YCT 184-2004 烟草及烟草制品 烟草特有N-亚硝胺的测定.pdf

ICS65.160
X87
备案号:14402-2004
中华人民共和国烟草行业标准
YC/T184~-2004
烟草及烟草制品
烟草特有N-亚硝胺的测定
Tobacco and tobacco products
Determination of tobacco specific N-nitrosoamines
2004-10-19发布
2005-03-01实施
国家烟草专卖局发布
YC/T184--2004
前言
本标准的附录A为资料性附录
本标准由国家烟草专卖局提出
本标准由全国烟草标准化技术委员会(TC144)归口
本标准起草单位:中国烟草总公司郑州烟草研究院。
本标准主要起草人:赵明月、谢复炜、胡清源、王昇、刘克建。
YC/T184--2004
烟草及烟草制品
烟草特有N-亚硝胺的测定
1范围
本标准规定了烟草和烟草制品中四种烟草特有N亚硝胺[N-亚硝基降烟碱(NNN)、N亚硝基新
烟碱(NAT)、N亚硝基假木贼碱(NAB)、4-(甲基亚硝胺基)-1-(3-吡啶基)-1-丁嗣(NNK)】的测定方法。
本标准适用于烟草和烟草制品。
2规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有
的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究
是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。
GB/T5606.1卷烟第1部分:抽样
GB/T19616烟草成批原料取样的一般原则(GB/T19616-2004,ISO4874:2000,MOD)
YC/T31烟草及烟草制品试样的制备和水分测定烘箱法
3术语和定义
下列术语和定义适用于本标准
烟草特有N-亚硝胺 tobacco specific N- nitrosamines( ISNAS)
仅在烟草和烟草制品中存在的N亚硝胺
4原理
用二氯甲烷的碱性溶液萃取烟草和烟草制品中的 TSNAS,萃取液经碱性氧化铝层析柱纯化,通过
气相色谱-热能分析联用仪(GC-TEA)定量分析检测其中四种 TSNAS的含量。
5试剂
除特别要求以外,均应使用分析纯级试剂,水应为蒸馏水或同等纯度的水。
5.1二氯甲烷,色谱纯
5.2甲醇,色谱纯
5.3无水碗酸钠,分析纯
5.410%氢氧化钠溶液,分析纯。
5.5碱性氧化铝,层析用(200目~300目)。
5.6内标溶液:配制浓度为4000ng/mL的N-成基(3-甲基吡啶基)-亚硝胺溶液作为内标溶液,以二
氯甲烷(5.1)为溶剂。
5.7 TSNAS标准系列溶液:按下列浓度范围配制 TSNAS标准系列溶液,以二氯甲烷(5.1)为溶剂,其
中内标浓度为400ng/mL。标准溶液应当存放在一20℃冰箱中,有效期6个月。
NNN: 100 ng/ml, 200 ng/ml, 500 ng/ml, 1 000 ng/ml, 2 000 ng/ML, 5000 ng/ml.
NAT: 100 ng/ml, 200 ng/ml, 500 ng/ML, 1 000 ng/ml, 2 000 ng/ml,5 000 ng/ml
YC/T184-~2004
NAB: 30 ng/ml, 60 ng/ML, 150 ng/ml, 300 ng/ml, 600 ng/ml, 1 500 ng/ml
NNK: 100 ng/ml, 200 ng/ml, 500 ng/ml, 1 000 ng/ml, 2 000 ng/ml, 5 000 ng/ml
6仪
常用实验仪器及下述各项
6.1分析天平:感量0.1mg。
6.2气相色谱仪(配有热能分析仪检测器)。
6.3色谱柱:弹性毛细管柱30m×0.32mm×1xm,固定液5%-二苯基-95%-二甲基聚硅烷。
6.4柱前保护柱:弹性毛细管柱1m×0.32m×1gm,固定液5%-二苯基-95%-二甲基聚硅烷。
6.5超声波发生器
6.6浓缩仪。
6.7玻璃层析柱:具塞,内径为20mm,长度为500mm。
7分析步
7.1抽样
按GB/T19616和GB/T5606.1抽取样品
7.2烟草样品制备
按YC/T31制备试样,并测定水分含量
7,3定次数
每个样品应平行测定两次。
7.4样品分析
7.4.1样品萃取
烷溶液(5.1),置于超声波发生器(6.5)超声(频率:40kH)提取20s合
称取1.00g烟样,将其放入100mL維形瓶中,加入1mL10%氢氧化钠溶液(5.4)和20mL二氯甲
7.4.2柱层析
7.4.2.1层析柱准备
碱性氧化铝(5.5)在110℃条件下活化2h待用。层析柱(6.7)保持洁净干燥,先加人30mL二氯
甲烷(5.1),将15g碱性氧化铝(5.5)经湿法处理后加入到层析柱(6.7)中,用玻棒搅拌氧化铝赶走气
泡。再加人2g已烘干的无水碗酸钠,用50mL二氯甲烷洗脱层析柱(6.7)。当液面下降至硫酸钠层时
关闭层析柱活塞。
7.4.2.2析
将锥形瓶中所有样品加人层析柱(6.7),并用5mL×3二氯甲烷(5.1)洗涤锥形瓶内壁。洗涤液加
入层析柱《(6,7)。等液面接近柱头后,再用30mL二氯甲烷(5.1)洗脱层析柱(6.7),该部分洗脱液不收
集。最后用100mL甲醇:二氯甲烷为8:92(体积比)溶液洗脱层析柱(6.7),收集该部分洗脱液
7.4.3洗脱液浓缩
在洗脱液中准确加人100pL内标溶液(5.6),在高纯氮气保护吹扫下将其浓缩至1mL左右,转移
到2mL色谱小瓶中进行GC-TEA分析,白肋烟和烤烟样品的色谱图示例在附录A中已给出。
7.5GC-EA分折
7.5.1气相色谱仪(6.2)条件
7.5.1.1色谱柱(6.3)。
7.5.1.2柱前保护柱(6.4),在进行100次样品分析后需更换
7.5.1.3程序升温:初始温度50℃,保持2min;10℃/min升至180℃;保持10min;10℃/min升至
230℃;30℃/min升至260℃;保持20min。