩
减压过滤分离出绿色浸提液进行蒸馏.蒸出的丙酮可回收使川。蒸馏时注意控制温度不
得超过850C。停止蒸馏.趁热倒出物料.冷却至室温.叶绿素糊状析出。分离除去黑褐色的
液体.得糊状叶绿素
叶绿素衍生物的制备
叶録素的皂化及萃取
用95%乙醇20ml溶解所得糊状叶绿素.再加入适量的5%氢氧化钠乙醇溶液.置丁60
℃水浴上:加热皂化30min。取出少量皂化液.加入等量石油振摇.静置.观察上:层石油醚的颜
色.判断皂化是完全。为除去叶绿素皂化液中的杂质.需用石洲迷处理皂化液。于皂化液中
加入等体积的石油瞇进行萃取。将萃取液定容为25m1,队中取出1.25m1,川于测定叶绿素含
量用.剩余的萃取液分成3份用丁制备叶绿素衍生物用。
叶绿素铜钠盐的制备
(1)酸化置铜
取萃取液一份(7.5m1),加入盐酸调节pH值至中性或微酸性.然后加入5‰锍酸铜溶汶
再用盐酸调节pH值为2-3。置60℃水浴中保持3omin.使其充分进行置铜反应。
(2)纯化及成盐
置铜定成后.加一倍体积的水稀释.叶绿素铜酸即可析出。用微型抽滤器分离.然后用蒸馏
水、石油醚顺次洗涤数次以除去各种杂质。
用乙醇溶解叶绿素铜酸,7{加入适量的1%氧氧化钠乙醇溶液.至溶液州为11左石.搅拌
15min.即得叶绿素铜钠}h溶液。抽滤7{η蒸馏水洗涤1}2次洗涤液与滤液合步{置}几表而
Il上.在60}800Cト烘干得墨绿色的叶绿素铜钠1hRn.0
叶绿素锌钠盐的制备
另取一份萃取液将叶绿素铜钠Ihm.制备步骤中的“酸化置铜”改为“酸化置锌”.用氯
化锌代替硫酸铜.可得到叶绿素锌酸.再经过纯化及成Ihrm,即能制得叶绿素锌钠lhm.。3.2.
4叶绿素铁钠盐的制备取第二に份萃取液.酸化后加入氯化亚铁溶液置60℃水浴中进行置换反
.可得到叶绿素铁酸。经过纯化及成1hm.制得叶绿素铁钠盐。
核钉配合物为模型研究了改变蛋白质之类的中介物质对分子内ET速率的影响”
3金属离子与细胞的相工作用
311把细胞作为一个复杂反应系统来研究在研究金属离子与细胞相互作用时,细胞表
现为ー个多靶分子系统"一种金属离子的约理和毒理作用都是它与细胞中几种靶分子相互作
用的总表现"例如顾铂的药理研究表明,DNA是靶分子"把细胞作为复杂反应系统来研究它们
与金属离子的作用时,需要确定靶分子的靶位!它们与金属离子作用的顺序!反应过程!局部的
变化如何变成整体的变化等"312细胞内外局部变化引起整体变化的研究金属离子与细胞
相工作用时,开始是局部变化,而后引起整体变化"从化学上研究这种传逆和放大是怎样发生
的,既有理论意义,也有实际意义"人们已经注意到金属离子与生物大分子以及憐脂结合时,生
物分子构象发生变化"但最近开始意识到,细胞里的这种构象变化所产生的效果与在溶液中
大不相同”除构象变化外,引起信息传递放大的过程还应包括生物大分子组装的动态改变!白
由基传递与信息放大等
313反应组合产生的生物效应研究每种生物效应都是纠合起米的化学反应产生的总表
现,例如,FcO)EDTA进攻软骨细胞时,发生的反应次序大体上为:铁催化下产生活性氧!憐脂不
饱和脂肪酸链的过氧化和蛋白质统基以及硫醚基硫的氧化,蛋白质交联和降解以及蛋白质的
构象改变,细胞内Ca2+浓度增高后,蛋白质憐酸化改变和细胞骨架蛋白聚合)解聚平衡改变,细
胞表达改变!细胞外基质异常!羟基磷灰质晶体成核)成长异常"作为生物效应,可归纳为细胞
内的氧化性损伤与细胞分化!基因表达改变及基质损伤造成的基质异常和矿化异常”
4儿种元素的生物无机化学
411硒化合物的生物无机化学(1)含硒生物活性物质的分离:含硒生物活性物质除谷朓
肽过氧化物晦外,还有磷脂过氧化氢谷朓肽过氧化物和5c)DI脱碘晦"这些悔中的硒
是以研代半胱氮酸和代蛋氨酸残基存在"(2)含研化合物在体内的转化:该项研究的目的是
弄清楚蛋白的合成究竟是硝的掺入还是由特定基团的指导"(3)硝化合物生物效应的分子
机理:倆化合物保护细胞免受氧化性损伤的机理研究是一项重要课题"现已发现,化合物能
清除活性氧或通过细胞相互作用保护细胞"(4)晦的结构与功能的关系:现已发现,各种研
活性中心都含有研代半胱氨酸残基,而且SeH周围的疏水环境对维持酶的活性具有重要意义
酶模型化合物的研究,为找寻新硒酶!硒蛋白提供了依据
412钒的生物无机化学
钒化合物对于治疗糖尿病有一定作用,其化学基础是,钒酸根作为磷酸根的类似物影响核
苷酸和磷酸参与的生化反应过程,而V2+作为Fe2+类似物可以通过T自由基反应表现出某些
生物效应"最近,关于杂多酸的抗病毒作用及一氧化氮的血管舒张作用也引起了生物化学家
的重视"5金属和金属蛋白的结构与功能关系的研究
511载氧蛋白研究课题包括FeO)氧合而不氧化的原因,氧分子配位引起整个血红蛋白
构象变化,产生正协同效应的机理;氧分子进入和离开血红素活性中心的途径:FeO)与O2之间
的相互作用的本质等"为解决这些问题,设计了许多精巧的模型物,如篙笆形!帽子形等"模拟
疏水环境的研究,如将卟啉铁O纳入脂质体或胶束!环糊精或高分子材料中,也得到在一定条件
下能可逆载氧的化合物,引起人们的极大兴趣"
512血红素以铁卟啉为中心的血红素在生命过程中发挥重要作用"彻如,细胞色素
P)450是一个包含大约150多种异构酶的家族"在结树!功能关系上,有许多问题需要通过生物
尤机化学来解決,如:铁的氧化态改变过程;铁与氧的健合方式;活性氧的产生机理;氧从活性中
间物转移到底物上的途径;P)450完的分子识別能力的产生等"最近用计算机图形显示方法
岍究P)450的分子识别能力,其研究结果不但能解释不同P)450对底物的识别能力,还对活性
部位结构及机理给出一个更整体性描述"含血红素活性中心的晦类棋多,功能各异"过去以研
究单一酶为主,今后若能研究它们的共性与个性,探讨为什么卟啉坏上取代基和轴向配体的差