SNT 2660-2010 食品微生物实验室菌种保藏方法.pdf

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中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
SN/T2660-2010
食品微生物实验室菌种保藏方法
Preservation methods for culture collection in foodstuff microbiology laboratory
2010-11-01发布
2011-05-01实施
中华人民共和国
国家质量嗌僭检验检疫总局发布
SN/T2660-2010
則言
本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。
本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口
本标准起草单位:中华人民共和国天津出人境检验检疫局
本标准主要起草人:张海滨、高旗利、张霞、刘培、王乃福、张海英、吴冬雪。
SN/T2660-2010
食品微生物实验室薗种保藏方法
范围
本标准规定了食品微生物实验室常用的菌种保的定义、技术原则、技术要求和技术方法。
本标准适用于食品微生物实验室菌种的保藏。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文
件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB19489实验室生物安全通用要求
病原微生物实验室生物安全管理条例
人间传染的病原微生物名录
动物病原微生物分类名录
3定义
下列术语和定义适用于本文件。
茵种保藏 culture preservation
将微生物菌种用各种适宜方法妥善保藏,避免死亡、污染,保持其原有性状基本稳定
定期移植法 periodical subculturing
又称传代培养保藏法,包括斜面培养、穿刺培养、液体培养等。将菌种接种于适宜的培养基中,最适
条件下培养,待生长充分后,于4℃~6℃进行保存并间隔一定时间进行移植培养的一种菌种保疲
方法。
3.3
液体石蜡法 preservation in liq uid paraffin
又称矿物油保臧法,定期移植保藏法的辅助方法。将菌种接种在适宜的斜面培养基上,在最适条件
下培养至菌种长出健壮薗落后注入灭茵的液体石蜡,使其覆盖整个斜面,再直立放置于低温(4℃~
6℃)干燥处进行保存的一种菌种保藏方法。
瓷珠保藏法 porous beads preservation
将培养好的微生物细胞或孢子制成悬浮液,转人装有无菌多孔玻璃珠(或瓷珠)的无菌瓶中,使其吸
附于玻璃珠表面,去除多余悬浮液,低温冷冻保存的一种菌种保藏方法
冷冻干燥保藏法 freeze-drying
原理是微生物细胞在冷冻、减压条件下,发生“升华”脱水,细胞的生理活动趋于停止,得以长期维持
存活状态
SN/T260-2010
液氮超低温保藏 preservation in liquid nitrogen
将微生物菌种保疲在一196℃的液氮中,或保疲在-150℃的气相氮中。其原理是微生物在
130℃以下新陈代谢趋于停止,因而能长期、有效地保疲。
80℃低温保藏 preservation at-80℃C
将微生物菌种保藏在一80℃冰箱的一种保藏方法。原理是低温条件可减缓微生物的新陈代谢,以
达到长期有效地保疲微生物
基本原则
4.1微生物菌种的实验室操作应符合《病原微生物实验室生物安全管理条例》、《人间传染的病原微生
物名录》《动物病原微生物分类名录》及GB19489的有关要求
4.2针对微生物菌种特性选择适宜的保藏方法,宜采用两种或两种以上方法保存,以保持菌种的原有
性状稳定和避免损失
4.3微生物菌种保藏工作不能对周围环境造成污染和危害
技术要求
5.1微生物菌种保藏所使用的器皿要求清洁、透明、无破损、无裂痕
5.2根据微生物菌种保藏需要选择适合培养基。
5.3微生物菌种保藏过程中应注意无菌操作,避免污染。
5.4微生物菌种移植过程,要对菌株編号及培养基分别进行核对,避免发生错误
5.5微生物菌种培养至稳定期或成熟期后进行保藏。
5.6微生物菌种移植培养后,应与原保藏株的培养特性和菌株登记信息对照,检查无误后再存放
5.7微生物菌种保藏期间,要定期检査菌种存放设施的温度和湿度、菌株有无污染、棉塞有无变,如
发现异常应重新移植培养后更换。
5.8微生物菌种保藏应建立和保存其所有菌种的收集、储藏、保存和确认试验的记录。管理记录中还
应包括(但不限于)以下内容:
a)从原始菌种传代到工作菌种的代数;
b)菌种生长的培养基及孵育条件;
c)菌种生存条件。
相关记录参见附录A
6技术方法
6.1定期移植法
6.1.1适用范围
本方法适用于大多数细菌和真菌
6.1.2原理
低温保藏可减缓微生物菌株的代谢活动,抑制其繁殖速度,达到减少菌株突变、延长菌株保藏时间