环境内分泌干扰物研究的进展.pdf

海洋湖沼通报
2009午
Transactions of Oceanology and Limnolo gy
文章编号:1003-6482(2009003-0091-07
环境内分泌干扰物诱导鱼类产生
卵黄原蛋白的研究进展
綮文婷,汝少国
(中国海洋大学海洋生命学院,山东青出266003)
摘要:前凵经被确认的坏境内分泌十扰物达100余种,其中能够诱导鱼类产生卵黄原蛋白
( Vitellogenin,VTG的环境内分泌下扰物包括农药、多氯联术类化合物、邻米二甲酸阳类化
合物等儿大类。由于环境内分泌千扰物结构的复朵性,其诱导机制成为近年研究的热点。本
文综述了能够诱导鱼类产生VTG的环境内分泌千扰物的种类、筛选方法及作用机制。
关键词:环境内分泌千扰物;卵黄原蛋白(VTG;雌激素
中图分类号:X71.5
文献标识码:A
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卵黄原蛋白(VTG是存在于性成熟卵生脊椎动物血清中的一种糖磷脂蛋白,是一种雌性
時有的血清蛋白,在卵黄形成期雌激素的刺激ド,由厂脏产4:通过血液循环进入卵巢.被卵巢
吸收。但山于雄性卵生脊椎动物也有vTG基因,在雌激素或类雌激素的诱导下,也可以合成
VTG。因此,通过检测雄性动物血液中vTG的合成可指示环境中污染物的雌激素效应。目
前,以鱼类VTG为生:物标志物,已筛选出水坏境中的多氯联苯(PCBs)、正基酚(NP)、有机氯
杀虫剂、有机磷杀虫剂马掠硫磷、乙炔雌二醇、植物雌激素β-谷甾醇等100余种化学物质能够
诱导鱼类产4:VTG,出于这些化学物质结构非常复杂,其诱导鱼类广4:VTG的机制尚不完
个清楚,因此,本文综述了能够诱导鱼类产生VTG的环境内分泌下扰物种类、结构与诱导效
应关系以及诱导VTG产生的作用机制最新进展
诱导鱼类产生VTG的环境内分泌干扰物
诱导鱼类产4VTG的坏境内分泌干扰物主要包恬农药、多氯联类化合物、邻苯二甲酸
类化合物、烷棊酚类化合物、合成雌激素和植物雌激素等。
合成雌激素包括与雌二醇结构相似的类固醇衍行生物,都具有内分泌じ扰作用,如二.甲基乙
烯雌酚(DES)、し烷雌酚、乙炔雌二醇、炔雌瞇等。 Angus等报道,给食蚊鱼( Cam busia a
fmis)喂食不同浓度17a乙炔雌二醇(EE2)浸泡的料,浸泡浓度在1.0ugEE2?g2以上时
可在试验组所有鱼的血液内测到VTG的存在,其浓度随EE2浓度增加间明显升高。 Peters
等报道,100ng-L'EB2暴露21d可透导爪( fundulus heteroclitus)生.VTG。某些植物
雌激素也有类似作用,包括染料木黄、染料木苷黄兩、黄豆甘原、黄豆甘、β-谷醇等。Heis
ka等报道,植物甾醇类(80%-谷甾醇)可诱导雄鱼产生VTG。在离体伯类肝细胞中,β-谷
基金项目:国家目然科学基金项目(3020021130671618)资
第一作者简介:蔡文婷(1983-),女,顷士研究生,主要从事鱼类生态赤理学研究。H-mail:cwt403126.com
通讯作者:汝少国(1967),1-mail: ruse(couc.cdu.cn
收稿日期:2008-04-07
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淄醇通过偶咲雌浟素受体诱导ⅴTG的产生;活体试验中.β-谷鯔醇可诱导 VTG MRNA的
生:,并使血浆VTG浓度增加31。
人工合成的化学物质多氯联萃?、非离子表面活性剂巾烷基萃酚聚氧乙烯瞇类物质,如
工基酚(4-NP)、4氵基酚(4OP)等的降解产物也具有雌激素活性,可以诱导vTG的产4
Lv等叨报道,给泥鳅暴露F2和双A(BPA),VTG诱导量呈时问和剂量依赖性增加,在高浓
度(500gL)BPA暴露7d之内、低浓度(10100gg?L)长期暴露ド都有VTG的合成。
Schoenfuss等报道,以EPA慢性暴露标准浓度对雄性鲦伯进行4-NP的毒性暴露,14d内就
可以诱导VTG的产生。
在山经证明具雌激素效应的环境内分泌下扰物中,农药占很人的比例、如DDT中的异构
休op-DDT最早被证明有雌激素活性。 Garey等和袁红霞等川报道,高效氟氯氰菊
幣、氟氯菊恉、氯巛菊、氯菊幣等农药具有内分泌扰作用。
Christiansen等?报道,邻枣二甲酸酯类化合物如邻苯二甲酸」基苄酯、邻萃二甲酸二
啃等可诱导虹嶟鱼( Oncorhynchus m ]kiss)产生VTG,也是一类澘在的内分泌干扰化学物质
2以VTG为生物标志物的环境内分泌干扰物的筛选方法
ELISA、 Western blot是检测环境内分泌干扰物比较常见的生化检测法。邴欣等用
ELISA检测了B2诱导的金鱼( Carassius aura/1.s)血浆VTG个量。Lv等把:腺指数
(GSD、总血浆蛋白、总血浆钙、镁、锌以及血浆VTG作为檢测指标。郕欣等制备了兔抗金伯
VTG多克隆抗血清,用 Western-blot技术检測了在0.1mgL浓度暴露下,4种拟除山菊酯
类农药(氯氰菊酯、氰戊菊酯、溴氰菊酯和氰菊酯)和五种有机磷农药(氧乐果、卩棊异柳磷
水胺硫磷、乙基刈硫磷和硫磷)?雄性金鱼VTG的诱导作用。
伯类原代肝细胞筛选法是一种在离体条件下筛选环境内分泌扰物的方法。Jean等
用鲤鱼( prints Carpiの)肝细胞建立了以离体vTG的产生作为标志物的检测杀虫剂雌激素
活性的方法。Liu等报道,?氟化合物(PFCs)可诱导原代培养的雄性罗非伯( M assamica
tilapia)肝细胞产生:VTG,同时进一步提出,PFCs对原代培岁非鱼厂细胞的雌激素效应可
能是由雌激素受体途径介导的。
生化检测方法针対卵牛脊椎动物在外源雌激素刺激ド所产生的蛋白水平的生物标志物
通常诱导时间长,样本需要量人,而外源雌激素作用下,分子水平的生物标志物则会在较短的
付问内表现异常。 George等用实时定量PCR技术从mRNA水半及其蛋白产物两方面研
究了PCBs等河流污染物对欧洲比目伯的影响,相比于 ELISA检测法,这种方法吏加简便。
Barucca等?用 RE-PCR分析了卤代烃等污染物暴露下的地中海鱼种:红鲻鱼( Mullus bat
bat us)和斑鲻鱼( Mugil cep halis)、黑虾虎鱼( Robins niger)、金枪鱼( hannus thynnus)的
V TG MRNA,证实了卤代烃等污染物対VTG的诱导作用。Yan等用实时定量PCR的方
法,对E2暴露下的斑马鱼( Danio rerio)和青( Oryzias latipes)的 V MRNA进行定量,在
炳大的暴露实验中,其最低檢测限为:斑马鱼1ug?L1,青鳞0.1ルg?L。而李康和温茹
淑报道,间接晦联免疫吸附反应( ELISA)方法检测雄鱼体内的vTG,检测灵敏度为
7.8gL,由此可见,分子生物学检测方法明显优于生化检测法。
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